妊娠早期CD56brightCD16- NK细胞CD49d和CD11b的表达分析

目的  探讨早期妊娠和稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞及蜕膜组织子宫自然杀伤(uNK)细胞中整合素α4（CD49d）和αm (CD11b)的表达。方法  采集18例早期妊娠妇女外周血（其中14例另取蜕膜组织）和9例稽留流产妇女外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56brightCD16- NK细胞中CD49d和CD11b表达。结果  CD49d和CD11b在早期妊娠蜕膜CD56brightCD16- NK细胞表达显著低于早期妊娠妇女外周血CD56brightCD16-NK细胞(P＜0.01);稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞的表达较早期妊娠妇女显著降低(P＜0.05)。结论  CD49d和CD11b可能在妊娠早期uNK细胞的募集中起重要作用,同时也可能参与了正常妊娠的维持。     

黄精多糖干预长春新碱诱导的骨髓基质细胞生长抑制及凋亡

目的:探讨黄精多糖(PSP,polygonatum sibiricum polysaccharides)干预长春新碱(VCR)诱导的小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)生长抑制及凋亡的作用。方法:①PSP浓度(500、1000、2000、4000mg/L)及VCR浓度(2.5、5、10、15mg/L)分别与骨髓细胞共同培养14d,应用MTT法测定BMSCs增殖。②PSP(500、1000、2000、4000mg/L)与骨髓细胞预培养2h后再分别加入终浓度为5mg/L的VCR继续培养14d,应用MTT法测定BMSCs增殖。③BMSCs培养14d后再加入VCR(2.5、5、10、15mg/L)继续培养24h,经Annexin V/PI双染流式细胞术(FACS)测定细胞凋亡。④PSP(500、1000、2000、4000mg/L)与BMSCs培养14d后再加入5mg/LVCR继续培养24h,经Hoechst 33342荧光染色及Annexin V/PI双染流式细胞术(FACS)测定细胞凋亡。结果:①PSP(1000、2000、4000mg/L)与骨髓细胞培养14d后OD值(3.80、4.48、4.05)均高于正常对照组(3.70),其中PSP 2000mg/L组OD值差异具有显著性(P<0.05);VCR(5、10、15mg/L)组OD值(2.36、1.83、1.67)均显著低于正常对照组(3.70)。②骨髓细胞与PSP孵育2h后再加入5mg/L VCR继续培养14d,PSP 2000mg/L+VCR 5mg/L组OD值(3.51)与VCR 5mg/L组OD值(2.62)比较差异有显著性。③BMSCs培养14d再加VCR继续培养24h后FACS测定VCR(5mg/L、10mg/L、15mg/L)组凋亡率分别为31.12%、39.37%、64.10%,与正常对照组(7.70%)比较差异有显著性。④PSP与BMSCs培养14d再加入5mg/L VCR继续培养24h后,FACS测定PSP(1000mg/L、2000mg/L和4000mg/L)组凋亡率依次为27.77%、24.33%和25.20%,与凋亡诱导组(35.93%)比较差异均有显著性;Hoechst 33342检测,PSP(2000mg/L、4000mg/L)组凋亡率为29.0%和29.67%,与凋亡诱导组(40.33%)比较差异均有显著性。结论:黄精多糖可促进BMSCs增殖,有效地阻止长春新碱对BMSCs生长的抑制及凋亡作用。     

乏氧通过腺苷A2受体调节人成熟树突状细胞骨桥蛋白的表达

目的 探讨乏氧调节人成熟树突状细胞(mDCs)骨桥蛋白(OPN)表达的机制.方法 免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,分别在常氧和乏氧条件下经GM-CSF及IL-4体外诱导生成mDCs;ELISA检测培养上清中OPN水平,RT-PCR检测OPN基因水平表达;使用腺苷替代物(NECA)、特异性A2R激动剂(CGS21680)和特异性A2R拮抗剂(SCH58261)探讨A2R在调节人mDCs表达OPN中发挥的作用;利用重组人TGF-β1(rhTGF-β1)及抗TGF-β1单克隆抗体(anti-TGF-β1Mcab)检测TGF-β1在这一过程中发挥的作用.结果 乏氧显著增加mDCs对OPN mRNA及OPN蛋白的表达,A2R拮抗剂抑制乏氧对OPN的诱导作用;常氧条件下,腺苷替代物(NECA)和A2R激动剂均能显著上调mDCs对OPN mRNA的表达及OPN蛋白的分泌,A2R拮抗剂可特异性抑制A2R激动剂对OPN的诱导;A2R参与调控免疫调节因子TGF-β1水平,通过rhTGF-β1和阻断抗体证实TGF-β1

