维生素D受体基因多态性与汉族人群慢性牙周炎易感性的关系

目的 探讨维生素D受体(VDR)基因多态性与汉族人群慢性牙周炎(CP)易感性的关系。方法 收集汉族轻、中、重度CP患者共166例及80名无牙周炎对照者的颊黏膜拭子，以Chelex-100法提取DNA，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定VDR BsmI、VDR ApaI和VDR TaqI的基因型，分析组间基因型分布和等位基因频率的差异。结果 轻、中、重度CP患者中VDR ApaI等位基因A携带者明显多于对照组，重度CP与中度CP、重度CP与轻度CP患者间VDR ApaI基因型的分布差异均有统计学意义，中度CP与轻度CP患者间VDR ApaI基因型分布差异无统计学意义，而VDR BsmI、TaqI位点的基因型分布在患者组和对照组间差异无统计学意义。结论 VDR ApaI等位基因A可能与汉族人群CP的易感性有关。     

巢式PCR检测龈下菌斑中HCMV、EBV、HSV-1与慢性牙周炎活动性的关系

目的　建立临床检测龈下菌斑标本中人巨细胞病毒 (HCMV)、Epstein Barr病毒 (EBV)、单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1 )巢式PCR方法 ,研究这 3种病毒与慢性牙周炎活动性的关系。方法　收集6 2例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例、女性 35例 ,平均年龄 5 3岁 )的牙周炎活动部位、牙周炎静止部位的龈下菌斑 ,提取DNA后使用巢式PCR检测HCMV、EBV、HSV 1 ,比较分析其在同一病人不同部位的检出率。结果　牙周炎活动部位的HCMV检出率为 38.7%,EBV的检出率为 5 8%,HSV 1的检出率为30 .6 %,两种以上病毒合并感染的检出率为 4 0 .3%;牙周炎静止部位的HCMV检出率为 1 4 .5 %,EBV为 2 2 .6 %,HSV 1为 1 1 .3%,两种以上病毒合并感染的检出率为 1 1 .3%。这 3种病毒及其合并感染在牙周炎活动部位的检出率均高于牙周炎静止部位 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　提示HC MV、EBV、HSV 1与慢性牙周炎的活动性相关。     

过氧化物酶系统对口腔厌氧菌和兼性厌氧菌存活影响的实验研究

人唾液中存在内源性硫氰酸盐(SCN-)、唾液过氧化物酶(SalivaryPeroxidase,SPO)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO),这些因子组成一个生理条件下的生态体系:过氧化物酶系统。本实验通过模拟口腔环境中过氧化物酶系统的组合,测定乳过氧化酶系统(LactoperoxidaseSystem,LPS)对3株口腔可疑致病菌和1株口腔有益菌存活的影响,研究LPS与口腔致病菌和有益菌的相互关系。本研究所采用的实验菌株为牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)、中间普雷沃菌(P.intermedia)、伴放线放线杆菌(A.actinomycetemcomitans)和血链球菌(S.sanguis),均为模式株。…     

血链球菌丙酮酸氧化酶基因表达克隆的构建与鉴定

目的 构建血链球菌丙酮酸氧化酶基因Sopox的表达质粒,为研究丙酮酸氧化酶基因Sopox表达的调节奠定基础。方法 将从血链球菌ATCC10557克隆的丙酮酸氧化酶基因Soopox重组到pBV220,表达载体,并转化入大肠杆菌E.coliJM105,观察Sopox基因在大肠杆菌中的表达。结果 通过酶切后电泳鉴定,Sopox基因重组入pBV220并转化入E.coliJM105;经42℃yte nf rg ,SDS-PAGE显示pBV220/Sopox/JM105表达分子量约为65kd的蛋白,与根据Sopox基因DNA序列预测的蛋白分子量一致;pBV220/Sopox/JM105的蛋白表达在42℃诱导4小时后达高峰。结论 丙酮酸氧化酶基因Sopox已被成功地克隆到pBV220/Sopox/JM105的蛋白表达在42℃诱导4小时后达高峰。结论 丙酮酸氧化酶基因Sopox已被成功地克隆到pBV220,并在E.coliJM105中表达。     

快速整体内收上颌前牙对犬牙根吸收影响的扫描电镜观察

目的研究牙槽外科辅助快速整体内收上颌前牙对实验犬前牙牙根的影响。方法建立牙槽外科辅助快速整体内收上颌前牙的比格犬动物模型后,连续加力12 d,速度0.5 mm/d,分别于加力停止并固定1 d,14 d,28 d后随机处死3只实验犬,拔出一侧上颌第三切牙,制备标本行扫描电镜观察。结果加力停止1 d及14 d后牙根吸收明显,停止加力28 d后,牙根吸收面积明显减小:牙根颈部28 d与1 d(t=25.075,P=0.014)、28 d与14 d(t=17.444,P=0.056)比较,差异有统计学意义;牙根尖部28 d与1 d(t=26.436,P=0.000)、28 d与14 d(t=18.229,P=0.003)比较,差异有统计学意义。结论牙槽外科辅助快速整体内收上颌前牙会造成一定程度的牙根吸收,随着加力停止后固定时间的延长,牙根吸收可明显修复。     

