不同浓度乙醇对人精子形态、前向运动力和DNA 碎片指数影响的体外实验研究

目的　探索不同浓度乙醇对体外培养的人精子形态、前向运动力和DNA 碎片指数的影响。方法　采用密度梯 度离心法处理精液后将回收的30 份精子混悬于不同乙醇浓度的精子培养液中,其中对照组0 mg/dl（A 组）,实验组（低 浓度）20 mg/dl（B 组）,C 组（中浓度）80 mg/dl 和D 组（高浓度）160 mg/dl。6h 后检测各组正常形态精子比例、前 向运动精子以及精子DNA 碎片指数。结果　B 组正常形态精子（9.60±2.13）% 与A 组（10.23±2.48）% 相比,差异 无统计学意义（P=0.128）。C 组（8.03±1.96）% 和D 组（5.23±1.23）% 正常形态精子低于A 组,差异有统计学意义 （P=0.011,0.000）。前向运动精子比例依次下降[A 组（73.03±2.83）%,B 组（63.13±4.22）%,C 组（53.03±3.05）%, D组（45.07±2.97）%],差异有统计学意义（F=283.454,P=0.000）。D组精子DFI （20.30±5.06）%,高于A组（12.37±3.68）%、 B组（12.67±3.78）% 和C 组（15.70±4.06）%,差异均有统计学意义（ P=0.000,0.000,0.001）,B 组、C 组精子 DFI 高于A 组,但差异均无统计学意义（P=0.804,0.339）,B 组与C 组精子DFI 比较,差异亦无统计学意义（P=0.478）。     

高纯度人绝经期促性腺激素的应用对IVF/ICSI促排卵中鲜胚移植率的影响

目的探讨高纯度人绝经期促性腺激素(HP-HMG)在IVF/ICSI促排卵中不同的添加时机对鲜胚移植率的影响。方法回顾性分析2016年1月至2017年12月在我生殖中心接受IVF/ICSI助孕的卵巢储备功能正常且首次行促排卵,采用黄体期GnRH-a长方案的424名不孕症患者的资料,根据HP-HMG不同的添加时机分为两组:全程添加HP-HMG为A组(n=141);中卵泡期添加HP-HMG为B组(n=283)。比较两组的Gn时间、Gn量、平均获卵数、正常受精率、优质胚胎率、鲜胚移植率、临床妊娠率、种植率、OHSS发生率等各项指标。结果与B组相比,A组的获卵数[(11.81±3.97)vs.(12.90±6.34)]、HCG日孕酮水平[(1.97±0.44)vs.(3.33±1.46)nmol/L]显著下降(P0.05);A组的鲜胚移植率(70.92%vs.51.24%)显著升高、OHSS发生率显著下降(0vs.3.18%)(P0.05);A组临床妊娠率高于B组(74.00%vs.63.44%),但无统计学差异(P0.05)。结论对于卵巢储备功能正常的不孕症患者,HP-HMG的全程添加能够有效避免因孕酮升高及OHSS风险而导致的鲜胚移植周期取消,并有提高临床妊娠率的趋势。     

卵母细胞分泌因子在卵巢储备功能减退患者中的表达及对胚胎发育的影响

目的 分析卵母细胞分泌因子在卵巢储备功能减退(DOR)患者卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达情况,预测不同的促排卵方案对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响,为DOR不孕女性寻找更有效的促排卵方案。方法 收集接受卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的80例DOR患者,425份CCs为研究对象,其中微刺激方案组30例171份CCs,促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-A)方案组30例165份CCs, PPOS方案组20例89份CCs,单卵丘颗粒细胞群与卵母细胞一一对应。提取卵母细胞周围CCs的mRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组CCs中生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)和转化生长因子-β1(TGF-β1)相对表达量。结果 GnRH-A方案组中采用促性腺激素(Gn)天数及Gn剂量明显多于其余两组(P<0.05)。在3种促排卵方案中,MⅡ期GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于MⅠ和GV期;正常受精组的GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于异常受精组;优质胚胎组的GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于非优质胚胎...     

