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目的:探讨诱导方法对多药耐药细胞系A549/Gem建立的影响.方法:以A549细胞为原代细胞,采用4种方法,建立多药耐药细胞系A549/Gem-1、A549/Gem-2、A549/Gem-3和A549/Gem-4(统称A549/Gem).比较其诱导前后耐药指数和耐药谱、形态学特征、倍增时间、细胞周期分布及TPS、SCC、CEA、CYFRA21-1、ERCC1和RRM1 mRNA表达的变化.结果: 4种细胞对吉西他滨的耐药指数分别为 38.277、12.268、115.297和25.679,均获得多药耐药性,但耐药谱差别较大.其中,A549/Gem-1和A549/Gem-4细胞的G0-G1期细胞比例较A549细胞降低.A549/Gem细胞的倍增时间较A549细胞缩短,形态学变化显著,CEA、TPS、SCC和CYFRA21-1表达变化不大,RRM1和ERCC1 mRNA相对表达量增多.结论:A549/Gem细胞获得多药耐药性,诱导方法对其建立影响较大. 相似文献
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背景和目的多药耐药是导致非小细胞肺癌患者生存期缩短的重要因素。本研究建立了多药耐药细胞株A549/Gem;通过研究其生物学特性,初步从细胞水平分析其获得性耐药的可能机制。方法以人肺腺癌细胞株A549为亲代细胞,采用"临床血浆峰浓度冲击与逐步增加剂量相结合诱导"法,用吉西他滨进行诱导,建立多药耐药细胞株A549/Gem,把诱导过程中的细胞命名为A549/Gem'。分别在诱导前、诱导过程中和诱导成功后的三个不同时间点,应用MTT法检测其耐药指数和对其他化疗药物的敏感性,置于倒置光学显微镜下观察形态学特征,通过绘制生长曲线计算倍增时间,流式细胞术分析细胞周期分布,免疫细胞化学染色检测P53、EGFR、c-erb-B-2、PTEN、PCNA、c-myc、VEGF、MDR-1、Bcl-2、nm23、MMP-9、TIMP-1和CD44v6蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测RRM1 mRNA表达。结果A549/Gem~ 细胞对吉西他滨耐药指数为163.228,对长春瑞宾(耐药指数为5.587±1.210)、多西他赛(耐药指数为102.147±10.259)、氟尿嘧啶(耐药指数为38.694±9.635)、依托泊甙(耐药指数>1000)、顺铂(耐药指数为2.357±11.209)耐药,对紫杉醇(耐药指数为0.264±0.024)、奥沙利铂(耐药指数为0.596±0.128)敏感;倍增时间(146.941h)比A549细胞(186.479h)缩短,G0-G1期细胞(分别为77.07%、71.30%)增多,失去PTEN、PCNA和MDR-1表达,P53、Cerb-B-2和bcl-2表达减弱,出现EGFR( )、c-myc( )表达,nm23表达增强,而MMP-9、VEGF、CD44v6和TIMP-1表达无变化,RRM1 mRNA的相对表达量明显增多。A549/Gem细胞对吉西他滨的耐药指数为129.783,并保持长春瑞宾(耐药指数为4.969±1.203)、多西他赛(耐药指数为58.669±15.206)、依托泊甙(耐药指数>1000)、顺铂(耐药指数为92.594±0.269)耐药性和紫杉醇敏(耐药指数为0.584±0.115)感性,但均较A549/Gem'细胞有所降低,而对奥沙利铂的敏感性(耐药指数为0.259±0.195)和对氟尿嘧啶的耐药性(耐药指数为0.958±0.152)消失,倍增时间(155.749 h)比A549/Gem'细胞稍延长,G0-G1期细胞稍减少,P53、EGFR、PCNA和MDR-1表达与A549/Gem'相同,出现TIMP-1、PTEN表达,Cerb-B-2、MMP-9、c-myc和bcl-2表达增强,nm23表达消失,而VEGF和CD44v6表达始终无变化,RRMl mRNA的相对表达量较A549/Gem'明显减少。与A549细胞相比,A549/Gem细胞逐渐呈现出如下形态学特征:形态不规则、形态各异、大小不一,且透光性减弱。结论A549/Gem细胞的生物学特性较A549细胞发生较大变化,其多药耐药性的发生与多种基因表达有关。 相似文献
