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目的建立一种简便、高效、特异、灵敏的快速检测军团菌肺炎致病原-嗜肺军团菌的方法。方法本研究分析了NCBI数据库中嗜肺军团菌IVB型分泌系统的序列,经过筛选建立了以dotA基因为靶标的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测法。为了验证该法的特异性,提取了约旦军团菌、马氏军团菌、沙门菌、不同血清型的嗜肺军团菌基因组DNA进行检测;为了验证该法的灵敏度,对梯度浓度的阳性模板进行了检测,并与普通PCR对比;最后还将该法实际应用于环境水样的检测。结果本法可于30 min内完成扩增;扩增产物电泳呈现LAMP特有的梯形条带,酶切产物的片段大小符合理论值;阳性产物中可见白色沉淀,加入溴乙锭后在紫外光下可见明亮的荧光,阴性产物无此现象。结论该dotA-LAMP嗜肺军团菌检测法的特异性好,灵敏度高于普通PCR,可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏、直观地检测出嗜肺军团菌,具备现场检测及基层推广的应用潜力。 相似文献
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目的观察3种消毒方法对空调循环冷却水中嗜肺军团杆菌的消毒效果。方法通过模拟现场消毒试验和现场消毒试验方法,对三种消毒方法杀灭嗜肺军团杆菌的效果进行了观察。结果在模拟现场条件下,用30mg/L的二氧化氯作用45 min,对冷却塔水中嗜肺军团杆菌的杀灭率达99.98%;紫外线/镍网/二氧化钛光催化反应器运行90 min,对该细菌杀灭率达99.99%;0.4 mg/L铜离子与0.04 mg/L银离子以及0.3 mg/L有效氯协同作用45 min,对该细菌杀灭率为99.99%。在现场处理条件下,用上述3种方法分别处理12~48 h,空调冷却水中未检出嗜肺军团杆菌;在间隔2周后,冷却塔水中重新检出嗜肺军团杆菌。结论上述3种消毒方法在模拟现场和现场消毒试验中,均可在不同时间内有效杀灭冷却塔水中嗜肺军团杆菌。 相似文献
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