基于HPLC-Q/TOFMS/MS技术的菟丝子醇提物的大鼠体内成分分析

目的对ig给予具有拟雌激素活性的菟丝子醇提物后大鼠的体内化学成分进行定性分析。方法应用HPLC-Q/TOF MS/MS技术,对大鼠尿液中的原型成分及代谢产物进行解析。结果在含药尿液中表征出14个化学成分,鉴定出12个化学成分,其中包括6个原型成分,分别为山柰酚-3-β-D-葡萄糖醛酸苷、6-O-(反式)对香豆酰基-β-D-呋喃果糖-(2→1)-α-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚-7-鼠李糖苷、绿原酸、芹菜素、槲皮苷;6个代谢成分,分别为对羟基桂皮酸、对羟基苯丙酸、异鼠李素、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、乙酰化咖啡酸、槲皮素硫酸酯。结论应用HPLC-Q/TOF MS/MS技术能够简单、快速地分析大鼠ig菟丝子醇提物后尿液中的原型成分及代谢产物,为进一步阐明其药效物质基础提供了依据。     

正常成年人脑血管反应性的功能磁共振研究

目的:评价血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD-fMRI)结合屏气观察正常成人诸感兴趣区血管反应性的可行性,并观察其时间-信号变化情况.方法:选取30名正常志愿者(男女各15名),利用西门子Verio-3.0 T磁共振,采用单次激发GRE-EPI BOLD序列扫描,扫描结果通过工作站及SPM 5进行图像处理与统计分析.观察全脑激活情况及大脑前、中、后动脉相应供血脑区激活情况.结果:屏气激发全脑信号有明显激活改变(P＜0.001),全脑信号变化以灰质为主,诸感兴趣区中,大脑后动脉供血区信号变化程度最大(P＜0.05).结论:BOLD-fMRI作为一种非侵袭性评价脑血流储备的诊断方法,可以很好地评价成年人脑血管反应性.     

NICD表达下调对辐射损伤小鼠成骨细胞系MC3T3-E1增殖和功能基因表达的影响

目的利用RNA干扰抑制小鼠成骨细胞系MC3T3-E1表达Notch信号通路胞内结构域（NICD）,探讨靶向抑制NICD表达对辐射损伤MC3T3-E1细胞的增殖和相关功能基因表达的影响。方法建立抑制NICD表达的MC3T3-E1细胞株,利用实时定量PCR（qRT-PCR）和Western blot法检测其NICD基因的表达。MC3T3-E1细胞和NICD RNA干扰MC3T3-E1细胞经2 Gy γ射线照射后,用BrdU掺入法和qRT-PCR法检测上述细胞的增殖及相关功能基因的表达水平。使用Student-Newman-Keuls进行组间差异分析,两组间比较采用t检验。结果用RNA干扰技术可靶向抑制MC3T3-E1细胞表达NICD。抑制NICD表达可干扰前体成骨细胞和成骨细胞的增殖。2 Gy照射后,前体成骨细胞和成骨细胞以及NICD RNA干扰的成骨细胞的增殖明显下降,各靶细胞的相关功能基因与照射前相比的变化如下:①2 Gy照射后的前体成骨细胞成骨特导性转录因子（Runx2）表达上调,差异有统计学意义（t=2.353,P < 0.05）,NICD RNA干扰的前体成骨细胞Runx2表达下调,差异有统计学意义（t=2.353,P < 0.05）;②2 Gy照射后的前体成骨细胞和成骨细胞以及NICD RNA干扰的前体成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）表达上调,差异有统计学意义（t=3.182、3.345、3.555,均P < 0.05）,NICD RNA干扰的成骨细胞ALP表达下调,差异有统计学意义（t=5.045,P < 0.01）;③2 Gy照射后前体成骨细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）表达下调,差异有统计学意义（t=2.541,P < 0.05）,成骨细胞和NICD干扰的前体成骨细胞RANKL表达上调,差异有统计学意义（t=3.299,P < 0.05;t=10.212,P < 0.01）,而抑制NICD表达则发生相反变化,差异无统计学意义（t=0.765,P>0.05）;④2 Gy照射后的前体成骨细胞和成骨细胞骨保护素（OPG）表达下调,差异有统计学意义（t=2.994、2.782,均P < 0.05）,抑制NICD表达使前体成骨细胞OPG表达上调,差异有统计学意义（t=5.841,P < 0.01）,成骨细胞OPG表达下调,差异有统计学意义（t=2.544,P < 0.05）;⑤2 Gy照射后各靶细胞巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）表达变化趋势与RANKL表达变化情况一致。结论在不同阶段的成骨细胞中抑制NICD表达对辐射损伤表现出的作用是不同的:①可降低前体成骨细胞和成骨细胞的增殖,对辐射损伤后的前体成骨细胞的增殖有保护作用;②可通过调节Runx2从而明显抑制辐照后前体成骨细胞分化,减少骨质丢失;③辐照后各成骨细胞不会通过RANKL/OPG/RANK系统表现出对破骨细胞功能的调节作用;④成骨细胞经过调节M-CSF表现出对破骨细胞的功能抑制作用。     