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磁共振胰胆管造影是采用重T2加权技术使胆汁和胰液呈明显高信号而周围器官呈低信号而获得的胆胰管图象。具有信号强度高,对比度大,其图象效果接近应用造影剂的X线造影ERCP和PTC,是观察胰胆管解剖形态、诊断疾病都非常好的检查方法。对胰胆管疾病诊断及鉴别诊断也具有重要临床价值。 相似文献
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目的:观察外伤性下泪小管断裂吻合术的临床疗效。方法在眼科手术显微镜下寻找泪小管断端,采用一次性硬膜外麻醉导管为支撑材料,留置泪道,吻合下泪小管,观察临床疗效。结果23例手术患者,治愈15例,占65.2%,好转6例,占26.1%,无效2例,占8.7%,总有效率91.3%。结论利用一次性硬膜外麻醉导管作为支撑材料留置泪道,是下泪小管断裂吻合术的可取方法。 相似文献
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目的探讨剖官产术后再次妊娠阴道分娩的可行性及母婴安全性。方法回顾性分析96例剖宫产术后再次妊娠经阴道试产孕妇的最终分娩方式、分娩结局及母婴并发症等临床资料;并随机抽取同期非瘢痕子宫经阴试产98例孕妇进行对照,统计分析其试产成功率,手术产率及新生儿窒息情况。结果96例剖宫产术后再次妊娠经阴道试产者中,66例试产成功,成功率68.8%,再次剖宫产30例,手术产率31.2%;98例非瘢痕子宫中,阴道分娩77例,分娩成功率为78.6%,剖宫产21例,手术产率21.4%;两组新生儿窒息、产后出血量、先兆子宫破裂发生率等指标比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论剖官产术后再次妊娠并非是剖宫产的绝对指征,只要对该类孕妇进行详细的产前检查,分娩时整个产程密切观察,严格掌握再次剖宫产指征、选择适宜分娩方式,可有效降低剖宫产率,减少对母婴的危害。 相似文献
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羊水过少是产科常见并发症之一,随着围产医学的发展,延期妊娠并发羊水过少对母婴的不良影响日益受到重视,羊水过少容易发生胎儿窘迫与新生儿窒息,增加围生儿病死率。本文对26例延期妊娠并发羊水过少孕妇进行分析,探讨延期妊娠羊水过少正确的处理方法,降低围生儿病死率。现报道如下。 相似文献
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自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉 总被引:2,自引:0,他引:2
王伟霞 《中国煤炭工业医学杂志》2002,5(9):930-930
翼状胬肉 (以下简称胬肉 )是眼科常见的多发病 ,治疗以手术为主 ,但常规手术后复发率高 ,可高达 2 0 %~ 30 % [1] 。随着角膜缘干细胞这一概念的提出 ,为许多胬肉患者指出了新的治疗方向。我院采用自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉 5 6例 ,现报告如下。1 临床资料全部患者均为 1999年 9月— 2 0 0 1年 11月我院住院患者 ,其中男 36例 ,女 2 0例 ,年龄 35~ 6 3岁 ,右眼 2 8例 ,左眼2 4例 ,双眼 4例 ,其中复发 7例。胬肉均发生在鼻侧角膜缘 ,侵入角膜缘内 >2mm。2 治疗与结果2 .1 手术方法 手术全过程在显微镜下完成 ,采用 1%地卡因… 相似文献
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眼睑裂伤在眼科外伤急诊中比较常见,而下睑内侧组织的裂伤常伴有下泪小管的断裂,修复吻合下泪小管,重建泪道,可以使患者避免因泪道不通而造成长期溢泪带来的痛苦和不便。我院2003年1月-2006年12月在手术显微镜下行外伤性下泪小管断裂吻合术治疗23例,效果良好,报告如下。 相似文献
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