实时荧光定量PCR检测沙门菌flor基因和sul2基因方法的建立

目的 建立一种flor基因和sul2基因的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,为检测沙门菌的耐药性以及耐药基因分子流行病学调查奠定基础.方法 以氟苯尼考、复方磺胺甲噁唑抗性的沙门菌菌株为材料,根据GenBank中登陆的沙门菌flor和sul2基因序列,设计并合成引物,建立基于SYBR Green Ⅰ染料技术的Real-Time PCR检测体系,绘制出标准曲线并对其溶解曲线进行分析.结果 以pMD 18-T为载体构建的标准品的Ct值与样品的浓度的对数在一定范围内呈现良好的线性关系,两基因的检测域值较小,flor基因可以检测到102 copies/μL的样品,sul2基因可以检测到103 copies/μL的样品,经耐药性与基因表达量相关分析,耐药性较高的菌株其flor基因、sul2基因表达量也较高.结论 建立的检测沙门菌中flor因和sul2基因的荧光定量PCR方法具有很好的灵敏性、特异性和重复性,可以广泛用于临床中lor和sul2两种基因的检测以及沙门菌耐药分子流行病学的调查.     

中心静脉导管在56例恶性胸腔积液患者持续引流中的护理体会

目的探讨中心静脉导管应用于恶性胸腔积液患者的护理。方法选择56例胸腔积液患者置入中心静脉导管。结果有7例患者置管处疼痛后拔管,其余患者均达到治疗周期,未发生其他置管并发症。结论恶性胸腔积液患者胸腔置入中心静脉导管后,实施有效的护理措施能够保证治疗顺利进行,并减少多次胸腔穿刺的痛苦。