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of hypoxia regulate osteopontin (OPN) secreting by mature dendritic cells (mDCs). Methods CD14 + cells were enriched using anti-CD14 immunomagnetic beads, for inducing to mDCs, CD14 + cells were cultured with GM-CSF and IL-4 in hypoxia or normoxiain vitro. Concentration of OPN and TGF-β1 in supernatant were detected by sandwich ELISA, OPN mRNA detected by RT-PCR. Approach regulating function of A2 R in expressing of OPN by mDCs by using NECA (surrogate of adenosine), A2R agonist (CGS21680), A2R antagonist (SCH58261) and investigate role of TGF-β1 in this process by using rhTGF-β1 and anti-TGF-β1 Ab. Results Hypoxia inreased the level of OPN and OPN mRNA in mDCs, and this effect could be reversed by A2 R antagonist. Under normoxia,both NECA and A2R agonist (CGS21680) could upregulate the level of OPN and OPN mRNA in mDCs significantly, but this positive effect could be reversed by A2 R antagonist. A2 R played a role in regulating TGF-β1, and confirmed TGF-β1 involved in regulation of OPN by using rhTGF-β1 and anti-TGF-β1 Ab. Conclusion High adenosine induce the generation of TGF-β1 through the A2R on mDCs, and then TGF-β1 raise the OPN secreting by mDCs.     

质子碳离子治疗复发性颅底及颈椎脊索瘤和软骨肉瘤的初步临床结果

目的 探讨采用质子碳离子笔形束扫描技术治疗复发性颅底及颈椎脊索瘤和软骨肉瘤患者的不良反应和近期疗效。方法 收集2014年6月30日至2018年7月30日收治的45例复发性颅底及颈椎肿瘤患者,其中脊索瘤39例,软骨肉瘤6例,中位肿瘤体积57 cm³（6.6~231.7 cm³）。术后复发患者31例,术后放疗后复发14例。行单纯质子治疗1例,质子加碳离子放疗21例,单纯碳离子治疗23例。结果 所有患者均顺利完成治疗。患者中位随访时间29个月（8~57个月）,2年总生存率、局部控制率及无进展生存率分别为82.7%、85.3%及73.8%。除1例3级急性口腔黏膜炎外,未见其他3~4级急性或晚期不良反应。粒子射线放疗作为再程放疗的患者与第1次放疗的患者,其总生存率分别为50.3%和96.2%（χ²=16.969,P<0.05）。结论 质子重离子治疗复发性颅底及颈椎脊索瘤软骨肉瘤取得了较好的短期疗效,长期疗效及不良反应仍需要进一步随访。     

碳离子治疗IMRT后局部区域复发鼻咽癌初步研究——上海市质子重离子医院临床经验

目的 分析再程调强碳离子放疗(IMCT)对IMRT后局部区域复发鼻咽癌的疗效及不良反应。方法 纳入112例于2015-2018年接受挽救性再程IMCT的局部区域复发鼻咽癌患者,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者分别为10例(9%)、26例(23%)、41例(37%)、35例(31%),中位年龄48岁(17~70岁),中位照射剂量为60GyE(50~69GyE)。结果 中位随访20个月(5~45个月),共20例患者死亡,42例患者局部复发,2年总生存(OS)率与无局部进展生存(LPFS)率分别为85%与52%。单因素与多因素分析中Ⅳ期患者OS均显著差于其他患者,未发现与LPFS显著相关的预后因素。治疗期间未见≥3级急性不良反应。≥3级晚期不良反应包括1例口干、2例听力下降、1例大脑颞叶损伤与19例鼻咽黏膜坏死。结论 再程IMCT治疗局部区域复发鼻咽癌取得了较好疗效且严重不良反应发生率较低,远期疗效及不良反应有待进一步随访。     

碳离子治疗IMRT后局部区域复发鼻咽癌初步研究——上海市质子重离子医院临床经验

目的 分析再程调强碳离子放疗(IMCT)对IMRT后局部区域复发鼻咽癌的疗效及不良反应。方法 纳入112例于2015-2018年接受挽救性再程IMCT的局部区域复发鼻咽癌患者,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者分别为10例(9%)、26例(23%)、41例(37%)、35例(31%),中位年龄48岁(17~70岁),中位照射剂量为60GyE(50~69GyE)。结果 中位随访20个月(5~45个月),共20例患者死亡,42例患者局部复发,2年总生存(OS)率与无局部进展生存(LPFS)率分别为85%与52%。单因素与多因素分析中Ⅳ期患者OS均显著差于其他患者,未发现与LPFS显著相关的预后因素。治疗期间未见≥3级急性不良反应。≥3级晚期不良反应包括1例口干、2例听力下降、1例大脑颞叶损伤与19例鼻咽黏膜坏死。结论 再程IMCT治疗局部区域复发鼻咽癌取得了较好疗效且严重不良反应发生率较低,远期疗效及不良反应有待进一步随访。     

