表达肠道病毒71型VP1蛋白的重组乳酸菌构建及免疫效果评价

目的 基于乳酸菌表达系统构建可以表达肠道病毒71型（EV 71）主要抗原蛋白VP1的重组乳酸菌并评价其诱导机体产生黏膜及体液免疫的能力。方法 通过RT-PCR的方法扩增EV 71主要抗原蛋白VP1,并使用pNZ8148乳酸菌表达载体构建pNZ8148-EV 71 VP1重组质粒,通过电转化的方法将重组质粒转化到NZ9000食品级乳酸菌中从而构建NZ9000/pNZ8148-EV 71 VP1重组乳酸菌,并使用Nisin进行诱导表达以及使用Western-blot方法检测EV 71 VP1蛋白的表达情况。通过小鼠口服试验以及ELISA检测方法检测NZ9000/pNZ8148-EV 71 VP1重组乳酸菌诱导机体产生IgA及IgG的抗体水平。结果 成功构建了NZ9000/pNZ8148-EV 71 VP1重组乳酸菌,经过Western-blot结果表明,该重组乳酸菌经10 ng/mL的Nisin诱导表达4 h,可以在破碎菌体后的上清中检测到EV 71 VP1蛋白表达。并且诱导后的重组乳酸菌通过口服后可以刺激机体的黏膜与体液免疫反应。结论 EV 71 VP1蛋白作为主要抗原蛋白,可以通过构建重组乳酸菌的方式诱导机体产生黏膜与体液免疫反应。     

实时荧光PCR技术在手足口病检查中的应用

目的采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)法检测手足口病患儿病原体。方法收集433例疑似手足口病患儿的粪便标本进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型(EV-71)和柯萨奇病毒16型(CA-16)鉴别与分析。结果实时荧光PCR法检测433例患儿肛拭子标本使用通用型试剂盒检出366例阳性,其中66例为EV-71感染,151例为CA-16感染。结论 EV-71和CA-16肠道病毒是手足口病的主要病原体,该地区2011年以CA-16感染为主,实时荧光PCR技术对手足口病的病原诊断具有重要价值。     

东莞地区 G6PD 缺乏症的分子流行病学研究

目的：了解东莞地区人群 G6PD 缺乏的流行特征,为本地区提供 G6PD 缺乏症基因突变、基因型及表型资料,完善本地区基因突变谱,并为制订本地区 G6PD 缺乏症的预防计划提供有价值的参考。方法收集2010年1月至2012年12月在我院进行体检的男性外周血样本,采用 G6PD/6PGD 比值法进行筛查,记录其 G6PD/6PGD 比值法检测结果,G6PD/6PGD＜l．5确诊为 G6PD 缺乏,阳性样本采用 PCR-RDB 进行基因诊断,同时随机抽取50例阴性样本作为对照组进行基因诊断。计算疾病检出率、基因突变、基因型频率和基因构成比。结果3885例样本中共检出302例表型阳性的 G6PD 缺乏症患者,检出10种基因突变和1种多态性位点,鉴定出12种基因型,另有3例样品未发现 PCR-RDB 检测的17种突变类型。50例阴性样本进行基因诊断均为阴性。东莞市男性人群 G6PD 缺乏表型阳性的群体检出率是7．77％,17种常见突变基因携带率是7．70％,各种突变类型的构成比依次为 G1376T（32．8％）、G1388A（34．1％）、A95G（12．4％）、G871A （3．7％）、G392T（3．7％）、C1024T（3．3％）。结论本研究阐述了东莞地区G6PD 缺乏的人群发生率和详细的基因突变谱和突变频率,研究资料为在该地区制订有效可行的 G6PD 缺乏预防计划提供有价值的参考。     

东莞地区469例G6PD缺乏症基因突变类型分析

目的 了解东莞地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的基因突变类型,为G6PD缺乏症的临床诊断及预防提供依据。方法 收集进行G6PD酶活性筛查的患者资料,记录其G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)比值结果,随机抽取469例表型阳性样本,通过反向斑点杂交(RDB)技术检测其基因突变类型。结果 采用G6PD/6PGD比值法共检测16 464例标本,检出阳性标本672例(G6PD/6PGD<1.0),检出率为4.08%。随机抽取样本中,检出基因突变460例,检出率为98.1%,其中G1376T突变173例、G1388A突变141例、A95G突变82例、G871A突变60例、G392T突变23例、C1024T突变14例;还检出中国地区G6PD少见突变基因型C1004T突变6例、T517C突变2例、C1360T突变1例;同时检出C1311T多态性65例和双重杂合突变96例。结论 东莞地区G6PD缺乏症发生率较高,G6PD基因突变类型具有中国人群普遍代表性,又有该地区的异质性。     

东莞地区469例 G6PD 缺乏症基因突变类型分析

目的：了解东莞地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的基因突变类型,为 G6PD 缺乏症的临床诊断及预防提供依据。方法收集进行 G6PD 酶活性筛查的患者资料,记录其 G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGD）比值结果,随机抽取469例表型阳性样本,通过反向斑点杂交（RDB）技术检测其基因突变类型。结果采用 G6PD/6PGD 比值法共检测16464例标本,检出阳性标本672例（G6PD/6PGD＜1．0）,检出率为4．08％。随机抽取样本中,检出基因突变460例,检出率为98．1％,其中G1376T 突变173例、G1388A 突变141例、A95G 突变82例、G871A 突变60例、G392T 突变23例、C1024T 突变14例;还检出中国地区 G6PD 少见突变基因型 C1004T 突变6例、T517C 突变2例、C1360T 突变1例;同时检出 C1311T 多态性65例和双重杂合突变96例。结论东莞地区 G6PD 缺乏症发生率较高,G6PD 基因突变类型具有中国人群普遍代表性,又有该地区的异质性。     

