糖基化终末产物对牛视网膜毛细血管周细胞增殖及转化生长因子-β表达的影响

目的 研究糖基化终产物（AGEs）对体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞的增殖、细胞周期和转化生长因子β（TGF-β）表达的影响。 方法 分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测周细胞的增殖、流式细胞术分析细胞周期、免疫荧光染色法观察TGF-β蛋白的表达。 结果 AGEs能抑制体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞的增殖；并可使细胞周期阻滞于S期，凋亡细胞数显著增多（P<0.01）；能促进周细胞TGF-β蛋白的表达。 结论 AGEs可通过抑制周细胞增殖，促进周细胞的凋亡而导致周细胞数量的减少；并可能促进周细胞分泌TGF-β而进一步加速糖尿病视网膜病变。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 20-23)     

20(S)-人参皂苷Rg3对前列腺癌PC-3M细胞的诱导凋亡作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人前列腺癌PC-3M细胞诱导凋亡的作用,并探讨其可能机制。方法采用MTT法观察SPG-Rg3对PC-3M细胞生长的抑制作用,计算IC50;用流式细胞术测定PC-3M细胞周期的变化;AO/EB双染观察SPG-Rg3对PC-3M细胞凋亡的形态学变化;利用免疫细胞化学染色和RT-PCR技术探讨SPG-Rg3对PC-3M细胞的诱导凋亡作用及与其相关基因caspase-8的关系。结果SPG-Rg3可明显抑制PC-3M细胞的生长,IC50为(248.5±0.58)mg.L-1;PC-3M细胞的生长周期中S期细胞数增加,G2/M期细胞数则明显减少,且在G1峰前出现明显的凋亡峰;SPG-Rg3作用后PC-3M细胞呈现明显的凋亡改变,且细胞caspase-8mRNA含量增加、表达明显增强。结论SPG-Rg3能诱导前列腺癌PC-3M细胞发生凋亡,其机制可能与其活化caspase-8作用有关。     

高糖对体外培养兔视网膜Müller细胞AQP4表达的影响

目的：观察体外培养兔视网膜Müller细胞在高糖条件下水通道蛋白-4（AQP4）表达的变化。方法：采用体外培养的兔视网膜Müller 细胞,分为正常对照组及高糖组（葡萄糖浓度：30、40和50 mmol•L^-1）,分别培养1、3和5 d;采用免疫细胞化学、流式细胞术及RT-PCR方法对Müller 细胞AQP4的表达情况进行检测。结果：高糖组Müller 细胞AQP4表达的绿色荧光明显弱于正常对照组（P<0.01）;流式细胞仪检测中波峰位置明显提前,AQP4表达强度较对照组明显减弱（P<0.01）,且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4表达强度逐渐减弱;血糖浓度50 mmol•L^-1培养3 d时,RT-PCR半定量分析显示,AQP4 mRNA的表达比对照组明显降低（P<0.01）。结论：高糖能降低视网膜Müller细胞AQP4的表达,且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4的表达强度也逐渐减弱;高糖时AQP4的表达下降可能是机体对糖尿病视网膜病变的一种保护性反应。     

Transwell侵袭小室技术的改良及其在人骨髓间充质干细胞诱导分化中的应用

目的：分离、培养和鉴定人骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs），应用改良的Transwell侵袭小室技术，探讨血管内皮生长因子（VEGF）及内皮细胞条件诱导液对其体外诱导分化中的作用。方法：采用Percoll（1．073g／ml）分离液分离骨髓单个核细胞，体外培养MSCs，流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度，Transwell侵袭小室技术结合LSCM，实时监测MSCs在Matrigel与VEGF／内皮细胞条件诱导液构成的内皮细胞生长微环境中的运动迁移情况。结果：经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs，细胞纯度可达95％左右；VEGF组迁移的深度虽高于对照组（P〈0．05），但迁移至聚碳酸脂膜下的细胞与对照组相比，并无统计学意义（P〉0．05）。内皮细胞条件诱导液促进MSCs的迁移，在Matrigel内迁移的深度及迁移至聚碳酸脂膜下的细胞均明显多于对照组（P〈0．05）。结论：共聚焦激光扫描显微术与Transwell侵袭小室技术的结合，能够从时间和空间上对后者进行观察，使该实验得到改良；利用内皮细胞条件诱导液与Matrigel模拟体外内皮细胞生长的微环境，并从空间上观测了MSCs穿越人工基底膜的情况，为MSCs向内皮细胞体外诱导开辟了新的思路。     

帕罗西汀与安定治疗广泛性焦虑症的对照分析

目的 评价帕罗西汀治疗广泛性焦虑症的临床疗效和副反应。方法 对56例符合中国精神病分类与诊断标准的广泛性焦虑症患者，应用帕罗西汀(28例)、地西泮(28例)进行对照治疗，疗程4周。采用焦虑自评量表(SAS)、Hamilton焦虑量表(HAMA)和副反应量表(TESS)评定疗效和副反应。结果 帕罗西汀与地西泮对广泛性焦虑症的疗效无显著性差异(P&;gt;0．05)。治疗第4周末两组SAS、HAMA以及HAMA因子分的减分比较差异有非常显著性(P&;lt;0．01)。副反应两药相似，帕罗西汀的主要副反应为口干、头痛、头晕和恶心。结论 帕罗西汀治疗广泛性焦虑症有效，副反应轻微。     

