多药耐药基因在人原发性肝细胞癌中的表达

建立一种敏感性高、特异性强的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，定量检测了３０例原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）患者癌组织周组织中多药耐药基因（ｍｄｒ１）表达水平，其中５例患者术前经肝动脉插管化疗。结果显示：ＰＨＣ癌组织中ｍｄｒ１基因表达较癌周组织高；术前行化疗者癌组织中ｍｄｒ１基因过度表达，同时其癌周组织中ｍｄｒ１的表达较未化疗的癌周组织高。我们认为ｍｄｒ１基因过度表达在ＰＨＣ内在性或获得性药物碱     

两袖套法减体积大鼠肝移植手术技巧

成人间活体供肝肝移植 (ＬｉｖｉｎｇＤｏｒｎｏｒＬｉｖｅｒＴｒａｎｓ ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＬＤＬＴ)是解决供肝来源不足的有效途径 ,长期以来对最小有效供肝量确定仅限于临床推测[1,2 ] ,研究小肝移植物在受体的存活 ,具有重要的意义。大鼠原位肝移植模型是肝移植实验研究的基础 ,建立小肝移植物大鼠原位肝移植模型具有重要意义 ,本文结合所在移植研究中心大鼠肝移植手术经验 ,就建立小肝移植物大鼠原位肝移植模型手术技巧作探讨。1　材料与方法1.1　材　料供体ＳＤ大鼠 6 0只 ,雌性 ,体重 2 5 0～ 2 80ｇ ,术前常规清洁饲养 ,不禁食…     

Wilson''''s病患者亲体部分肝移植和全肝移植术后血清铜蓝蛋白及尿铜水平的变化

目的　总结Wilson’s病患者亲体肝移植和全肝移植术后血清铜蓝蛋白及尿铜水平的恢复情况。方法　自 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 3年 11月我院为 2 6例Wilson’s病患者施行了肝移植术 ,均并发终末期肝硬变 ,其中 3例发生急性肝功能衰竭。术前血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (12 4 .8± 2 2 .8)mg/L和 (15 2 4 .8± 32 8.6 ) μg/ 2 4h ,其中行活体部分肝移植 2 2例 ,全肝移植 4例 ,亲体肝移植供体术前血清铜蓝蛋白水平为 (2 30 .4± 2 9.6 )mg/L ,尿铜水平均 <5 0μg/ 2 4h。结果　所有患者手术顺利 ,全肝移植患者术后 1、3、6及 12个月血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (32 0 .2±36 .8)mg/L、(380 .4± 4 5 .6 )mg/L、(36 0 .5± 37.6 )mg/L、(35 6 .2± 2 7.6 )mg/L和 (2 4 0 .4± 2 2 .8) μg/ 2 4h、(86 .5± 10 .6 ) μg/ 2 4h、(5 4 .2± 6 .8) μg/ 2 4h及 (46 .8± 3.4 ) μg/ 2 4h ;亲体肝移植患者术后 1、3、6及 12个月血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (2 16 .8± 2 0 .4 )mg/L、(2 4 8.5± 32 .6 )mg/L、(2 85 .4± 4 4 .3)mg/L、(2 6 0 .2± 36 .6 )mg/L和(380 .8± 37.6 ) μg/ 2 4h、(15 0 .6± 2 4 .5 ) μg/ 2 4h、(75 .5± 9.6 ) μg/ 2 4h及 (6 0 .3± 5 .8) μg/ 2 4h。结论　全肝移植和亲体肝     

重组肝细胞生长因子促进大鼠移植肝细胞的再生

目的探讨术后应用重组肝细胞生长因子(r HGF)对大鼠移植肝细胞再生的促进作用。方法采用改良“二袖套法”建立SD大鼠原位部分肝移植模型,受鼠分为实验组和对照组,术后经尾静脉分别给予r HGF和相同体积的生理盐水,2次/d。两个组分别在术后第1、2、4、7d时随机挑取5只大鼠处死,称取移植物湿重,采血检测血清丙氨酸转氨酶及白蛋白,流式细胞仪检测移植肝的增殖活性,免疫组织化学法检测移植肝Ki-67的表达情况。结果术后第1、2d,实验组移植物湿重较对照组同时间段明显增加;术后第4、7d,实验组血清丙氨酸转氨酶水平较对照组同时间段明显降低,而白蛋白水平较对照组同时间段明显增高;术后第2、4d,实验组的移植肝增殖指数和Ki-67表达较对照组高(P<0.05)。结论大鼠部分肝移植后使用r HGF能够明显促进移植肝细胞的再生。     

现代肝脏外科手术的若干改进：附肝叶切除术364例报告

本文报道肝脏外科手术的几点重要改进:(1)选用双侧肋缘下屋顶形(rooftop)切口;(2)可调框架式腹腔牵开器的应用;(3)术中油剂肝动脉造影;(4)创用弧形引线针,切肝前先作区域性病肝阻断;(5)术中胆道造影。按新法操作的肝叶切除术,结果表明:术野暴露良好,避免了开胸手术径路,操作简便,缩短了手术时间;新法对术中寻找微小病变,控制出血,预防胆瘘均有重要的价值。     

