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白色念珠菌感染的分子生物学诊断研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
综述了白色念珠菌感染的分子生物学诊断研究进展,包括核型分析,限制性片段长度多态性分析,特异的DNA探针及PCR等方法。 相似文献
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目的建立特异、灵敏的聚合酶链反应(PCR)结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌(HP)的方法。方法用PCR产物直接克隆并测序,以含HPDNA序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养、单纯PCR和PCR结合杂交(PCR-Sb)检测经胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部炎症、十二指肠溃疡的胃活检组织、唾液和粪便标本中的HP。结果检测胃活检标本79份,PCR-Sb阳性率为99%,单纯PCR及细菌培养的阳性率分别为95%和65%,PCR-Sb的灵敏度达到1fg。唾液标本的检测阳性率为35%,粪便标本的检测结果均为阴性。结论测序证实了PCR扩增的正确性。PCR结合长臂光敏生物素探针杂交是特异、灵敏、简便和对人体无害的检测HP的方法。 相似文献
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利用Internet国际计算机网络检索医学和分子生物学数据库陈建魁尹秀云曾艺芝牟兆钦随着医学技术的发展,医学文献增长十分迅速,数量非常庞大,查找所需文献费时费力,计算机联机和联网检索大大改善了数据库文件的利用,促进了资源共享。联机检索具有内容新、范围... 相似文献
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用聚合酶链反应和限制性内切酶技术快速鉴定医学真菌 总被引:8,自引:1,他引:7
介绍了一种基于聚合酶聚链反应(PCR)结合限制性内切酶分析技术区分临床重菌的方法,首先利用9种真菌的通用引物扩增其18SrRNA基因,然后用HaeⅢBglI和NheI三种限制性内切酶将扩增产物消化成不同数量和不同大小的DNA片段,可以对白色念珠菌,新型隐球菌和烟曲霉菌等9种临床上常见的医学真菌作出快速鉴定,该技术具有快速,敏感,不需杂交,可在24h以内完成鉴定等优点,有良好的临床应用前景。 相似文献
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应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定常见医学真菌 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来 ,机会性真菌感染呈不断上升趋势 ,这主要归因于器官移植、骨髓移植的广泛开展 ;艾滋病患者的大量增多及皮质类固醇激素、免疫抑制剂和广谱抗生素的应用等 ;另外不同真菌菌种对抗真菌药物具有不同的天然耐药性 ,这就不仅要求实验室快速检出感染的病原菌 ,而且还应准确鉴定到种 ,才能使临床采取有效措施控制感染。目前 ,真菌的分离培养鉴定仍是主要诊断方法 ,但存在耗时长且不敏感等问题。为建立快速、敏感、特异的检测与鉴定方法 ,我们用真菌通用引物扩增广范围医学真菌的细胞色素P4 5 0羊毛固醇 14α 去甲基化酶 (L1A1)基因的 1… 相似文献
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用PCR法诊断系统性念珠菌病既可以使用血清 ,也可以使用全血 ,但比较这两种类型样本检测的结果还未见正式报道。作者设计了含有 5对特异性内引物的嵌套式PCR方法 ,可以扩增白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、克鲁斯念珠菌和光滑念珠菌的核糖体RNA(rRNA)的特异性靶序列。真菌特异性通用引物为 :ITS1 :TCCGTAGGTGAACCTGCGG ;ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC。白念珠菌的内引物为 :CAL1 :AACTTGCTTTGGCGGTGGGC ;CAL3 :TGGACGTTACCGCCGCA… 相似文献