高催化活性Pt纳米颗粒的生物毒性研究

目的探究一种具有高催化活性的新型金属铂(Pt)纳米颗粒的生物毒性作用。方法选择C57BL/6雄性小鼠(SPF级)52只,鼠龄6~8周,体质量22~24 g。采用"一锅合成法"合成六面体状金属Pt纳米颗粒。将中国仓鼠卵巢(CHO)细胞与质量浓度0、0.4、1.2、3.7、11.0、33.0、100.0、300.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液共培养,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率、细胞毒性、细胞活性氧簇(ROS)变化。将小鼠分3批次(每批次为20、16、16只),按体质量随机分为正常对照组和实验组,测量小鼠30 d体质量变化、骨髓DNA和骨髓有核细胞(BMNC)数量、小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平、Pt元素在小鼠体内的生物分布、血常规和生物化学指标及对主要脏器的病理分析,分析Pt纳米颗粒对小鼠的生物毒性作用。结果 Pt纳米颗粒尺寸为(8.58±1.23) nm,晶格间隙为0.227 nm,呈面心立方晶格。体外研究结果表明,质量浓度300.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液作用24、48 h,CHO细胞存活率85%、90%。质量浓度50.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液可抑制细胞内ROS的产生。动物研究结果表明,质量浓度5 mg/mL Pt纳米颗粒溶液可使正常C57BL/6小鼠出现短暂的体质量下降(给药后15 d左右可恢复正常);作用30 d后,大部分聚集于肝脏及脾脏,与正常小鼠相比,实验小鼠只在肝脏组织中发现轻微炎症。实验小鼠血常规、生物化学指标未发现明显差异性变化;DNA和BMNC数量均出现轻微减少;Pt纳米颗粒溶液体内作用7 d后,肝脏组织的MDA水平出现轻微降低现象,而SOD活性未出现明显改变。结论质量浓度300.0μg/mL以下的Pt纳米颗粒溶液对CHO细胞无明显细胞毒作用,而质量浓度5 mg/mL Pt纳米颗粒溶液对小鼠虽然具有急性氧化应激毒理作用,但其毒理效应可在30 d内由生物体自行调节而恢复。     

老年综合评估护理对老年共病病人自我照顾能力及生活质量的影响

[目的]探讨老年综合评估护理在老年共病病人中的应用效果。[方法]选择2018年3月—2018年9月住院的150例老年共病病人为研究对象,随机分为试验组和对照组,各75例。试验组给予老年综合评估护理,对照组给予常规护理。比较两组病人干预前后日常生活活动(ADL)量表得分和生活质量调查表(SF-36)得分。[结果]试验组老年综合评估发现试验组病人存在一定程度的日常生活功能下降、跌倒风险、认知功能障碍、抑郁焦虑情绪等问题。干预后两组病人ADL得分及SF-36得分均有所提高,且试验组病人明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]老年综合评估能动态地、系统地、全方位地评估老年共病病人躯体功能、精神心理状态及社会功能,并早期识别、发现隐匿性老年问题,及时提供干预措施,提高老年人的生活自理能力和生活质量。     

人RhoA发生了SUMO化修饰

目的探讨人RhoA是否发生SUMO化修饰。方法运用重叠延伸PCR和双酶切连接方法构建pcDNA3-3flag-RhoA真核 表达载体,测序验证。将重组RhoA质粒转染进HEK293T细胞中,免疫印迹检测质粒的表达。将重组RhoA质粒分别和SUMO 各型质粒共转染进HEK293T细胞中,细胞免疫荧光检测RhoA与SUMO之间是否存在共定位。免疫共沉淀方法检测RhoA是 否发生SUMO化修饰。结果成功构建pcDNA3-3flag-RhoA重组质粒,测序结果提示存在一个同义突变,其余完全正确;免疫 印迹检测重组RhoA质粒能高效表达融合蛋白;免疫细胞化学检测到RhoA与SUMO2/3存在共定位,RhoA与SUMO1不存在共 定位;免疫共沉淀检测SUMO2/3对RhoA发生修饰作用,SUMO1对RhoA未发生修饰作用。结论人RhoA发生了SUMO2/3 参与的SUMO化修饰,可能参与神经系统损伤后轴突再生的调控。     

老年痴呆患者主要照顾者感知益处与经验性回避的相关性

目的分析老年痴呆患者主要照顾者感知益处与经验性回避之间的相关性,为其心理护理干预提供依据。方法对老年痴呆患者的主要照顾者142人,采用益处发现评定量表及接纳与行动问卷进行调查。结果老年痴呆患者主要照顾者感知益处总均分为(2.03±0.31)分,经验性回避总均分为(4.98±0.57)分,两者存在负相关(r=-0.702,P0.01)。结论老年痴呆患者主要照顾者感知益处于较低水平,经验性回避处于中等水平。采取措施提升老年痴呆患者主要照顾者感知益处水平,有助于改善经验性回避状况,改善其心理状况。     

CD14和IL-2R基因多态性与脑出血术后颅内感染的关联

目的 探讨脂多糖受体CD14和白细胞介素-2受体(IL-2R)基因多态性与脑出血术后颅内感染的关联。方法 选取2018年3月-2020年12月在河南省人民医院行脑出血手术的患者162例为研究对象，根据患者术后是否发生颅内感染分为感染组28例和未感染组134例，分析感染组病原菌，比较两组临床资料，检测CD14、IL-2R基因多态性。结果 28例感染患者共分离病原菌36株，其中革兰阳性菌21株(58.33%)、革兰阴性菌13株(36.11%)、真菌2株(5.56%);感染组患者CD14 rs2569190位点TT基因、T等位基因频率高于未感染组(P<0.05);感染组患者IL-2R rs743777位点GG基因频率高于未感染组(P<0.05);Logistic回归分析显示，术后再出血、有脑脊液漏、CD14 rs2569190位点TT基因型(P<0.05)均为影响脑出血术后颅内感染的危险因素(P<0.05)。结论 CD14、IL-2R基因多态性与脑出血术后颅内感染相关，术后再出血、有脑脊液漏、CD14 rs2569190位点TT型是脑出血术后颅内感染的危险因素。