卵母细胞分泌因子在人卵丘颗粒细胞中的表达及其与卵母细胞发育潜能的关系

目的:探讨单卵母细胞所对应的卵丘颗粒细胞(cumulus cells,CCs)中生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad3的表达与对应单卵母细胞质量及其发育潜能的关系以及在不同促排卵方案中的表达。方法:因男方因素或曾有过体外受精(IVF)不受精史接受卵胞质内单精子显微注射(ICSI)治疗的患者41例,单卵母细胞的CCs 332份(Gn RH-a组21例172份CCs,非垂体降调节组20例160份CCs)。拣卵后机械法剥离单卵子周围的CCs,将卵母细胞与收集的CCs一一对应进行分析。M_Ⅱ卵均采用ICSI授精,并观察其受精、卵裂及囊胚发育情况。采用Real-time PCR方法检测,比较各组CCs中GDF-9、BMP-15、TGFβ1和Smad3的相对含量。结果:1 CCs收集及PCR扩增产物可满足实验要求。2 Gn RH-a组及非垂体降调节组中,上述4种卵母细胞分泌因子,在正常受精组的相对含量均显著高于异常受精组;优质卵裂胚形成组的相对含量均显著高于非优质卵裂胚形成组;优质囊胚形成组中的相对含量显著高于非优质囊胚形成组。3 Gn RH-a组的CCs中BMP-15的表达量相对更高;而GDF-9、TGFβ1和Smad3在非降调节组的CCs中相对表达量较高。结论:1采用单卵母细胞的CCs的RNA进行研究,实际操作是可行的,RNA的质量和数量可达到实验要求。2 GDF-9、BMP-15、TGFβ1、Smad3可作为评价卵母细胞质量、预测卵母细胞发育潜能的客观指标。3降调节与否可能影响CCs中的卵母细胞分泌因子的表达水平,且与M_Ⅱ期卵母细胞发育潜能有关。     

宫腔灌注对胚胎反复种植失败患者在冻融胚胎移植周期中的影响

目的 探讨对于胚胎反复种植失败(RIF)患者,宫腔灌注不同物质对冻融胚胎移植(FET)周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2018年5月至2021年10月于中国人民解放军联勤保障部队第九八○医院生殖中心接受冻融胚胎移植(FET)治疗并行宫腔灌注的120例RIF患者的临床资料。根据宫腔灌注药物不同分为3组：宫腔灌注HCG的HCG组(44例),宫腔灌注粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的G-CSF组(42例),宫腔灌注G-CSF+地塞米松磷酸钠注射液(DexSPI)的G-CSF+DexSPI组(34例);选择同期行激素替代周期准备内膜、仅行FET(未行宫腔灌注)的36例患者为对照组。比较各组患者的一般情况、胚胎移植和内膜情况及妊娠结局。结果 4组患者间平均年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)及基础雌二醇(bE₂)水平比较均无显著性差异(P>0.05)。4组患者间既往移植失败周期数、移植失败周期优胚数、本次移植胚胎数、优胚数、转化日内膜厚度及胚胎移植日内膜厚度比较均无显著性差异(P>0.05)。HCG组、G...     

单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的表达水平与胚胎发育潜能的研究

目的评估单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15的m RNA表达水平对卵母细胞发育潜能的影响。方法采用长方案治疗25例ICSI助孕的女性,取卵当天收集180份单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞,随后提取卵丘颗粒细胞的m RNA,进行实时荧光定量分析,对GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平采用独立样本t检验分析。结果常规长方案CCs 180份,因卵子与收集的卵丘颗粒细胞是一一对应的,根据卵子受精情况将CCs分为正常受精组CCs 129份,异常受精组CCs 51份;正常受精组根据第3日胚胎卵裂情况分为优质卵裂胚形成组CCs 58份,非优质卵裂胚形成组CCs71份;非优质卵裂胚继续培养,根据第5日形成囊胚情况,分为优质囊胚形成组CCs 25份,非优质囊胚形成组CCs 46份。GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率显著相关。正常受精组GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平显著高于非正常受精组(P0.01),优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P0.01)。结论单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率和优质囊胚形成率呈显著正相关,提示其可以作为预测卵母细胞的发育潜能的指标。     

阿托西班在首次新鲜胚胎移植中的应用临床效果观察

目的观察阿托西班用于首次新鲜胚胎移植的临床效果。方法回顾性分析2014~2016年在本院生殖中心行首次新鲜胚胎移植的585例患者的临床资料,并根据是否使用阿托西班进行分组:移植前半小时静脉滴入37.5mg阿托西班的285例为观察组,移植前不使用阿托西班的300例为对照组。比较两组患者的胚胎种植率、临床妊娠率、多胎妊娠率、流产率及异位妊娠率。结果观察组与对照组的年龄、不育年限、体重指数(BMI)、基础FSH、移植日内膜厚度、移植胚胎数及优质胚胎数等一般资料比较,差异无统计学意义(P0.05)。观察组与对照组的胚胎种植率(46.8%vs.34.7%)、临床妊娠率(64.2%vs.53.0%)及多胎妊娠率(45.9%vs.30.8%)比较,差异有统计学意义(P0.05);两组的异位妊娠率及流产率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论首次新鲜胚胎移植前应用阿托西班可以明显改善临床妊娠结局。