HCV肝炎婴儿血清一氧化氮和免疫球蛋白水平变化的临床意义

目的：探讨HCV肝炎婴儿血清一氧化氮（nitric oxide。NO）和免疫球蛋白（immunoglobulin，垴在肝脏损伤发病过程中的临床意义。方法：IgO、IgA、IgM采用速率散射比浊法，NO采用终点法。结果：与对照组相比，急性期患儿血清中NO水平显著升高，IgG、ISA含量显著降低。恢复期和急性期相比，患儿血清中NO含量有所下降但仍高于对照组，IgG、IgM、IgA均有所升高，但除IgM外均较对照组低。在疾病变化过程中IgG、IgM、IgA的下降与NO的升高成负相关（P〈0．05）.结论：NO与婴儿肝炎综合征的严重程度有关且在一定程度上能调节体液免疫。     

病毒性脑膜炎、脑炎患儿的病原分析及部分生化指标变化的临床意义

目的：探讨病毒性脑膜炎、脑炎的病原及与部分生化指标改变的关系。方法：采用ELISA法进行血清抗体检测，终点法及速率法进行生化分析。结果：病毒性脑膜炎、脑炎患儿的病原分析：Ⅰ型副流感病毒（PIV）占24．5％，腺病毒（ADV）18．0％。柯萨奇B组病毒（CVB）占11．0％，呼吸道合胞病毒（RSV）占11．0％，乙脑病毒占9．0％，甲型流感病毒（IVA）占4．5％。小儿病毒性脑膜炎、脑炎的脑脊液（Cerebrospinal fluid，CSF）中，胆碱酯酶（CHE）的活性、总蛋白与磷（phosphor，P）的含量有显著改变（P＜0．05），且CHE的活性与总蛋白、P的含量有相关性，钙（Ca）及镁（Mg）含量无显著改变（P＞0．05）。结论：（1）在已知的几种致病病毒中，小儿病毒性脑膜炎、脑炎主要由PIV引起，其次是ADV、CVB、RSV。（2）小儿病毒性脑膜炎、脑炎的脑脊液中CHE的活性明显增高，提示小儿病毒性脑膜炎、脑炎将会影响胆碱能神经元的功能。（3）不同病毒对脑脊液CHE的活性影响不同，在已知的几种病毒中CVB对CHE的活性影响最大。     

新型细胞因子IL-24真核表达载体的构建、表达及其对肿瘤的抑制作用

目的：构建IL-24真核表达质粒，并研究其体内外表达对肿瘤细胞的生长抑制作用。方法：采用重组DNA技术构建IL-24真核表达质粒pEGFP-C1-IL-24。用脂质体法将重组质粒及空载体外转染HIC细胞，再经激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察其表达，用MTT法检测HIC细胞的体外增殖能力，用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡。小鼠皮下接种转染IL-24真核表达质粒或空载的B16细胞观察其体内致瘤性的变化。小鼠实体瘤模型研究基因转染对肿瘤的生长抑制作用。结果：pEGF-C1-IL-24转染HIC细胞后，LSCM可观察到其表达。IL-24基因转染的HIC细胞体外增殖能力明显受到抑制．G2-M期细胞比例增高，细胞被阻滞在G2-M期。转染IL-24的B16细胞体外致瘤率降低。与对照组相比．IL-24基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制（P〈0.05）。结论：IL-24基因转染的肿瘤细胞体外生长受抑。瘤内注射pEGFP-C1-IL-24可抑制肿瘤生长，具有明显的抗肿瘤作用。     

谷氨酸转运体GLT-1的TM8区段在底物转运过程中的功能分析

目的:探讨TM8区段在谷氨酸转运体GLT-1转运底物过程中所负功能。方法:将GLT-1的TM8区段的氨基酸残基(Thr460-Val483)分别突变为半胱氨酸,然后应用生物化学的方法检测突变体转运活性,巯基试剂MTSET对突变体转运活性的影响以及底物、抑制剂对MTSET抑制效应的影响。结果:I463C、V467C及A468C对MTSET非常敏感;L465C、L466、V469C及W471C对MTSET敏感性稍弱。底物L-glu及KCl对MTSET作用于V467C、A468C的抑制效应具有保护作用,而抑制剂TBOA则增强了MTSET的抑制效应;L-glu及KCl对MTSET作用于V469C、W471C的抑制效应具有保护作用,但TBOA对MTSET的抑制效应没有影响。结论:在GLT-1转运底物的过程中,TM8参与了底物转运通道的组成,TM8对底物的结合与转运发挥着重要的作用。     

婴儿肝炎综合征血清免疫球蛋白、补体和一氧化氮水平的探讨

目的　测量婴儿肝炎综合征患儿急性期和恢复期血清免疫球蛋白 G(Ig G)、免疫球蛋白 A(Ig A)、免疫球蛋 M(Ig M)、补体 C3、补体 C4和一氧化氮 (NO)水平 ,以了解各因素的变化及其相互关系以及与疾病进展的关系。方法　 Ig G、Ig A、Ig M、C3、C4速率散射比浊法。NO终点法。结果　急性期婴肝患儿血清中 Ig G,Ig A及 C3含量显著降低 ,NO水平显著升高 ;恢复期和急性期相比 ,患儿血清中 Ig G、Ig M、Ig A、C3各指标均有所升高 ,但除 Ig M外各指标均较正常对照低 ;NO有所下降但仍高于正常对照。在疾病变化过程中Ig G、Ig M、Ig A的下降与 NO的升高呈负相关 (P<0 .0 5 )。C4无显著性变化。结论　 NO与婴儿肝炎综合征的严重程度有关且在一定程度上能调节体液免疫     