东莞地区儿童哮喘社区干预模式的建立与效果评价

目的建立一套适合东莞地区的儿童哮喘社区干预模式以提高哮喘患儿及家长的认知水平和防治能力,降低社区儿童的哮喘发病率。方法通过建立社区居民动态档案,经调查访问收集68例支气管哮喘患儿,对患儿及父母实施系统化的社区干预,包括建立个人健康档案,监督患儿合理规范用药,建立哮喘患儿日常记录卡,成立社区哮喘防治小组进行健康教育等,定期随访并对干预效果进行评估。结果经过为期一年系统化的社区干预,患儿家长对哮喘知识的认知水平显著提高,规范化治疗率由68．2％升高至86．3％,人均年平均急诊次数由（3．2±0．4）次降至（1．5±0．2）次,人均年平均发病次数由（4．5±0．8）次降至（2．0±0．4）次,人均年住院天数由（8．0±2．8）d降至（5．0±1．6）d,人均住院花费由（2698±20．2）元降至（1554±30．9）元,干预前后,各项指标差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论对哮喘儿童实施社区干预,进行长期的监测、管理和教育工作可有效地控制病情急性发作,提高诊治效率,缓解病情,降低就医成本。     

某院儿童急性呼吸道感染病毒流行特点分析

目的 探究广东医科大学附属东莞市儿童医院儿童急性呼吸道感染病原及各类病毒分布特征,为临床治疗判断及预防工作提供相应依据。方法 收集2017年3月至2021年2月广东医科大学附属东莞市儿童医院急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物标本16 148例,采用直接免疫荧光法对7种呼吸道病毒进行抗原检测,包括腺病毒(ADV)、流感病毒A(Flu A)、流感病毒B(Flu B)、呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒(PIV)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,对相应结果进行统计学分析。结果 在16 148例鼻咽分泌物标本中检出病毒3 997例,病毒检出率为24.75%,其中单一病毒感染3 976例,混合感染21例。检出病毒前4位依次为RSV 1 971例(12.21%)、ADV 569例(3.52%)、PIVⅢ型552例(3.42%)、Flu A 366例(2.27%)。7种呼吸道病毒总检出率在不同年龄段之间差异有统计学意义(P<0.05)。春、夏、秋、冬4季7种呼吸道病毒总检出率依次为18.89%、23.88%、27.58%、27.28%,不同呼吸道病毒的流行特征呈现显著的季节差异(P<0.05)。结论 RSV是广...     

12898例全自动血红蛋白电泳检测结果分析

目的回顾性分析全自动血红蛋白(Hb)电泳检测的结果,并探讨Hb电泳在血红蛋白病筛查中的意义。方法收集2011年1月至2013年12月在该院进行血常规及全自动Hb电泳检测的患者临床资料,记录其平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)及Hb电泳检测结果,对疑似地中海贫血的患者进行地中海贫血基因检测,计算Hb电泳筛查的检出率、基因检测的符合率及各种血红蛋白病的构成比。结果共收集了12 898例患者的临床资料,MCV为(85.32±13.61)fL,MCH为(29.87±6.44)pg,通过全自动Hb电泳仪共检出阳性标本1 315例,其中男568例、女747例,检出率是10.19%,其中疑似α-地中海贫血的患者761例,占5.90%;疑似β-地中海贫血的患者495例,占3.84%;HbJ患者11例,占0.08%;HbK患者15例,占0.12%;HbG患者9例,占0.07%;HbD患者3例,占0.02%;HbE患者21例,占0.16%。α-地中海贫血基因符合率80.55%,β-地中海贫血基因符合率96.77%。结论全自动Hb电泳检测在血红蛋白病的筛查中能发挥重要作用。     

尿HCMV-DNA检测在新生儿疾病中的应用价值

目的通过比较不同疾病中的新生儿尿人巨细胞病毒DNA(HCMV-DNA)与血HCMV-IgM抗体的结果,评估尿HCMV-DNA在新生儿疾病中的应用价值。方法采集2013年1月至2014年12月在该院新生儿科住院的1 520例婴幼儿的尿液进行HCMV-DNA荧光定量PCR检测,同时采集其血液采用化学发光方法检测HCMV-IgM抗体。结果 1 520例婴幼儿中尿HCMV-DNA阳性者有153例,阳性率为10.07%,血液标本中的HCMV-IgM阳性者仅有4例,阳性率为0.27%,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。1 520例婴幼儿的疾病构成中,诊断为肝炎综合征的HCMV-DNA阳性率为82.6%,HCMV-IgM阳性率为3.85%。出现黄疸症状的HCMV-DNA阳性率为8.95%,肺部感染的HCMV-DNA阳性率4.62%。各项疾病或症状的HCMV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论在诊断婴幼儿HCMV的感染时,尿HCMV-DNA检测比HCMV-IgM抗体更为优越,尤其在肝炎综合征、新生儿黄疸、肺部感染中的应用价值更高。