微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究

[目的 ]　建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他呼吸道病毒感染 ,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。　 [方法 ]　采用经MDCK细胞分离培养的甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒毒株病毒液 ,使用 3组特异引物经mRT -PCR扩增核酸 ,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper10 0 0微流芯片分析仪自动化检测和经 2 %琼脂糖凝胶电泳法检测。　[结果 ]　设计三组引物对相应甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒靶基因的mRT -PCR扩增产物片段分别为 43 0bp、2 10bp、3 91bp ,本实验mRT -PCR扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,与Marker比照 ,DNA条带基本在此位点附近 ;产物采用毛细管电泳法经Caliper10 0 0微流芯片分析仪后 ,分别于 413bp、2 0 3bp、3 79bp处出现陡峭的峰 ,如图所示。　[结论 ]　应用微流芯片采用毛细管电泳法可对流感病毒mRT -PCR产物进行定位及相对定量 ,有助于快速诊断流感病毒感染 ,有助于对流感的监测。     

儿童细菌性下呼吸道感染两种采样方法的结果分析

儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infections)是婴幼儿时期的常见病,严重威胁婴幼儿的健康[1].肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是婴幼儿下呼吸道感染的主要条件病原菌[2],同时其也是引起儿童死亡的重要病原菌.     

病原菌明确的细菌性脑膜炎146例临床及病原学分析

目的 分析细菌性脑膜炎患儿临床表现和病原特点,为临床诊治提供帮助。方法 收集复旦大学附属儿科医院2001年1月至2012年12月病原菌诊断明确的细菌性脑膜炎住院患儿,采集临床表现、辅助检查、并发症、病原菌种类和耐药情况等资料,分为0~28 d（新生儿组）,~1岁、~3岁和>3岁组进行描述分析。结果 146例细菌性脑膜炎患儿进入分析,新生儿组58例,~1岁组36例,~3岁组20例,>3岁组32例。①新生儿组发热、呕吐和脑膜刺激征的发生率较低,>3岁组伴有颅面、脊柱解剖畸形50%（16/32）。②革兰阳性菌占54.8%（80株）,以凝固酶阴性葡萄球菌（33株）、肠球菌（19株）和肺炎链球菌（12株）为主;革兰阴性菌占45.2%（66株）,以大肠埃希菌（30株）和鲍氏不动杆菌（10株）为主。③革兰阳性菌对万古霉素和利奈唑胺均敏感,革兰阴性菌除3/10株鲍氏不动杆菌和1/3株铜绿假单胞菌对美罗培南耐药外,余均敏感;大肠埃希菌、克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶阳性率分别达到66.7%、60.0%和100%。④63例（43.2%）出现急性期并发症,以硬膜下积液（26例）、脑积水（20例）和局部神经损害（13例）最常见;出现并发症主要病原菌为大肠埃希菌(15/30)、凝固酶阴性葡萄球菌（14/33）、肺炎链球菌（6/12）和鲍氏不动杆菌(6/10)。⑤出院结局：死亡或放弃治疗31例（21.2%）,其中肺炎链球菌性脑膜炎为5/12例（41.7%）。结论 细菌性脑膜炎新生儿临床表现多不典型,>3岁患儿应关注神经系统相关解剖结构缺陷的可能。可根据病原菌分布特点和药敏结果选用敏感抗生素。肺炎链球菌性脑膜炎患儿预后可能不良。     

上海市闵行区消化道内镜室卫生监督抽检结果分析

<正>医疗内镜是一种介入性精密医疗器械,近年来在各级各类医疗机构中得到了广泛应用。由于其部件精细,结构复杂,因此对清洗消毒质量要求较高,不规范的清洗消毒很容易导致医源性感染。我国卫生部2004年颁布了《内镜清洗消毒技术操作规范(2004年版)》,要求医疗机构认真学习,严格执行,达不到清洗消毒要求的不得开展相关业务。然而据有关文献报道,国内的内镜清洗消毒操作规范率整体水平不高[1-4]。2010—2013年上海市闵行区卫生局卫生监     

血清载脂蛋白E在儿童感染性疾病中的变化

目的 探讨血清载脂蛋白E(ApoE)在儿童感染性疾病中的变化.方法 279例感染性疾病患儿中,脓毒症65例,化脓性脑膜炎47例,细菌性肺炎67例,无菌性脑膜炎47例,支原体肺炎53例.采用透射免疫比浊法(IA)检测感染性疾病患儿的血清ApoE水平.构建B组鼠伤寒沙门菌诱导的脓毒症小鼠模型,采用IA检测小鼠血清ApoE水平,实时荧光定量PCR和Western印迹法检测小鼠肝脏ApoE mRNA和蛋白的表达.两组间均数比较采用独立样本t检验.结果 血清ApoE在细菌性感染性疾病患儿中明显升高,在脓毒症患儿中高达(59.8±23.5) mg/L(t=-5.118,P＜0.01),在无菌性脑膜炎和支原体肺炎患儿中无明显变化.脓毒症小鼠模型血清ApoE水平明显升高,但肝脏ApoE mRNA和蛋白的表达下降,mRNA的相对值在造模后3h下降了71％(t=5.022,P＜0.01),在造模后24 h下降了73％(t=4.181,P＜0.01).结论 血清ApoE水平在细菌性感染性疾病中显著升高,而肝脏中ApoE表达下降,说明ApoE血清升高机制与肝脏表达不相关.     

