巢式多重聚合酶链反应快速诊断儿童脑膜炎/脑炎

目的 探讨巢式多重聚合酶链反应（PCR）在儿童脑膜炎/脑炎诊断中的价值。方法 采用回顾性病例对照研究。收集2017年5月—2020年5月上海市儿童医院82例确诊或疑似中枢神经系统感染患儿的脑脊液样本。收集患儿临床资料,了解患儿抗菌药物使用情况。采用巢式多重PCR检测病原体,并同步进行细菌培养、脑脊液常规和生化检测。结果 82例脑脊液样本中,有31例检出病原体,其中20例检出病毒、11例检出细菌。细菌组脑脊液样本白细胞计数、蛋白、乳酸脱氢酶和患者抗菌药物使用天数、住院天数均显著高于病毒组（P<0.05）;葡萄糖水平低于病毒组（P<0.05）;阿昔洛韦使用例数少于病毒组（P<0.05）。巢式多重PCR与培养法判断细菌性脑膜炎/脑炎的一致性较好（Kappa=0.659,P<0.001）,与实验室指标判断病毒性脑膜炎/脑炎的一致性亦较好（Kappa=0.737,P<0.001）。结论 巢式多重PCR可以作为辅助诊断中枢神经系统感染患儿脑脊液样本病原体感染的新方法,可提高儿童脑膜炎/脑炎的诊断效率。     

上海地区临床分离念珠菌的耐药性监测

目的了解上海地区临床分离念珠菌的菌株分布以及对常用抗真菌药物的敏感性和耐药性。方法对上海地区27所医院临床分离念珠菌采用微量液基稀释法按统一方案进行抗真菌药物敏感性试验。按CLSI M60(2017年)判断结果。结果收集2017年8月1日-2018年4月30日上述医院临床分离念珠菌共354株,其中白念珠菌占41.81%(148/354),近平滑念珠菌占23.73%(84/354),热带念珠菌占15.54%(55/354),光滑念珠菌占9.32%(33/354),其他念珠菌占9.60%(34/354)。白念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌耐药率与以往报道比较偏低或基本持平,无增长趋势,主要是对唑类抗真菌药物具有一定的耐药性。白念珠菌对氟康唑耐药率为1.45%、剂量依赖性敏感(SDD)率为4.35%,对伏立康唑耐药率和中介率均为2.17%;近平滑念珠菌对氟康唑呈现1.20%的SDD率,对伏立康唑呈现1.20%的中介率;光滑念珠菌对氟康唑表现出6.06%的耐药率和93.94%的SDD率;热带念珠菌耐药率呈增长趋势,对氟康唑表现出41.82%的耐药率和12.73%的SDD率,对伏立康唑表现出40.00%的耐药率和12.73%的中介率。白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌对棘白菌素类药物尚未出现耐药菌株,仅1株光滑念珠菌对卡泊芬净耐药。结论上海地区临床念珠菌的分离率及菌株分布与国内外报道基本一致,临床分离菌株对常用抗菌药物的耐药率基本稳定,热带念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药率呈上升趋势,应该引起临床医师重视。同时应进一步加强医院感染防控措施,继续做好真菌耐药性监测工作。     

肺炎链球菌Tn1545及Tn917对大环内酯耐药性研究

目的 探讨儿童临床标本中分离的肺炎链球菌耐药特性及ermB基因与转座子Tn1545和Tn917的相互关系.方法 采用E-test法对临床分离的102株肺炎链球菌进行8种抗菌药物的敏感性试验,用PCR扩增检测肺炎链球菌耐药基因ermB和Tn1545、Tn917基因.结果 102株临床分离的肺炎链球菌对红霉素的耐药率为80.3％,中介率为13.7％; ermB基因总检出率为95.1％,84株ermB基因阳性菌株中Tn1545的检出率为86.9％,Tn917的检出率为16.9％;其中,9.5％的ermB基因型菌株检出于Tn1545和Tn917,77.4％的ermB基因型菌株检出Tn1545,7.1％的ermB基因型菌株检出Tn917.结论 肺炎链球菌主要通过ermB基因介导对大环内酯类抗菌药物的耐药性,而ermB基因则主要通过接合转座子Tn1545携带,因此,Tn1545可能在肺炎链球菌耐药基因的播散中起重要作用.     