26例脑膜瘤的质子放射治疗初步临床结果

目的 考察质子射线放射治疗世界卫生组织（WHO）Ⅰ/Ⅱ级脑膜瘤的初步疗效及不良反应。方法 回顾性分析2015年5月至2018年10月上海市质子重离子医院治疗脑膜瘤患者26例,其中18例为颅底脑膜瘤。患者的中位年龄为42岁（范围15~79岁）。病理诊断为WHOⅠ级脑膜瘤的患者8例,病理诊断为WHO Ⅱ级的脑膜瘤患者9例,影像学诊断患者9例。7例患者为术后放疗（Simpson Ⅰ~Ⅲ级切除2例,Simpson Ⅳ~Ⅴ级切除5例）,10例患者为术后复发后放疗。结果 中位随访时间为22.2个月,所有患者均完成了既定的质子射线放射治疗,中位等效剂量为54 GyE（范围50.4~60 GyE）, 单次剂量为1.8~2.0 GyE。治疗后70%患者症状部分缓解,2年无进展生存率（PFS）和总生存率（OS）均为100%。治疗期间急性放射反应轻微,仅出现1级脱发（n=22）和黏膜反应（n=2）,无2级及以上急性反应,目前尚未观察到晚期不良反应。结论 质子治疗颅内及颅底脑膜瘤安全有效,长期疗效及不良反应需进一步随访。     

质子碳离子笔形束扫描技术治疗头颈部脊索瘤与软骨肉瘤的初步结果

目的 采用质子碳离子笔形束扫描技术治疗头颈部脊索瘤软骨肉瘤患者的不良反应和近期疗效。方法 2014-2016年共收治61例接受质子重离子治疗作为首程放疗的头颈部脊索瘤及软骨肉瘤患者,其中脊索瘤45例,软骨肉瘤16例;男39例,女22例;中位年龄38岁(14~70岁),中位肿瘤最大直径4.1 cm (0~8.6 cm)。肿瘤原发部位以枕骨斜坡及颈椎为主。结果 单纯质子治疗8例,质子+碳离子治疗21例,单纯碳离子治疗32例,所有患者均顺利完成治疗。患者中位随访时间21个月(7~47个月)。未见3-4级急性不良反应,晚期不良反应仅1例放射性颞叶损伤。2年无进展生存率91%,2年总生存率100%。结论 质子重离子治疗脊索瘤软骨肉瘤取得了较好的短期疗效,长期疗效及不良反应仍需要进一步随访。     

抗TNF-α和IL-1βIgY抗体治疗豚鼠过敏性鼻炎机理研究

目的：探讨抗TNF-α和IL-1βIgY治疗豚鼠过敏性鼻炎的作用及机制。方法：随机分正常对照组（ C组,17只）、模型组（ M组,27只）、0.1％抗TNF-α和IL-1βIgY治疗组（ Z1组,21只）、丙酸氟替卡松治疗组（ Z2组,21只）;应用卵清白蛋白建立豚鼠过敏性鼻炎模型;分别在治疗后2、4、8 h进行鼻灌洗和支气管肺灌洗,收集鼻灌洗液（ NLF）和支气管肺泡灌洗液（BALF）,观察炎症细胞;HE染色观察鼻黏膜和肺组织病理改变;免疫组化分析其炎症因子原位表达情况。结果：M组鼻黏膜可见大量嗜酸性粒细胞浸润和炎症改变,肺间质水肿、肺间隔和支气管平滑肌增厚,嗜酸性粒细胞浸润, Z1组和Z2组炎症病理改变明显减轻。 NLF和BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞在Z1和Z2组显著少于M组（ P＜0.05）。 Z1组鼻黏膜IL-1β和肺组织IL-1β和TNF-α从2 h开始,而IL-5和IL-33从4 h开始表达显著低于M组（ P＜0.05）。结论：抗TNF-α和IL-1βIgY滴鼻治疗显著减轻了豚鼠过敏性鼻炎伴过敏性支气管哮喘的炎症病理反应,抑制了嗜酸性粒细胞浸润及炎症细胞因子表达。     

肝素对人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨肝素对长春新碱诱导的人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响。方法：肝素（5、25、50、100、200U／mL）处理K562细胞1h后，加入长春新碱（0．05μg／mL）24h，应用Trypan blue拒染法和MTT法检测不同浓度肝素对K562细胞增殖的影响，DNA琼脂糖凝胶电泳检测肝素对长春新碱诱导的K562细胞凋亡的影响。结果：肝素各组的细胞数量与对照组之间差异均无统计学意义（P均〉0．05），肝素各组的OD值与对照组之间差异均无统计学意义（P均〉0．05）；肝素在5～200U／mL的浓度时能够抑制长春新碱诱导的K562细胞凋亡及DNA凋亡梯带的形成。结论：不同浓度肝素对K562细胞无毒，无刺激或抑制作用，但可抑制由长春新碱诱导的K562细胞凋亡。