SMART POCT与日立7180生化仪检测糖化血红蛋白的一致性分析

目的探讨SMART POCT和日立7180检测糖化血红蛋白(HbA1c)的结果相关性。方法首先分别对SMART POCT和日立7180生化仪检测HbA1c进行精密度评价,再随机选取20份样本在两台仪器上分别进行测定,对测定结果进行相关性分析。结果两台仪器的精密度高,所测结果的相关性好,相关系数(r2)为0.981 1。结论 SMART POCT和日立7180检测HbA1c具有很高的一致性。     

抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒性能分析

目的分析抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒,考察其对试剂盒储存稳定性、抑菌效果的影响,并对试剂性能进行评价。方法通过37℃储存稳定性试验、加菌试验考察检测试剂储存稳定性和抑菌效果,并对检测试剂线性范围、精密度进行统计分析,与对照试剂比较相关性,分析其准确性。结果抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒储存稳定性良好,37℃储存21d,检测质控品偏差小于5%;37℃放置10d,对Escherichia coli、Staphylococcus aureus、Bacillus subtilis表现良好抑菌作用。试剂盒在0～1 800μmol/L具有良好线性,Y=0.992 3 X-2.722 7,R~2=0.999 0,批内精密度和天间精密度CV均小于5%。与对照试剂比较,回归方程为Y=0.988 4 X+0.944 1,R~2=0.998 6,显现良好的相关性,测定结果准确可靠。结论抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂,试剂具有良好的储存稳定性和抑菌作用,且试剂盒主要性能指标良好。     

α-L-岩藻糖苷酶水解XPT-F、PNP-F的酶学性质比较研究

目的比较α-L-岩藻糖苷酶(AFU)水解XPT-F、PNP-F的酶学性质。方法分别以XPT-F、PNP-F作为底物,对AFU催化水解反应的酶学性质(最适pH、最适温度、Km值、离子浓度)进行研究。结果 AFU水解XPT-F、PNP-F的最适pH分别为5.0、4.4;最适温度分别为40、45℃;Km值分别为(0.15±0.012)、(0.29±0.015)mmol/L;离子浓度为100mmol/L时,K~+、Na~+对XPT-F、PNP-F水解均无影响,而Mg~(2+)、Ca~(2+)对XPT-F无影响,对PNP-F有一定促进作用。结论 AFU催化XPT-F水解具有pH适应范围广、催化Km值小、受离子浓度干扰小等特点,XPT-F可作为人血清中该酶测定的底物进一步研究。     

人转铁蛋白纯化制备及其抗原活性验证

目的采用非亲和纯化方法从人血清中制备获得高纯度转铁蛋白(TRF),并用此为免疫抗原免疫新西兰大白兔,验证TRF蛋白的免疫原性。方法首先采用两步硫酸铵沉淀法从血清中粗纯TRF蛋白,再用两步阴离子交换层析柱进行纯化,最终得到TRF。结果 TRF蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)纯度与外购纯品相当,且高效液相色谱(HPLC)纯度达到96.8%,纯化回收率为78.6%。对于同一批TRF样品,TRF检测试剂盒(免疫法)测得的活性浓度与紫外分光光度计法测得的蛋白浓度比值(Rc)约为0.95,说明制备的TRF与免疫检测试剂盒中的TRF抗体具有良好的抗原反应性。最后用纯化样品免疫新西兰大白兔,经过4次免疫后的抗血清效价滴度达到1∶128 000,说明制备的TRF具有良好的免疫原性。结论制备的高纯度TRF具有良好的抗原反应性及免疫原性,可用于动物免疫以制备抗TRF抗体,为配制TRF检测试剂(免疫法)提供良好的原料基础。