金黄色葡萄球菌致儿童皮肤软组织感染90例病原菌耐药性和分子分型

目的 分析金黄色葡萄球菌(金葡菌)所致儿童皮肤软组织感染的临床特征、耐药性、毒力基因及分子分型,以了解上海交通大学附属儿童医院皮肤软组织感染患儿金葡菌的分子流行病学特征。方法 收集2020年全年该院临床皮肤软组织感染患儿90例临床信息以及分离的90株金葡菌,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,应用PCR技术检测金葡菌的杀白细胞毒素pvl等15种毒力基因,并进行多位点序列分型(MLST)、葡萄球菌蛋白A(SPA)分型以及耐甲氧西林金葡菌(MRSA)菌株的葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)分型。结果 90株金葡菌中44株MRSA对青霉素的耐药率为100%;未发现对利福平、利奈唑胺、万古霉素、米诺环素及替加环素耐药菌株。儿童皮肤软组织感染分离金葡菌中肠毒素基因以sei的检出率最高(66.7%),杀白细胞毒素pvl亦有较高检出率(58.9%),黏附毒素基因icaA及clfA基因和溶血素基因hla的检出率均为100%。ST15-t437-SCCmec IV、ST22-t437-SCCmec IV 、ST22-t437-SCCmec V、ST22-t309-SCCmecV 是MRSA分离株最常见的流行...     

2012年上海市儿童医院细菌耐药性监测

目的分析上海市儿童医院2012年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法采用Kirby-Bauer(K-B)法对3 445株临床分离菌进行药敏试验,按CLSI 2012年版标准判读药敏试验结果,采用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 2012年该院共收集临床非重复分离菌3 445株,其中革兰阴性菌1 882株,占54.6%,革兰阳性菌1 563株,占45.4%。细菌排名前6位的分别是:大肠埃希细菌(17.2%)、金黄色葡萄球菌(金葡菌,16.1%)、肺炎链球菌(11.9%)、肺炎克雷伯菌(9.8%)、流感嗜血杆菌(7.9%)、鲍曼不动杆菌(6.7%)。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为29.4%和89.5%。肺炎链球菌青霉素敏感株(PSSP)占59.5%、青霉素中介株(PISP)和青霉素耐药株(PRSP)分别为20.7%和19.8%。粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率分别为26.2%和46.6%。革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的超广谱β内酰胺酶(ESBL)检出率分别为64.0%和73.2%。流感嗜血杆菌β内酰胺酶阳性率为36.6%。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率在25%以上。鲍曼不动杆菌泛耐药株检出率为27.4%。结论多重耐药细菌(MDR)和碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)和泛耐药的鲍曼不动杆菌(PDAB)检出率较高,应引起重视。     

316株儿童分离流感嗜血杆菌的耐药性和β-内酰胺酶基因分型

摘要：目的 探讨儿童分离流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药情况和β-内酰胺酶基因分型。方法 收集2016年上海市儿童医院临床分离的流感嗜血杆菌316株；纸片扩散法检测细菌对抗菌药物的耐药性，头孢硝噻吩纸片检测细菌β-内酰胺酶的表型，PCR方法对细菌β-内酰胺酶基因进行检测分型。结果 316株流感嗜血杆菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药率67.7%，氨苄西林52.2%，阿奇霉素28.5%，头孢呋辛26.9%，氨苄西林/舒巴坦10.8%。对头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸敏感率均>90%。41.1%（130/316）检测到β-内酰胺酶基因，与表型一致，基因分型均为TEM-1型，未检测到ROB-1型。结论 三代头孢和加酶抑制剂抗菌药物（头孢噻肟和氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸）对儿童感染流感嗜血杆菌有较好抗菌活性，可供临床用药参考。流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分型均为TEM-1型。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测