病毒性脑膜炎、脑炎脑脊液胆碱酯酶活性与血清病毒抗体的关系

目的　探讨病毒性脑膜炎、脑炎患儿脑脊液胆碱酯酶 (CHE)的活性和血清抗体的关系 ,为临床提供诊疗依据。方法　采用终点法及速率法进行生化分析 ,ELISA法进行血清抗体检测。结果　小儿病毒性脑膜炎、脑炎的脑脊液中CHE的活性、蛋白与无机磷的含量有显著改变 (P <0 .0 5 )且CHE的活性与蛋白、无机磷的含量有相关性 ;患儿血清中I型副流感病毒(PIV)阳性率为 2 4 .5 % ,腺病毒 (ADV)为 18.0 % ,再次为柯萨奇病毒、呼吸道合胞病毒、乙脑病毒、甲型流感病毒。结论　①小儿病毒性脑膜炎、脑炎的脑脊液中CHE的活性明显增高 ,提示小儿病毒性脑膜炎、脑炎将会影响胆碱能神经元的功能 ;②血清抗体不同 ,脑脊液CHE的活性升高不同。在所测的几种血清抗体中 ,柯萨奇病毒抗体阳性的患儿其CHE活性升高最多     

新生儿脐炎病原菌分析及临床意义

目的:调查新生儿脐炎病原菌分布及药物敏感状况,以利临床医生合理选用抗生素。方法:将128例新生儿脐炎患儿作脐分泌物及血液病原菌分离以及药敏试验,并对药敏试验结果进行分析。结果:128例中共分离出病原菌120株。新生儿脐炎的病原菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌。革兰阳性球菌对苯唑青霉素、原始霉素、褐霉素、万古霉素等敏感率较高,革兰阴性杆菌对亚胺硫霉素、头孢噻甲羧肟、头孢甲氧噻吩、丁胺卡那霉素等敏感率较高。结论:统计和分析新生儿脐炎的细菌谱及药物敏感状况,可以指导临床医生合理使用抗生素。     

晚期NSCLC患者血清CA125、CEA水平与化疗耐受的关系及意义

目的:糖类抗原125(carbohydrate antigen,CA125)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)是最早被应用于临床的肿瘤标志物。对于肺癌患者,监测它们主要用于早期诊断和疗效评价,且两者联合其他指标具有较高的灵敏度和准确性,但其对疗效的具体影响目前还不清楚。为此我们研究了晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清CA125、CEA水平及其与化疗耐受次数的关系,从化疗耐受的角度初步探讨其对化疗的影响。方法:应用回顾性分析,观察274例晚期NSCLC患者化疗前血清CA125水平、化疗耐受次数和其中110例患者血清CEA水平,计算患者CA125和CEA阳性率,并将化疗耐受次数与化疗前血清CA125、CEA水平用SPAA10.0软件进行统计学处理。结果:部分晚期NSCLC患者CA125、CEA水平升高,且CA125阳性率(62.4%)高于CEA阳性率(40%);化疗前CA125水平对NSCLC化疗的耐受次数有统计学意义(P<0.05),CEA则无统计学意义(P>0.05)。结论:对于晚期NSCLC患者,CA125具有更高的灵敏度,且其化疗前水平在一定程度上可预测患者的化疗耐受,监测CA125比CEA更有利于对患者进行化疗耐受评估,指导临床选择治疗手段。     

IL-24融合蛋白表达载体的构建及其对人小肠癌细胞的生长抑制作用

目的:构建人白细胞介素-24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中表达．研究IL-24融合蛋白对人小肠癌细胞(HIC)的生长抑制作用．方法:用PCR从质粒TRAP-hIL-24中扩增人 IL-24 cDNA片段,并将该片段插入DGEX-KG 原核表达载体中,实现插入基因的融合表达．用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定．提取并纯化IL-24融合蛋白,以不同浓度与 HIC细胞共培养72 h,同时设立相应浓度梯度的GST蛋白组、HIC细胞对照组及空白孔,采用MTT法检测各组人小肠癌细胞的体外增殖结果:酶切结果证实,成功地构建了pGEX- KG-IL-24原核表达载体,并在大肠杆菌中获得稳定的表达,表达产物的相对分子质量(Mr) 同预期值相一致,融合蛋白为Mr53 000,GST 蛋白为Mr29 000．IL-24融合蛋白以浓度依赖性的关系抑制HIC细胞的生长,并且在20和40 mg／L时的抑制率明显高于GST蛋白．结论:成功地构建了重组表达载体pGEX-KG- IL-24,并在E.coli BL21中表达．IL-24融合蛋白对HIC细胞生长有抑制作用．     

pEGFP-IL-24对B16F0细胞抑制效应的实验研究

目的:构建IL-24真核表达质粒,研究其体内外表达对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:用重组DNA技术构建IL-24真核表达质粒pEGFP-IL-24。用脂质体法将重组质粒及空载体体外转染B16F0细胞后,经激光扫描共聚焦显微镜观察其表达,用MTT法检测B16F0细胞的体外增殖能力。用小鼠实体瘤模型研究基因转染对肿瘤生长的抑制。结果:pEGFP-IL-24转染B16F0细胞后,LSM可观察到其表达。IL-24基因转染的B16F0细胞体外增殖能力明显受到抑制。转染IL-24的B16F0细胞体内致瘤率降低。结论:IL-24基因转染的肿瘤细胞体外生长受抑。IL-24基因转染的肿瘤细胞体内生长能力显著降低。