口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株的构建

目的:利用口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因(sopox) 的克隆序列,重组构建新的不能产生H2O2 的口腔链球菌变异株。方法:口腔链球菌株ATCC10557 经培养后用酚-氯仿法抽提细菌染色体基因组DNA ,经PCR 扩增sopox 基因,用BamHI 进行限制酶切;参照Chris 方法进行电转化,挑选阳性菌落测定其上清液中H2O2 的含量;将细菌传3～4 代后再次重复上述检测。结果:转化子经筛选后得到1 株阳性菌落,测定上清液中H2O2 含量,第1 次检测表明变异株产生H2O2 的量仅有所下降(介于阳性对照ATCC 10557 和阴性对照大肠杆菌JM109 之间) ,经3～4 次传代后变异株中上清液H2O2 量已经明显低于阴性对照。结论:成功构建了口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株。     

血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养研究──Ⅱ．扫描电镜观察和电子探针应用分析

运用扫描电镜技术分析血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养的形态学变化。结果显示血链球菌能与牙周可疑致病菌中的长杆菌如具核梭杆菌、生痰二氧化碳噬纤维菌相互凝集形成玉米棒状结构，与短杆菌如牙龈紫质单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌相互凝集。运用电子探针技术分析细菌细胞膜的离子变化，显示血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养时，血链球菌细胞在离子无变化，牙周可疑致病菌细胞膜离子发生变化，钙、磷离子浓度降低，提示血链球菌抑制牙周可疑致病菌的机理与细胞的通透性改变有关。     

人釉原蛋白编码区基因原核表达载体的构建

目的：构建人釉原蛋白（amelogenin,AMG）成熟肽编码区基因的原核表达载体。方法：运用TA克隆技术。将AMG基因片断插入质粒pMD18-T,通过BamHⅠ和X幻Ⅰ双酶切后。T4 DNA连接酶连接目的基因AMG与原核表达质粒pGEX-4T—1,最终获得重组原核表达载体pGEX-4T—1/AMG。结果：对重组质粒pMD 18-T／AMG和pGEX-4T-1,AMG进行酶切和测序鉴定,酶切电泳图和测序结果与预期结果一致。结论：成功构建了人釉原蛋白（AMG）成熟肽编码区基因的原核表达载体。     

牙周袋内抛光对牙根表面影响的初步研究

目的 研究新型牙周袋内抛光技术对牙根表面的影响。 方法 选取因重度牙周炎需拔除的患牙10颗,近远中共20个根面随机分为2组,观察组龈下刮治后进行牙周袋内抛光,对照组龈下刮治后喷水处理 。扫描电镜观察处理后的牙根表面情况,光学轮廓仪检测表面粗糙度参数Ra值。 结果 牙周袋内抛光后的牙根表面残留菌斑、牙石及玷污层较少,Ra值两组差异无显著性 (p>0.05)。 结论 牙周袋内抛光能减少根面残留菌斑和玷污层,且对牙根表面无明显损害。     

环氧化酶2启动子区基因多态性与慢性牙周炎的关系

目的：研究环氧化酶2启动子区-765位点、-1195位点单核苷酸多态性与慢性牙周炎遗传易感性的关系．方法：根据慢性牙周炎的诊断及纳入标准收集150例慢性牙周炎患者及143名健康对照者,检查牙周状况并根据牙周附着丧失的程度进行分类,用问卷调查了解受试者的一般情况．取患者的颊黏膜拭子提取其基因组DNA,采用多聚酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性的方法检测环氧化酶2—765位点G〉C及-1195位点G〉A的基因型分布并分析其基因多态性与慢性牙周炎易感性的关系．结果：环氧化酶2—765位点G〉C基因型频率在各组间无显著性差异,但-1195位点G〉A的基因型分布在中、重度牙周炎患者较健康对照者之间有统计学差异（P〈0．05）,携带GA或AA基因型可使牙周病的患病风险增加（OR3．3,95％CI1．6～6．9或01t3．7,95％CI1．5～9．5）,中、重度牙周炎患者AA或GA基因型频率较健康对照者显著增加．结论：环氧化酶2启动子区-1195位点单核苷酸多态性与慢性牙周炎的易感性有关．