结核分支杆菌基因文库的构建

目的建立结核分支杆菌基因文库，为其基因及抗原的鉴定分析进而评估它们在诊断、预防、耐药及致病性等方面的作用提供有效手段。方法结核分支杆菌Ｈ３７Ｒａ染色体ＤＮＡ经脱氧核糖核酸酶Ⅰ（ＤＮａｓｅⅠ）部分消化后从凝胶中回收４～８ｋｂ片段，两端接以ＥｃｏＲⅠ接头，并将其连接在λｇｔ１１臂，用噬菌体包装蛋白“包装”，再进行连续稀释，然后将不同稀释度的噬菌体转染宿主菌Ｙ１０９０。结果基因库效率为８５％，滴度为３×１０５ｐｆｕ／ｍｌ，共含１．３×１０５个重组体，平均插入片段长度为３．５ｋｂ。结论该基因库能提供足够的克隆以覆盖Ｈ３７Ｒａ基因。     

异烟肼耐药与结核分支杆菌katG基因突变的研究

探讨异烟肼耐药结核分支杆菌ｋａｔＧ基因突变的关系。     

穴区带不留针麻醉及椎板穴针麻在胆道手术中的临床应用

我们自一九七六年四月至一九七七年十二月在针麻下行胆道手术146例,现将临床资料小结如下: 一,临床资料: 本组146例胆道针麻手术,男42例,女104例;年龄最大77岁,最小18岁,大多在30-50岁之间。术前病人情况: 1、慢性胆囊炎胆石症69例。     

比例法测定结核分支杆菌药物敏感性

探讨比例法测定结核分支杆菌药物敏感性。方法对５８例结核分支杆菌分别用绝对浓度法和比例法进行药物敏感性测定，对二种方法结果不一致者进行最低抑菌浓度测定。结果与质控标准结果相比，比例法测定ＩＮＨ，ＳＭ，ＥＭＢ，ＲＦＰ的总符合率分别为７９．７％，９２．９％，８６．４％。和９１％，ＩＮＨ和ＲＦＰ测定重复性为９６．７％和１００％，ＳＭ和ＥＭＢ则为８１。７％和８８．４％。     

聚合酶链反应－冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌rpoB基因突变

目的评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应－冷单链构象多态性（ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ）方法对８７株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性为１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，属于分支杆菌特异。所有分离菌的ｒｐｏＢ基因ＰＣＲ扩增均为阳性。采用套式ＰＣＲ可使扩增敏感性提高１００倍。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ对８７株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为８９．６％及１００％。２２份涂阳培阳痰标本中套式ＰＣＲ扩增阳性的６份均为高度利福平耐药，其ＳＳＣＰ结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变快速、简便、易行，适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性，该技术可望用于临床标本直接检测     

聚合酶链式反应检测结核菌的条件选择及污染控制

本文系统观察温度、时间及反应混合物中不同成分的浓度对PCR扩增产量和特异性的影响,并对造成污染的可能途径、方式及控制方法进行分析讨论。结果表明,PCR对反应条件的变化要求非常苛刘,各反应条件之间相互影响。尽管造成PCR污染环节多,但通过合理防污染措施,污染问题是可以解决的。     

循环免疫复合物对肺结核的诊断意义

研究是用聚乙二醇(PEG)沉淀法分离血清免疫复合物(IC);用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)评估检测IC中结核菌抗原5的诊断意义;观察肺结核患者化疗中和化疗后IC水平与临床表现的关系。受试者包括活动性肺结核(PT)组患者50例、麻风组10例、非结核性肺疾病组40例和健康对照组50例。结果 1.用ELISA检测IC中抗原5 15例培养阳性(培阳)PT患者ELISA的吸收率(OD)为0.592±0.11,35例培阴PT患者OD为0.57±0.15;40例非结核性肺疾病组患者OD为0.249±0.13;50例健康