205例急性髓系白血病患者IDH1基因突变的检测及其临床意义分析

本研究检测205例急性髓系白血病(AML)患者IDH1基因R132突变并探讨其临床特征。提取205例成人AML患者初发时外周血或骨髓单个核细胞基因组DNA,通过PCR的方法分别扩增IDH1基因的第4号外显子后进行测序比对。结果发现,205例AML患者中9例有IDH1基因R132突变,突变率4.39%,R132H型突变6例,R132L,R132G,R132S突变各1例,其中5例为AML-M2型白血病,与其他类型比较有统计学意义(P=0.002);9例患者血小板中位数45.5×109/L,低于IDH1为野生型患者(P=0.003);IDH1突变患者在性别、年龄、初发白细胞计数、血红蛋白水平及骨髓幼稚细胞比例上与IDH1为野生型的患者相比无明显差异(P>0.05)。9例患者中4例为正常核型,在71例CN-AML中的突变率为5.63%;合并FLT3/ITD突变5例,与IDH1为野生型患者比较有明显差异(P=0.017);合并c-kit突变的1例;合并NPM1突变2例;无合并CEBPA突变者,与野生型比较有明显差异(P=0.031);无合并WT1突变者。结论:IDH1基因R132突变在中国人AML中发生率为4.39%,以R132H突变为主,易在AML-M2型中发生,具有低血小板计数,易合并FLT3/ITD突变,不易合并CEBPA突变等特征。     

多发性骨髓瘤原代细胞异种移植小鼠模型的建立

目的 利用人多发性骨髓瘤(MM)原代细胞在非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠中建立人MM异种移植模型.方法 将2例MM终末期患者骨髓或外周血单个核细胞(MNC)悬液通过尾静脉分别输注给3只NOD/SCID小鼠.每周称量体重,移植2周后以流式细胞术(FCM)检测小鼠外周血中CD45+细胞百分比.当小鼠出现苍白、竖毛、精神萎靡或体重下降20％时,取小鼠脾脏及肝脏行组织病理学检查,FCM检测外周血、骨髓、脾脏和淋巴结细胞悬液中CD45+ CD38+细胞的百分比.结果 来源于病例1和病例2的MNC移植小鼠的平均体重分别自输注MM原代细胞第7周和第5周后开始下降;以对照组小鼠的单个核细胞做阴性设门,分别于移植(26±4)d和(16±4)d后,在病例1细胞来源组和病例2细胞来源组的小鼠外周血中检测到人CD45+ CD38+细胞,且其比例随时间延长而逐渐增高,实验终点时分别达(16.2±3.0)％和(31.3±3.5)％;组织病理大体形态观察发现小鼠脾脏、肝脏及淋巴结均不同程度增大,镜下可见典型的恶性浆细胞浸润;FCM检查骨髓、淋巴结和脾脏细胞表面标志,均发现一群人源CD45+ CD38+细胞.结论 成功建立了人MM原代细胞异种移植的免疫缺陷小鼠模型.     

FICTION技术在检测多发性骨髓瘤遗传学异常中的应用

目的 探讨联合免疫荧光和荧光原位杂交(FISH)的FICTION技术在多发性骨髓瘤(MM)遗传学异常检测中的应用价值.方法 采集18例MM患者和2例浆细胞白血病患者的骨髓标本,分离单个核细胞制作滴片.从细菌人工染色体文库中选取覆盖IgH、MMSET待测基因位点的质粒,用缺口平移法制备带有半抗原检测标签的核酸探针.在经CD138标记和酪胺信号放大的细胞滴片标本上,使用上述自制探针[t(4;14)、t(11;14)和t(14;16)]和商品化直标缺失探针(13q和p53)进行FISH检测.结果 20例患者标本均使用上述5种探针进行检测,其中检出t(4;14)4例,t(11;14)6例,t(14;16)1例,p53缺失3例,13q缺失8例;另有4例未检测出此5种异常.结论 应用FICTION技术原位分析骨髓中特定瘤细胞亚群的特征性遗传学异常,能够提高FISH检测的效率和敏感性,并可作为对MM患者遗传学分层诊断的初筛实验,指导治疗并判断预后.     

人工抗原呈递细胞诱导CML28特异性T淋巴细胞杀伤急性白血病细胞的研究

目的 探讨以人工抗原呈递细胞模拟树突细胞(DC)体外诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖,观察特异性T淋巴细胞杀伤白血病细胞的效应.方法 用慢性粒细胞白血病细胞特异性抗原肽(CML28)作为目标肽,并以磁珠同时负载人工合成的HLA-A2-Ig二聚体-抗原肽(CML28)复合物以及B7-1分子,作为诱导T淋巴细胞的活化、增殖的双信号分子,模拟抗原呈递细胞的生物功能,建立一种人工抗原呈递细胞;从HIA-A2健康骨髓捐献者骨髓或外周血中分离出单个核细胞作为效应细胞,并与人工抗原呈递细胞共孵育,以流式细胞术检测特异性T淋巴细胞活化、增殖程度.以初治急性白血病细胞作为靶细胞,将特异性T淋巴细胞与白血病细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1比例共孵育4 h,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测杀伤急性白血病细胞的效果.结果 以该人工抗原呈递细胞刺激T淋巴细胞后,其CML28特异性T淋巴细胞比例明显增高,实验组中抗原肽ALFCGVACA、FLQGDTSVL、DLMSSTKGL、VLTFALDSV所诱导的特异性T淋巴细胞比例分别为(13.5±1.6)%、(15.2±1.5)%、(14.7±1.8)%、(34.3±3.5)%,与对照组[(2.2±0.4)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).当效应细胞与靶细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1混合后,随着效应细胞的增加,诱导杀伤急性白血病细胞效率也明显增强,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 以磁珠为平台的人工抗原呈递细胞能有效模拟人抗原呈递细胞,诱导T淋巴细胞特异性杀伤白血病细胞,为白血病的免疫治疗提供了一种新的途径.     