人骨髓间充质干细胞分离培养及血管内皮生长因子对其产生的诱导分化作用

目的：目前有关骨髓间充质干细胞向内皮细胞诱导分化的研究较少。本实验分离和培养人骨髓间充质干细胞，用带有VEGF165的质粒转染人骨髓间充质干细胞，探讨血管内皮生长因子对其体外诱导分化的作用。 方法：实验于2005—04／2006—04在吉林大学人兽共患病教育部重点实验室完成。取成人的已排除血液系统肿瘤疾病的新鲜骨髓（自愿提供），采用Percoll梯度分离培养骨髓间充质干细胞，于倒置显微镜下观察细胞形态变化和生长情况。原代细胞培养至增殖接近融合状态时，单克隆培养法分离传代培养，扩增骨髓间充质干细胞。采用流式细胞术检测细胞免疫学表型。在原核细胞大肠杆菌DH5α中复制扩增和提取，纯化、克隆pcDNA3．0-VEGF165质粒。用脂质体转染法转染骨髓间充质干细胞：应用流式细胞术检测诱导后骨髓间充质干细胞免疫学表型变化j并采用免疫荧光染色鉴定转染情况，并设质粒空载和未转染的骨髓间充质干细胞为对照。 结果：人骨髓间充质干细胞原代培养1周后，造血细胞消失，贴壁细胞体积增大，呈现梭形外观，有粗大的细胞突起伸出。2周后细胞融合成单层，梭形突起变长，排列有明显的方向性，细胞排列成旋涡状、网状、辐射状。流式细胞术显示，人骨髓间充质干细胞免疫学表型CD44、CD29阳性，CD34、CD31、CD45阴性。VEGF165诱导骨髓间充质千细胞后CD44表达明显降低，CD31明显升高。免疫荧光染色显示，用FITC标记后的VEGF抗体使细胞显现绿色荧光，用cy3标记的CD31抗体使细胞显现了红色荧光。 结论：转染后的骨髓间充质干细胞细胞表型发生明显转变，CD31表达率明显增高，呈现典型的内皮细胞的表型特征，这说明骨髓间充质干细胞具有向内皮细胞分化的潜能。     

水面舰艇军人心理健康状况的调查分析

目的探讨水面舰艇军人心理健康状况及其与社会支持之间的关系。方法采用症状自评量表（SCL-90）,对海军某水面舰艇部队200名男性士兵长期驻舰航行前后的心理状况进行评估,应用社会支持量表评估其社会支持情况,并与中国正常人常模及男性军人常模分进行比较。结果水面舰艇军人出航前SCL-90中强迫、抑郁和偏执因子分显著高于中国正常人常模（t=2.416-4.800,P〈0.05、0.01）,而人际关系敏感、焦虑、恐惧和精神病性因子分均显著低于中国正常人常模（t=3.676~10.154,P〈0.01）;除了人际关系敏感因子分之外,SCL-90总分及其他各因子分均较男性军人常模分显著降低（t=4.378~8.483,P〈0.01）。返航后水面舰艇军人SCL-90总分、躯体化、焦虑、恐惧和精神病性因子得分均明显高于出航前（t=2.085-3.837,P〈0.05、0.01）。相关分析显示,水面舰艇军人SCL-90总分及各因子分均与社会支持利用度呈负相关（r=-0.432- -0.289,P〈0.05）;除强迫因子分外,SCL-90总分及其他各因子分均与主观支持呈负相关（r=-0.284- -0.172,P〈0.05）,抑郁、恐惧、精神病因子分与客观支持呈负相关（r=-0.200- -0.156,P〈0.05）。结论相对于全国男性军人,被调查水面舰艇军人的心理健康水平好。建立良好的社会支持系统尤其是主观的支持,会使官兵在特殊环境下保持较好的心理健康状态。     

血管生成抑制剂对肿瘤抑制作用的研究

目的:探讨特异性血管抑制剂-TNP470对肿瘤生长抑制作用。方法:利用血管内皮细胞特异性抑制剂-TNP470,抑制鼠S-180移植实体瘤的生长,来探讨TNP470对实验性肿瘤的治疗作用,并利用免疫组织化学的方法研究肿瘤间质血管密度及肿瘤细胞增殖活性。结果:TNP470明显抑制了肿瘤的生长,肿瘤间质血管的密度降低,使肿瘤的细胞增殖活性明显低下。结论:血管抑制剂-TNP470能够较好地抑制肿瘤的生长。     

明胶酶A(MMP-2)蛋白在评估膀胱移行细胞肿瘤进展期的作用

目的　研究明胶酶A(MMP 2 )在不同病理分期、分级的膀胱移行细胞肿瘤 (TCCB)中的表达规律 ,并探讨以MMP 2来判断TCCB进展情况的可能性及方法。方法　通过免疫组织化学和明胶酶谱等方法对 4 7例手术切除的TC CB组织中MMP 2蛋白进行定量检测 ,同时取 5例正常膀胱组织作为对照。对检测结果进行统计学分析。结果　 (1)MMP 2蛋白在TCCB中呈阳性表达 ,在正常膀胱组织中MMP 2不表达或呈微量表达 ;(2 )随着TCCB临床病理分期、分级的升高 ,MMP 2表达量呈现增高趋势 ,有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论　MMP 2蛋白表达与TCCB的恶性发展密切相关。临床上可将MMP 2作为判断TCCB进展情况的标志物。     

从“初病湿热在经,久则瘀热入络”探讨肝纤维化的病因病机

文章从叶天士"其初在气在经,其久"入络入血"以及"初病湿热在经,久则瘀热入络"等观点探讨肝纤维化过程中"湿热"和"瘀热"等因素在各个阶段所发挥的不同作用,对"湿热""湿热化瘀""瘀热入络"等病因病机以及"久病入络"和"肝络"的内涵做相应阐述,探讨其由"气分"到"血分"最终形成"络病"的演变规律。提出肝纤维化的发展中"湿热"为始动因素,久则"化瘀入络"的观点,在肝纤维的防治中应重视"湿热"及"瘀热入络"在发病中的关键作用,及时逆转、阻断或延缓肝纤维化进程。