肺炎嗜衣原体CPAF诱导THP-1细胞产生前炎症细胞因子和凋亡

目的 研究肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)衣原体蛋白酶样活性因子(Chlamydial protease-like activity factor,CPAF)能否在体外诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,为进一步探索Cpn感染宿主致病的分子机制提供实验依据.方法 将Cpn CPAF全基因克隆于pGEX6p-2载体上,在大肠杆菌(E coli)中诱导表达重组蛋白,经去内毒素纯化柱和琼脂糖凝胶FF获得纯化且无脂多糖(LPS)污染的重组蛋白GST-CPAF.以不同浓度的该蛋白作用于THP-1,ELISA检测TNF-α吨和IL-6水平.MTT法检测经该蛋白处理后THP-1的增生或抑制作用,用Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Armexin V-FITC-PI染色法检测细胞凋亡情况.结果 制备的莺组蛋白GST-CPAF以时间和剂量依赖方式刺激THP-1分泌TNF-α和IL-6,并以剂量依赖方式抑制THP-1增殖;当GST-CPAF刺激THP-1细胞24 h后,能诱导细胞调亡.结论 制备的Cpn重组蛋白GST-CPAF能诱导THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,可能是Cpn致病机制中的一个因素.     

湖南省食源性德尔卑沙门菌耐药谱及PFGE分型研究

目的了解湖南省食源性德尔卑沙门菌的耐药谱及分子分型,建立沙门菌指纹图谱数据库。方法运用肉汤稀释法对食源性德尔卑沙门菌进行药敏试验,并采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)进行分子分型。结果 47株德尔卑沙门菌中,有46株对1种以上抗生素耐药(97.87%),有29株多重耐药菌株(61.70%);德尔卑沙门菌分为32种PFGE型,其中有10种PFGE型的菌株数超过1株。结论湖南省食源性德尔卑沙门菌分离株呈高耐药和多重耐药趋势,PFGE分子型别呈多态性,有同源菌株存在,PFGE分型为食源性疾病溯源和预警提供技术基础。     

湖南省男性 HIV ＋／AIDS 患者生殖支原体感染及其对免疫功能的影响

【目的】分析人类免疫缺陷病毒感染（HIV ＋）者和艾滋病（AIDS）男性患者生殖支原体感染状况,探讨艾滋病相关生殖支原体对人类免疫系统及免疫功能的影响。【方法】选择2013年9月至2016年1月在长沙市传染病医院就诊的86例男性 HIV ＋／AIDS 感染者,采集其首段尿,用 MGB 荧光 PCR 方法检测生殖支原体（Mg）,同时对 HIV 感染者和 AIDS 患者进行 CD4＋ T 细胞计数测定。【结果】86例 HIV ＋／AIDS 患者中生殖支原体感染26例（30．23％ ）,AIDS 患者的生殖支原体感染率稍高于 HIV ＋感染者,AIDS 患者 Mg 阳性标本中,CD4＋ T 淋巴细胞越低其所占比例越高。【结论】生殖支原体感染与患者免疫水平有一定相关性。     

肺炎嗜衣原体三种不同抗原的临床诊断价值评价

目的 研究肺炎嗜衣原体3种重组抗原Cpn0146、Cpn0147及Cpn0308应用于肺炎嗜衣原体感染血清学诊断中的价值.方法 构建pGEX6p-2/Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308重组质粒,并诱导表达重组蛋白,采用间接ELISA法和免疫印迹法(Western-blot)分析其免疫原性及其免疫反应性.建立分别以3种重组蛋白为包被抗原的间接ELISA法,与肺炎嗜衣原体IgG商品诊断试剂盒平行检测183份呼吸道感染患者的血清标本及32份沙眼衣原阳性患者血清标本,比较各方法检出准确性及阳性率.结果 GST-Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308免疫兔血清中特异性IgG抗体效价滴度分别达1:6 400、1:12 800和1:12 800以上;以3种重组蛋白为包被抗原的ELISA法准确性分别为92.3%、94.5%、96.7%.各方法检测出阳性率结果显示,Cpn0146组的阳性率为38.8%(71/183)、与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=12.07,P<0.05);Cpn0147阳性率40.9%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=8.10,P<0.05);Cpn0308阳性率44.8%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异无统计学意义(x~2=0.57,P>0.05).结论 Cpn0308在肺炎嗜衣原体感染血清学诊断实验中表现出良好的准确性(96.2%)和较高的阳性率(44.8%),可望用于进一步研制肺炎嗜衣原体诊断试剂盒.     