自发免疫耐受大鼠移植肝内调节性T细胞的生物学特性

目的研究大鼠肝移植后自发免疫耐受的形成与移植肝内CD4~ CD25~ 调节性T细胞(Tr细胞)的关系。方法按供、受者不同将实验分为3组。急性排斥组:DA大鼠为供者,LEW大鼠为受者;自发耐受组:LEW大鼠为供者,DA大鼠为受者;同基因组:供、受者均为DA大鼠。各组均建立大鼠原位肝移植模型。分别在肝移植术后4、7、14、30和90 d时采用密度梯度离心法分离移植肝内淋巴细胞,免疫磁珠分离(MACS)法分选出CD4~ CD25~ Tr细胞;用流式细胞术(FCM)检测细胞纯度,同时分析CD4~ CD25~ Tr细胞比例的变化;体外细胞增殖试验研究CD4~ CD25~ Tr细胞对CD4~ CD25~-T细胞的免疫抑制作用。结果肝移植早期,急性排斥组和自发耐受组移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例均明显增加,其中急性排斥组增加更为明显;移植后4 d左右,两组CD4~ CD25~ Tr细胞比例开始下降,急性排斥组的下降幅度较大;移植后30 d,自发耐受组受者的移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例达到第2次高峰,约在移植后90 d时下降至正常生理水平。移植后7 d左右,急性排斥组受者均因发生排斥反应而死亡,而自发耐受组受者均存活。此外,CD4~ CD25~ Tr细胞能有效抑制CD4~ CD25~-T细胞的增殖。结论CD4~ CD25~ Tr细胞是一种具有特异免疫调节功能的T细胞亚群,其主动的免疫抑制功能可能是诱导大鼠肝移植自发免疫耐受的机制之一。     

大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞的分离培养及其功能分析

目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。     

微波刀在不阻断入肝血流对合并肝硬化的肝癌切除术中的应用价值

目的:探讨微波刀在不阻断入肝血流对合并肝硬化肝癌切除术中的临床应用价值?方法:将2012年2月—2014年2月收治的80例合并肝硬化的肝癌患者分成实验组和对照组?实验组手术方式为微波凝固切肝法,对照组为普通钳夹法?分别观察两组患者围手术期情况和1年随访结果,包括肝切除时间?肝切除面积?肝切除速度?失血量?结扎数量?有无输入红细胞?发生出血需行肝门阻断例数,以及术后3 d和7 d的谷丙转氨酶?总胆红素?血白蛋白?术后并发症?死亡率和术后住院时间?结果:术中微波凝固切肝法组在肝切除失血量及结扎(包括钛夹?缝扎等)数量与传统钳夹组相比差异均有统计学意义(P < 0.05)?微波凝固切肝法组术中发生出血需行肝门阻断的例数与传统钳夹法组相比差异均有统计学意义(P < 0.05)?术后第3天,微波凝固切肝法组患者血清白蛋白水平显著高于钳夹法组,血清丙氨酸氨基转移酶?总胆红素水平明显低于钳夹法组,差异均有统计学意义(P < 0.05)?其余指标差异无统计学意义(P > 0.05)?结论:在合理掌握指征情况下,不阻断入肝血流微波凝固切肝法对肝脏损伤更小,术中出血更少,患者术后恢复更快?     

肝细胞肝癌自发破裂的多模式治疗(附26例报道)

目的 探讨肝细胞肝癌自发破裂多模式治疗的临床价值.方法 回顾性分析2007年6月至2011年1月收治的26例肝癌自发破裂患者资料,根据患者的全身情况、肝硬化程度、肿瘤大小及部位决定接受不同治疗模式,其中急诊肝切除术16例;肝动脉结扎2例;经导管肝动脉化疗栓塞4例;微波消融治疗4例.结果 26例患者经过治疗后均有效止血,症状缓解.1例患者术后8 d 死亡,围手术期病死率为3.8%.其余25例均无重大并发症及死亡.术后中位生存时间16.2个月.1、3、5 年生存率分别为79.2%、45.8%、16.7%.结论 肝癌自发破裂的治疗方案应根据患者的全身情况,肝功能储备情况、肿瘤大小及部位采用个体化治疗模式.     

改良背驮式肝移植的临床应用(附一例报道)

１９９７年６月,我院在动物实验研究的基础上为１例原发性胆汁性肝硬化患者施行了同种异体改良背驮式肝移植术,手术获得成功,现报道如下。临床资料１．受体女性,年龄５１岁,体重４８ｋｇ。因全身瘙痒,皮肤粘膜重度黄染４年入院。经肝活检,诊断为原发性胆汁性肝硬化（Ⅱ～Ⅲ期）。既往有“席一汉氏综合征”病史,曾长期服用激素。于１９９７年６月２０日在全麻下行同种异体原位改良背驮式肝移植术。术中见肝脏呈淤胆样变,黄绿色,表面光滑,边缘圆钝,质地坚硬如石。腹壁静脉曲张,脾脏肿大并有少量腹水。肝动脉无变异,直径０．３ｃ…