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目的利用Adeasy腺病毒载体系统构建含人DehaNp73α cDNA的重组腺病毒并在293细胞中扩增制备重组病毒。方法从pcDNA3-DeltaNp73α—HA中酶切出DehaNp73α基因,并插入pAdTrack—CMV中构建成腺病毒穿梭质粒;pAdTrack-CMV—DehaNp73α线性化后电穿孔法转化到含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的E.coli.BJ5183菌株内同源重组。筛选正确的重组质粒,PacⅠ线性化后脂质体法转染293T细胞包装成重组病毒颗粒;并在293T细胞中反复扩增;增强离心法转染树突状细胞,Western blot检测目的蛋白的表达。结果经限制性内切酶酶切鉴定、PCR筛选、基因测序和GFP表达证实成功构建了携带DehaNp73α cDNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度的重组病毒;Western blot检测出预期相对分子质量为67×10^3的特异条带。结论成功构建了携带DehaNp73α cDNA的重组病毒。 相似文献
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目的 利用Adeasy腺病毒载体系统构建含人DeltaNp73α cDNA的重组腺病毒并在293细胞中扩增制备重组病毒.方法 从pcDNA3-DeltaNp73α-HA中酶切出DeltaNp73α基因,并插入pAdTrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒;pAdTrack-CMV-DeltaNp73α线性化后电穿孔法转化到含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的E.coli.BJ5183菌株内同源重组.筛选正确的重组质粒,PacⅠ线性化后脂质体法转染293T细胞包装成重组病毒颗粒;并在293T细胞中反复扩增;增强离心法转染树突状细胞,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 经限制性内切酶酶切鉴定、PCR筛选、基因测序和GFP表达证实成功构建了携带DeltaNp73α cDNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度的重组病毒;Western blot检测出预期相对分子质量为67×103的特异条带.结论 成功构建了携带DeltaNp73α cDNA的重组病毒. 相似文献
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目的总结采用股-股体外循环技术成功救治严重呼吸道梗阻患者的体会。方法回顾性地分析了3例经体外循环辅助下解除呼吸道梗阻手术的临床资料。3例患者均通过右侧股动静脉建立体外循环,其中1例为袖式气管切除,1例为气管内异物取出,另1例为压迫气管肿瘤切除。结果 3例患者呼吸困难症状明显缓解,体外循环时间27~147 min,无围手术期死亡病例。结论通过体外循环解除严重呼吸道梗阻是可行的。围手术期保持呼吸道畅通有利于患者术后恢复。 相似文献
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完善多级联动教学督导系统 提高质量监控与教学成效 总被引:2,自引:1,他引:1
本研究探索如何规范校院系多级联动教学督导系统,建立多层次、系列化的教学评估制度,建立动态的信息采集、反馈和处理系统,统一权威监控与评价结果发布机制,有针时性地抓住了教学质量关键环节,有效地将教学质量与教学管理实践相结合,实现了通过机制和制度建设来保证教学质量的目的。 相似文献
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目的 总结胸腔镜心脏手术体外循环的管理,并对不同的体外循环建立策略进行分析.方法 回顾性分析2010年1月至2015年8月在该院行胸腔镜体外循环心脏手术患者43例(2例中转)围术期资料,包括基本资料、手术相关资料、术后相关资料等.结果 共计实施胸腔镜体外循环心脏手术患者43例,2例中转(均为前外侧切口的病例,1例因升主动脉壁薄,出血难以控制;1例为上腔型房间隔缺损修补后肺出血,重新阻断后加宽上腔静脉),全组患者无死亡病例.颈静脉/股静脉置管组整体手术病例和单纯房间隔缺损病例的主动脉阻断时间明显短于股静脉双极管组(P<0.05),在转流时间、总手术时间等方面差异无统计学意义(P>0.05).结论 建立稳妥、可靠的周围体外循环,强化术中体外循环的管理,对于减少主动脉阻断、体外循环转流和手术时间,降低甚至预防各种相关潜在风险和并发症的发生具有重要的临床意义. 相似文献
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感染性心内膜炎瓣膜置换术的体外循环管理与分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的本文回顾性总结我院自1996年8月至2008年3月间施行的16例感染性心内膜炎(IE)行瓣膜置换术的体外循环(CPB)管理体会。方法采用中度低温(26℃-30℃),中高流量[2.4~3.01/(min·m^2)]灌注。心肌保护采用4℃冷晶体停搏液或7℃~10℃ 4:1稀释血停搏液顺灌或持续逆灌。主动脉瓣膜置换术(AVR)、主动脉瓣和二尖瓣置换术(DVR)均采用冠状静脉窦逆灌。结果本组CPB总时间99~224min,主动脉阻断时间62~141min,16例均顺利脱离CPB。14例痊愈出院,术后早期死亡2例,死亡原因均为颅内出血。结论良好的设备、控制胶/晶比值、积极应用超滤器、加强ACT和凝血功能的监测,以及注重围术期抗生素的应用对患者的治疗和恢复至关重要。 相似文献
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目的分析右侧腋下小切口心脏停跳与不停跳下单纯性房间隔缺损修补术的临床效果。方法2009年9月至2011年8月,第三军医大学大坪医院野战外科研究所施行右侧腋下小切口单纯性房间隔缺损修补术45例。包括心脏不停跳组22例,其中男13例、女9例,年龄(3.2±2.1)岁,体重(13.1±4.0)kg,房间隔缺损中央型20例,下腔型2例,平均房间隔缺损直径(12.2±5.1)mm;心脏停跳组23例,其中男14例、女9例,年龄(3.5±2.5)岁,体重(12.94±3.3)kg,房间隔缺损中央型18例,上腔静脉窦型3例,下腔型2例,平均房间隔缺损直径(11.64±4.7)mm。测定患者术前、停机时、术后6h和术后24h外周静脉血肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量。结果全组无术中死亡病例。术后发生右肺不张1例,右侧气胸1例。心脏不停跳组体外循环时间和手术时间均短于心脏停跳组(P〈0.05),但两组病例在术中输血量、呼吸机辅助通气时间、住ICU时间、术后住院时间、术后24h胸腔引流量以及术后心功能等方面差异无统计学意义(P〉0.05)。两组术前CK、CK-MB、AST和cTnI均在正常范围且差异无统计学意义(P〉0.05),但体外循环术后均不同程度升高,心脏停跳组上升更快(P〈0.05);心脏不停跳组术后CK、CK.MB、AST和cTnI均低于心脏停跳组(P〈0.05)。结论对于单纯性房间隔缺损病例,右侧腋下小切口心脏不停跳房间隔缺损修补术是一种安全可靠、切口美观、手术时间短且心肌损伤程度较轻的手术方式。 相似文献