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目的探讨过表达类泛素修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier, SUMO)特异性蛋白酶2(SUMO-specific protease 2, SENP2)蛋白对雌激素作用下的HeLa细胞增殖、迁移的影响和机制。方法 HeLa细胞采用不同浓度雌二醇(estradiol, E_2)作用24 h,采用Western blot法检测SUMO1、SENP2蛋白相对表达量,并选取SUMO1、SENP2相对表达量最高的E_2浓度用于后续实验。将HeLa细胞分为对照组、E_2组、Myc-SENP2组和Myc-SENP2+E_2组,其中对照组细胞正常培养;E_2组细胞加入E_2,终浓度为10~(-6) mol/L;Myc-SENP2组和Myc-SENP2+E_2组细胞采用Myc-SENP2转染,转染后Myc-SENP2组细胞正常培养,Myc-SENP2+E_2组细胞加入E_2,终浓度为10~(-6) mol/L。4组细胞培养24 h后采用Western blot法检测SUMO1蛋白相对表达量,采用EdU细胞增殖实验检测EdU阳性细胞率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移距离。48只去胸腺小鼠随机分为4组,每组12只,分别接种对照组、E_2组、Myc-SENP2组和Myc-SENP2+E_2组细胞,比较各组小鼠皮下肿瘤体积和肿瘤质量。结果 E_2组细胞SUMO1蛋白相对表达量(0.79±0.10)、EdU阳性细胞率[(62.39±3.03)%]、细胞迁移距离[(83.20±2.94)μm]大于对照组[0.38±0.26、(37.76±3.49)%、(49.07±3.71)μm]、Myc-SENP2组[0.33±0.13、(25.95±2.39)%、(28.36±1.98)μm]和Myc-SENP2+E_2组[0.45±0.07、(32.68±2.43)%、(52.64±2.38)μm](P0.05),对照组和Myc-SENP2+E_2组大于Myc-SENP2组(P0.05),对照组与Myc-SENP2+E_2组比较差异无统计学意义(P0.05);E_2组小鼠肿瘤体积[(105.50±8.70)mm~3]和肿瘤质量[(0.13±0.02)g]大于对照组[(66.72±7.94)mm~3、(0.07±0.01)g]、Myc-SENP2组[(47.85±7.09)mm~3、(0.05±0.01)g]和Myc-SENP2+E_2组[(72.53±8.63)mm~3、(0.07±0.03)g](P0.05),对照组和Myc-SENP2+E_2组大于Myc-SENP2组(P0.05),对照组与Myc-SENP2+E_2组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论过表达SENP2能诱导HeLa细胞的蛋白质去SUMO化,抑制E_2作用下的细胞增殖和迁移。 相似文献
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