目的 研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系.方法 收集我院2007年1-3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型.结果 我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%.92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶, CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出.结论 我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同.CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

2019—2020年上海市住院儿童病例发热呼吸道症候群病原谱研究

目的了解上海市儿童住院病例中呼吸道症候群的病原谱及临床特征, 为疾病的预防及临床诊断提供参考。方法利用荧光定量PCR结合熔解曲线的判定方法对634份下呼吸道吸取物标本进行22种病原体检测, 采用卡方检验对不同检出率进行统计分析。结果在634份住院病例标本中, 555份病原体核酸检测阳性, 总阳性率为87.54%, 检出的病原体主要为肺炎支原体(mycoplasma pneumonia, MP)、腺病毒(adenovirus, ADV)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)、甲型流感病毒(influenza virus A, FluA)及博卡病毒(bocavirus, BoV);多重感染的比率大于单一感染, 多重感染的病原体类型是ADV、RSV、FluA或者BoV伴MP共感染;在年龄分布中, FluA在"<2岁"和"2～5岁"这两个年龄组检出率较高, RSV在"<2岁"年龄组的检出率明显高于其他两个年龄组, 而冠状病毒在"2～5岁"和">5岁"的检出率要高于"<2岁"年龄组;结合临床症状的分析显示, RSV在非发热患者...     

比较Thermo STP6F药敏测定卡与微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性

目的为临床提供快速、准确、方便的链球菌药敏试验测定方法,比较Thermo STP6F药敏测定卡与金标准微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性。方法按CLSI要求,用Thermo STP6F药敏测定卡检测199株链球菌(肺炎链球菌、化脓链球菌和无乳链球菌),与微量肉汤稀释法结果进行比较。结果两种药敏测试方法涵盖10种抗菌药物对肺炎链球菌的药敏试验结果,分类一致率(CA)为94.6%,基本一致率(EA)为95.5%,重大偏差(VMD)为0.5%,较大偏差(MD)为1.2%,次要偏差(mD)为4.6%;对化脓链球菌两种方法测试结果的CA为99.2%,EA为95.0%,VMD为0.8%,MD为0.8%,mD为0;对无乳链球菌两种方法测试结果的CA为97.8%,EA为93.6%,VMD为1.1%,MD为0.9%,mD为1.2%。Thermo STP6F药敏测定卡所得数值常比标准方法略高。结论 Thermo STP6F药敏测定卡对链球菌的检测结果与微量肉汤稀释法一致性较好,在用于检测肺炎链球菌对美罗培南敏感性时建议结合E试验法复核确认。     

儿童分离流感嗜血杆菌的耐药性及β-内酰胺酶基因分型

目的探讨流感嗜血杆菌在儿童患者中的耐药情况和β-内酰胺酶基因分型。方法收集2016年上海市儿童医院临床分离流感嗜血杆菌316株;纸片扩散法检测细菌对抗菌药物的耐药性,头孢硝噻吩纸片法检测细菌β-内酰胺酶表型,PCR方法对细菌β-内酰胺酶进行基因分型。结果 316株流感嗜血杆菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、氨苄西林、阿奇霉素、头孢呋辛和氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为67.7%、52.2%、28.5%、26.9%和10.8%,对头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸敏感率均 90%。41.1%(130/316)菌株检测到β-内酰胺酶基因,与表型一致,基因分型均为TEM-1型,未检测到ROB-1型。结论三代头孢和加酶抑制剂抗菌药物(头孢噻肟和氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸)对儿童感染流感嗜血杆菌有较好的抗菌活性;流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分型均为TEM-1型。