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目的:构建SREBP-1c过表达HepG2细胞模型并观察其对脂滴含量的影响,为进一步深入研究肝癌脂滴代谢异常机制提供细胞模型。方法:采用DNA重组技术,将SREBP-1c基因克隆至慢病毒表达载体pLenti 6.3/V5中,并用脂质体介导法将慢病毒包装系统和带目的基因的质粒pLenti6.3-SREBP-1c共转染293T细胞,收集上清,感染HepG2细胞。通过Real-time PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。采用免疫荧光检测HepG2细胞中脂滴的数量、大小及细胞内甘油三酯的含量。结果:成功构建了过表达SREBP-1c基因的慢病毒载体pLenti6.3-SREBP-1c,转染后HepG2细胞中可见明显的SREBP-1c蛋白表达。Real-time PCR检测结果显示转染SREBP-1c基因的HepG2细胞中SREBP-1c mRNA水平较对照组升高了约11.4倍。Western blot结果显示SREBP-1c蛋白水平较对照组提高3.2倍。免疫荧光显示过表达SREBP-1c能够明显增加HepG2细胞内脂滴的数量和大小。细胞内甘油三酯定量结果显示甘油三酯含量较对照组明显升高(P < 0.01)。结论:成功构建了SREBP-1c基因过表达的重组慢病毒载体及其稳定转染细胞株。高表达SREBP-1c的HepG2细胞增加了细胞中脂滴的数量、大小和甘油三酯的含量,可用于从脂滴代谢方面对肝癌发病分子机制的研究。 相似文献
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2型糖尿病是一种涉及多个基因的代谢性疾病,其发病率突飞猛进,给家庭及社会造成了巨大的经济压力。目前多项研究表明,2型糖尿病的发生与肠道菌群密切相关。对肠道菌群进行干预可能为2型糖尿病在预防和治疗方面提供新思路、新方法,为2型糖尿病的治疗打开另一扇门。 相似文献
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目的观察黄金胶囊对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝组织eIF2α、GRP78表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射制作T2DM大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组、罗格列酮组和黄金胶囊低、中、高剂量组,另取8只大鼠为正常组。各给药组给予相应药物灌胃,模型组和正常组给予生理盐水灌胃,连续10周。Western blot和RT-PCR分别检测大鼠肝组织eIF2α、GRP78蛋白和mRNA的表达,HE染色观察肝组织病理形态。结果与正常组比较,模型组大鼠eIF2α、GRP78蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠eIF2αmRNA表达明显降低(P<0.05),罗格列酮组较黄金胶囊中、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05),黄金胶囊高剂量组与罗格列酮组作用相当(P>0.05)。HE染色显示黄金胶囊各剂量组大鼠肝脏病理损害减轻,高剂量组减轻最明显。结论黄金胶囊可抑制模型大鼠肝组织eIF2α、GRP78表达的上调,减轻病理损害,从而改善肝组织内质网应激,降低血糖。 相似文献
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尿液常规分析是临床常用的检验项目,作为临床三大常规检测项目之一,尿液分析以其操作简便,实验快捷,取材简单,对临床诊断高帮助性深得临床认可。尿液分析及其形态学可用以临床诊断和鉴别多种疾病(肾脏疾病、泌尿系统感染或结石等),在临床治疗中具有重要的指导意义[1]。随着医学科技和实验技术的发展,尿液干化学分析仪及尿液沉渣分析仪相继出现,更新发展快速,极大提高了尿液分析的准确率,缩短了检测时间,具有快速化和自动化的优势,为临床快速诊断疾病提供了条件。显微镜检法费时费力,被逐渐取代,在一些医院镜检率相当低,甚至无人工镜检意识。本文主要回顾性分析我院524例尿液标本分析,对尿液分析干化学法、尿沉渣分析仪法和人工镜检法3种方法检测结果进行分析,探讨影响干化学法和沉渣分析仪法相关因素,以及传统的人工镜检法在尿液分析中的重要性。 相似文献
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心理护理是现代医学模式的重要组成部分,是维护患者身心健康,使患者取得最佳治疗效果的必要条件。处于危急状态的患者心理十分复杂,患者往往表现为紧张、忧虑、急躁、怀疑、恐惧、消沉、担心等复杂心情,这就要求急诊科的护士更应做好患者的心理护理,提高急诊护理的效果,提高抢救质量。 相似文献
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糖尿病周围神经病变(Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN)是糖尿病的主要并发症之一,它是一种多神经病变,以远端、对称性的肢体感觉异常为主,通常以肢体的麻木、刺痛、烧灼感及感觉减退甚至缺失等为表现,其发病率呈现逐年递增的趋势,严重影响患者的生活质量。气血理论乃中医理论的重要组成之一,气与血是构成人体的两大基本物质,维持人体的生命活动。气血乃人体之精所化,气属阳,血属阴,二者互根互用。文章从气血理论出发,探讨补阳还五汤在治疗DPN中的作用机制。补阳还五汤乃治疗气虚血瘀中风之名方,具有“补气、活血、通络”之功效。中医学认为DPN属于“痹病”“痿病”等的范畴。消渴日久,耗伤气血、损伤阴阳,最终导致气虚而血行不畅,瘀阻而脉络不通,故气虚血瘀乃本病的主要病机。气虚则血行不畅,瘀阻则脉络不通,治疗上以补气为本,活血化瘀为标,标本兼施,使气旺、瘀消、络通,诸症向愈。目前大量的基础实验和临床研究从分子、细胞、器官以及免疫学等多个层面对补阳还五汤加以研究,并取得了一定的成绩,充分肯定了补阳还五汤在临床各科疾病中的治疗作用。课题组在西医治疗的基础上联合补阳还五汤,观察其临床疗... 相似文献
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我室使用的DH 5 0 1钾钠分析仪体积小,操作简便,用血量少且结果重复性较好。但其操作规程要求在正常工作时2 4h开机,缺点是由于连续开机,可使仪器电路发热,缩短仪器使用寿命和浪费试剂;当间隔几天不用时须将管道内液体排空,电极卸下,参比电极和钾电极的内液倒掉,把钠电极浸在装有钠电极再生液的套子中,重新使用时将参比电极和钾电极充液,重新装机。此过程费时费力,每次均需更换参比电极膜,且由于钾电极长时间暴露于空气中,加速钾电极缬氨霉素膜的氧化和老化,缩短使用寿命。在长期的工作实践中,我们对操作方法进行了改进。首先将参比电极和… 相似文献
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