人工抗原呈递细胞复合物体外诱导特异性T淋巴细胞活化的研究

本研究旨在以人工抗原呈递细胞（artificial antigen—presenting cells，amPfs）体外模拟树突状细胞生物学功能，探讨诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖的作用。以磁性微珠为载体，选取慢性髓系白血病特异性抗原CML28作为目标抗原肽，通过抗原表位预测软件获取CML28表位序列（Vltfaedsv），并以该抗原表位与MHC分子（HLA—A2-Ig）偶联，作为第一信号分子，B7—1分子作为第二信号分子，将两种信号分子同时负载于磁珠表面，构建人工APC复合体；取HLA—A2^＋的健康骨髓捐赠者骨髓单个核细胞，以磁珠分选出CD8^＋T淋巴细胞并与人工APC复合体系统共培养。培养过程中加入羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（5，6-carboxylfluorescin diacetate succinimidyl ester，CFSE），并以此检测T细胞增殖，用流式细胞仪检测特异性T细胞增殖程度。结果发现：实验组中CML28一特异性T细胞增殖程度明显增高，实验组平均值为（17.34±0．35）％，对照组平均值为（2．25±0．43）％，两者比较差异显著（P〈0．01）。结论：人工APC复合体系统在体外能模拟人体抗原呈递细胞，刺激CD8^＋T特异性淋巴细胞活化、增殖。     

急性白血病患者造血干细胞P-选择素表达的研究

 目的　研究急性白血病（AL）患者骨髓白血病干细胞表面分子P-选择素（CD62P）的表达情况及其临床意义。方法　采用流式细胞术（FCM）检测56例初治AL患者骨髓CD62P的表达情况,以15例健康成年人骨髓标本为对照。结果　38例急性髓系白血病（AML）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD-38）中CD62P平均表达水平为（6.72±7.64）%,12例急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD+19）为（3.46±2.51）%,6例急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD+7）为（6.23±4.95）%,均明显高于健康对照组[（1.04±1.23）%]（t值分别为2.847、3.284、3.091,P＜0.01）。经过正规方案治疗后,完全缓解组患者CD62P表达与健康对照差异无统计学意义（t＝0.397,P＞0.05）。另外CD+62P的AML及T-ALL患者白细胞计数、血红蛋白及血小板计数均明显高于CD-62P 患者（t值分别为4.153、8.095、8.289、7.235、8.692、9.832,P＜0.05）;而CD+62P与CD-62P的B-ALL患者无明显差异（t值分别为0.340、1.142、0.019,P＞0.05）。结论　CD62P是血小板活化的标志物之一,在不同类型的AL中有不同程度的表达。AL骨髓造血干细胞中CD62P可能作为白血病造血干细胞的标志,以及临床疗效观察预后判断的指标之一。     

住院精神分裂症患者的康复护理

精神分裂症是危害人们身心健康的常见病,具有病程迁延、反复发作、预后不良及危害社会的特点.由于病情反复发作,患者会出现生活懒散、行为退缩、意志减退等表现.康复护理就是要使患者受损功能恢复的护理措施,是与临床治疗相互贯通的整体过程.作为医护人员,有责任帮助患者消除自卑、树立信心、保持健康向上的心态;做好家庭、社会人群的工作,消除对患者的歧视,重新接受患者,鼓励患者热爱生活、重返社会,达到战胜疾病、减少社会危害的目的.我院对住院精神分裂症患者实施康复护理,收到较好效果,现总结报告如下：     

异基因造血干细胞移植治疗儿童尼曼匹克病1例报告

尼曼匹克病(Niemann-Pick disease)是一种罕见的常染色体隐性遗传的脂质沉着病,致肝、脾、肺、脑、骨髓及中枢神经鞘磷脂和胆固醇的大量细胞内沉积,典型临床表现为肝脾巨大、身体发育障碍、肌张力减退、进行性神经退行性变、皮肤干燥呈蜡黄色以及半数眼底樱桃红斑。迄今为止,国内外尚无特效疗法。本文报道1例尼曼匹克病患儿经异基因造血干细胞移植治疗,取得了较好的短期效果。     

ɑ1-酸性糖蛋白在生物制剂治疗后类风湿关节炎活动性评估中的意义

目的：本研究拟在接受生物制剂依那西普以及托珠单抗治疗的RA患者中明确ɑ1-酸性糖蛋白(AAG)是否可作为评估疗效的有效检测指标。方法：纳入2015年1月至2017年1月在同济医院风湿免疫科进行过至少24周上述生物制剂治疗的84例RA患者,并根据治疗后24周时临床疾病活动评分(CDAI),将其分为低活动组(CDAI≤10)与中高活动组(CDAI＞10)。分析患者AAG、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)等指标的变化。结果：依那西普组41例,其中低活动组18例,中高活动组23例;托珠单抗组43例,其中低活动组22例,中高活动组21例。治疗后无论是依那西普还是托珠单抗组,低活动组患者AAG、ESR、CRP、CDAI、DAS28-ESR水平均较基线有了明显下降,与中高活动组相比具有显著性差异(P＜0.001)。应用了依那西普的中高活动组上述指标较基线的改变不明显,但应用了托珠单抗的中高活动组尽管CDAI、DAS28-ESR较基线无显著性变化,AAG等炎症指标却有明显下降。 结论： AAG可以作为监测依那西普治疗后疾病活动度的良好指标;但对于托珠单抗治疗后的患者而言,AAG与ESR、CRP一样,并不能准确反映疾病活动情况。