疫苗引入前苏州地区儿童肺炎链球菌的分子流行病学特征研究

目的 了解苏州地区在7价肺炎链球菌结合疫苗(7 heptavalent pneumococcal conjugate vaccine,PCV7)引入前,不同临床治疗压力下肺炎链球菌分离株的耐药特征、血清分型及国际流行耐药克隆株(pneumococcal molecular epidemiology network,PMEN)的流行情况.方法 收集2006年3月～2007年3月期间苏州大学附属儿童医院住院治疗的呼吸道感染儿童(病例组)和非呼吸道感染儿童(对照组)中分离的肺炎链球菌134株,进行抗生素敏感性分析和血清型分型,并对其中86株大环内酯类药物菌株进行基因分型.结果 病例组抗生素的使用率高于对照组(x2=111.19,P＜0.001).病例组分离的菌株血清型以19F、19A和14为主,对照组菌株常见的血清型为6B、19F和23F,两组PCV7血清型覆盖率分别为58.3％和68.1％.对照组菌株对常用抗生素的敏感性均高于病例组(均有P ＜0.05).菌株基因分型共检测出10种PMEN克隆株,最常见的为Taiwan19F-14克隆株.PMEN克隆株对常用抗菌药物的不敏感率高于非PMEN克隆株.结论 在我国引入PCV7前,在抗生素等治疗压力下,苏州地区肺炎链球菌的耐药情况严重,以Taiwan19F-14克隆株流行为主,多种PMEN克隆株并存.     

腺病毒3型急性呼吸道感染暴发流行的病原学调查

目的以血清学方法证实2004年江苏省苏北地区中小学生腺病毒3型急性呼吸道感染的暴发流行.方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者急性期IgM抗体、恢复期IgG抗体;应用中和试验方法检测患者急性期、恢复期血清和未患病学生对照血清的中和抗体,并应用SPSS11.0软件对试验数据进行统计分析.结果患者急性期IgM抗体阳性率为3.7%,恢复期IgG抗体阳性率为44.4%,恢复期中和抗体阳性率为59.5%;未患病学生分别为0%、8.3%和33.3%,卡方检验P值分别为0.510、0.018、0.226;9例患者配对双份血清中有6例患者恢复期血清中和抗体保护作用均较急性期血清明显增长;ELISA方法检测IgG与中和试验检测中和抗体的一致率为61.4%,Kappa检验P=0.070.结论血清学方法进一步证实苏北地区急性呼吸道感染暴发流行的病原体为腺病毒3型.     

上海市儿童2019新型冠状病毒感染的临床管理

2022年上海市经历了2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)奥密克戎变异株的流行, 出现了4万多例18岁以下儿童病例, 不仅直接影响儿童身心健康, 而且对儿科医疗体系也带来很大影响。全市儿科医疗机构和医务人员积极应对此次疫情, 确保4万多例儿童病例的收治和危重症病例的救治, 把医学人文关爱很好地融入医疗工作中, 同时也保障了儿童基本医疗服务, 积极做好媒体沟通和科普宣传, 指导儿童和青少年掌握防护知识要点, 树立疫苗接种的信心。迄今, 上海收治的境外输入儿童病例和境内2019-nCoV奥密克戎变异株感染的儿童病例数居全国前列。初期的儿童2019-nCoV感染的精简诊治方案和医院防控措施的科学性、规范性和实用性在此次应对奥密克戎变异株流行的医疗工作中再次得到很好的验证和推广。现回顾总结上海儿童2019-nCoV感染的诊断、治疗和危重症救治的临床实践经验。     

单核细胞增生李斯特菌药敏及部分菌株的血清和PFGE分型分析

目的 了解2016年全国10家儿童医院单增李斯特菌感染的临床及其病原学特征.方法 搜集临床病例信息、分析分离菌株病原学特征和药敏结果;对部分菌株采用血清分型,脉冲场凝胶电泳技术和多位点序列分型方法进行分子分型.结果 13株菌株中,5种抗生素药敏试验结果有1株分离株对庆大霉素中介,其他菌株对5种抗生素均敏感.通过临床信息...     

2016至2020年儿童重症监护病房细菌感染及耐药监测的特点和变迁

目的了解复旦大学附属儿科医院儿童重症监护病房(PICU)2016至2020年儿童细菌感染及耐药监测的特点、变迁情况。方法菌株来源于2016年1月1日至2020年12月31日复旦大学附属儿科医院PICU。细菌抗生素敏感性试验按照CHINET统一监测方案进行, 采用自动化仪器法或KB纸片扩散法, 结果判读按照2020年美国临床实验室标准化委员会(CLSI)标准判读。结果 (1)菌株分布:2016至2020年本中心共监测细菌2 551株, 分布前3位均为革兰阴性菌, 其中洋葱霍尔德菌呈现曲折下降趋势(13.45%降至1.18%), 而肺炎克雷伯菌呈现上升趋势(6.05%升至10.61%)。感染部位以呼吸系统最常见, 但分布菌株数量逐年递减, 血液系统分布菌株数量逐年递增。呼吸系统感染以鲍曼不动杆菌;血液系统感染2016及2017年最常见细菌为表皮葡萄球菌, 2018至2020年为木糖氧化无色杆菌最为常见;泌尿系统感染最常见细菌为屎肠球菌。(2)耐药情况:鲍曼不动杆菌对阿米卡星、庆大霉素、头孢吡肟、头孢他啶具有较高耐药率, 历年变化不明显, 对头孢哌酮舒巴坦耐药率逐步降低, 对亚胺培南及美罗培...