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FS54是本室构建的宋内氏福氏2a双价志贺氏菌杂交株,具有志贺氏菌的毒力。本研究通过遗传重组,给FS54株引入了aroD基因的转座于Tn10插入失活物(aroD::Tn10),构建了FS54株的芳香族氨基酸营养缺陷型减毒株,并进一步去除了Tn10所携带的四环素抗性和宋内氏1相大质粒(pSS120::Tn5)上所携带的卡那霉素抗性,得到了宋内氏福氏2a双价志贺氏菌芳香族氨基酸营养缺陷型减毒株Fs54-7b. 相似文献
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明串珠菌所致菌血症一例报告 总被引:1,自引:0,他引:1
明串珠菌属(Leuconostoc spp)原来一直被认为是生产奶制品、发酵、酿酒和制糖工业中所需要的细菌,而不是致病菌.1984年,Shlaes等[1]首次报道了明串珠菌造成的感染,自此以后国外有6人陆续报道了有关明串珠菌造成的人体感染.经检索中国生物医学期刊数据库,在国内还没有明串珠菌感染人体的报道.我们于近期在一例慢性粒细胞白血病患者的血液中培养出明串珠菌,现报道如下. 病历资料:患者,男,38岁,汉族 ,已婚.于2000年5月19日入院.5个月前无明显诱因出现乏力,伴腹胀、纳差.4个月前查血象WBC 304×109/L,幼稚细胞占3%,Hb近100?g/L.查体脾大、肋下15?cm,胸骨压痛阳性,骨髓增生活跃,原粒+早幼粒细胞占4.5%,最后确诊为慢性粒细胞白血病.应用COAP方案(环磷酰胺、长春新碱、阿糖胞苷和泼尼松)治疗后用羟基尿和干扰素治疗.近来,患者持续发热,体温一直保持在37.5~39.2℃,脉搏80~100/min,血压18.6/10.6?kPa(140/80?mmHg).使用抗白血病药物后,WBC 降至2.4×109/L,PLT 18×109/L.患者曾有腹泻,大便显微镜检查WBC: 0~3/HP,RBC: 8~12/HP.血清ALT 59?U/L,总蛋白35.8?g/L,白蛋白24.6?g/L,球蛋白11.2?g/L;血清总胆红素134.5?μmol/L,直接胆红素85.5?μmol/L.患者有胸水,胸水总蛋白为13.5?g/L.使用去甲万古霉素(0.8?g/d)治疗7?d不能控制体温. 相似文献
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幽门螺旋杆菌(Hpy)是急性胃炎和大多数慢性胃炎的病原菌,与胃、十二指肠溃疡的病理改变关系密切,与胃癌也有很高的相关性。对Hpy清除不彻底是胃及十二指肠疾病复发的重要原因之一,所以检测微量、残存的Hpy有着重要的临床意义。本文建立THpy的PCR检测技术,用PCR产物直接克隆构建重组质粒pHP01,测序证实了PCR扩增的正确性,并用常见的胃肠道细菌证实了扩增的特异性。建立了PCR微量快速扩增法,最低可检出Hpy基因组DNA100fg,用长臂光敏生物素标记探针进行转印杂交检测Hpy的PCR产物,检… 相似文献
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建立应用长臂光敏生物素核酸探针和光敏地高辛核酸探针杂交。检测真菌的方法,并比较二者检测临床常见医学真菌的敏感性。设计并合成医学真菌通用引物,用PCR扩增白色念珠菌标准株的核糖体RNA基因,用长臂光敏生物素或光敏地高辛标记其纯化的扩增产物制备成相应的核酸探针,然后用上述两种探针对标本中的PCR扩增产物进行Southern杂交,检测医学真菌。通过用白色念珠菌感染大鼠,建立念珠菌病的实验动物模型,验证血培养法、PCR法和PCR扩增结合Southern杂交,检测真菌的敏感性。结果表明,这两种核酸探针可分别与白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌、黄曲霉菌、烟曲霉菌等9种真菌杂交呈阳性结果:与临床常见的细菌、病毒和哺乳动物组织细胞DNA杂交结果为阴性。利用实验动物模型比较了血培养法、PCR法和PCR扩增结合长臂光敏生物素核酸探针Southern杂交法检测真菌血症的灵敏度,实验证明后者的敏感性最高。总之,应用长臂光敏生物素核酸探针和光敏地高辛核酸探针与标本PCR扩增物杂交,检测上述真菌既特异和敏感,又不需放射性同位素。光敏地高辛核酸探针检测医学真菌的灵敏度略高于长臂光敏生物素核酸探针。 相似文献