实验动物垫料的微生物污染监测及影响因素研究

目的对实验动物垫料进行微生物指标监测,为管理机构制定垫料的卫生标准提供依据,为垫料生产企业在加工、灭菌、包装、运输、储存等环节及动物使用单位对动物实验结果影响因素分析方面提供参考依据。方法对来自不同实验动物生产和使用单位的垫料,参照GB4789-2010、2012检测方法进行菌落总数、霉菌及大肠杆菌计数、沙门菌的检测。结果 49份未灭菌的垫料存在不同程度的细菌、霉菌及大肠杆菌污染,未检出沙门菌;不同材质的垫料在不同条件下灭菌,在121℃30 min的条件下具有最佳灭菌效果,各项微生物指标均合格;已灭菌的21份垫料有19份存在不同程度的细菌及霉菌污染,未检出沙门菌及大肠杆菌;松软的混合型刨花垫料在灭菌后7 d检测到细菌;采用敞开编织袋储存5 d即检测到细菌污染;垫料使用1 d后的菌量可达104CFU/g,细菌及霉菌含菌量按天数逐步递增,但未检出沙门菌。结论垫料使用前必须消毒灭菌,采用合理的方式储存,及时更换可改善饲养环境,可减少微生物污染,保障实验动物的质量及实验结果的可靠。     

肺炎嗜衣原体基因组学研究进展

肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae，Cpn）于1989年确定的一种严格真核细胞内寄生的原核细胞型微生物，它是重要的人类致病菌，主要引起各种急慢性呼吸系统疾病^[1]，有报道称Cpn与动脉粥样硬化的发生密切相关。2004年公布的最新伯杰氏细菌分类学手册将衣原体科分为衣原体和嗜衣原体两个属，     

2006-2009年湖南省桶装饮用水微生物检验结果分析

目的了解湖南省桶装饮用水卫生微生物污染状况,分析其饮用安全性。方法按国家饮用水检测标准方法对桶装纯净水、饮用水、矿泉水进行菌落总数、大肠菌群、致病菌、霉菌和酵母菌的实验室培养与检测,应用SPSS 15.0统计学软件分析不同饮用水总合格率之间的差异,并对抽检样品与送检样品的合格率进行比较。结果 147份桶装饮用水合格率为65.3%,不合格指标以菌落总数为主;2006-2009年不同饮用水之间总合格率差异有统计学意义（χ2=22.48,P〈0.01）;送检样品合格率为76.5%,高于抽检样品合格率51.5%,差异有统计学意义（χ2=10.1,P〈0.05）。结论加大力度对桶装纯净水进行卫生监督监测工作,找出关键控制点,是抓好桶装饮用水卫生质量的关键。     

湖南省食源性沙门菌血清型分布及耐药性研究

目的掌握湖南省食品中沙门菌血清型分布和耐药现况,为沙门菌病的防控提供科学依据。方法应用GB4789.4-2010对来自食品中的沙门菌进行血清分型鉴定,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法对分离株进行14种抗生素敏感试验。结果 150株沙门菌分离株血清群以B群为主,主要血清型为德尔卑沙门菌、阿贡纳沙门菌、瓦伊勒沙门菌。126株（84.00%）对1种以上的抗生素耐药,其中对3种以上的抗生素耐药占49.33%（74/150）;在所测定14种抗生素中,对四环素（56.00%）、阿莫西林/克拉维酸（56.00%）、氨苄青霉素（42.00%）的耐药性较高,对头孢吡肟、阿米卡星、头孢噻肟和头孢曲松较敏感;同时分离出3株耐9种以上抗生素的鼠伤寒沙门菌,其耐药谱与超级耐药鼠伤寒沙门菌DT104的耐药谱类似。结论湖南省食源性沙门菌血清型分布呈多态性,各血清型沙门菌均有不同程度的耐药及多重耐药。加强对沙门菌的综合监测,有利于指导沙门菌病的防治,提高对疫情的应急能力。     

湖南省即食食品中食源性致病菌污染状况及耐药性研究

目的 了解湖南地区即食食品中食源性致病菌的污染状况和耐药性,为预防和控制食源性疾病提供科学依据. 方法 从湖南地区的农贸市场、超市和餐饮单位采集即食食品(凉拌菜和熟肉制品),依据GB 4789-2010和GB/T 4789-2008方法,对样品进行沙门菌等4种食源性致病菌检测,分离菌株使用微量肉汤稀释法进行药敏试验. 结果 991份样品共检出食源性致病菌92株,检出率为9.28％,其中检出金黄色葡萄球菌68株,检出率为6.86％,检出沙门菌和单增李斯特菌各12株,检出率为1.21％,未检出大肠埃希菌O157.药敏结果显示金黄色葡萄球菌和沙门菌均具有一定的耐药性,其中金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率高达61.76％,而且多重耐药明显. 结论 湖南地区即食食品存在一定的食源性致病菌污染,应加大卫生监督力度,防止食源性疾病的暴发流行;同时应控制动物饲料中抗生素的添加使用,加强抗生素的管理和耐药性监测.