次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立

目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HGPRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础.方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8...     

宫颈癌患者miR-92a与miR-224表达水平及其诊断价值

目的 探究宫颈癌患者血清微小RNA-92a(miR-92a)与微小RNA-224(miR-224)表达水平及其诊断价值。方法 选取2017-01-02-2021-12-02太仓市第一人民医院收治的宫颈癌患者104例作为研究组。患者年龄22～70岁,平均年龄(53.96±10.02)岁。病理类型：均为鳞状细胞癌。国际妇产科联盟临床分期：Ⅰ期20例,Ⅱ期56例,Ⅲ期28例。另选取100名健康体检者作为对照组。抽取空腹静脉血,检测2组血清中微小RNA-92a(miR-92a)、微小RNA-224(miR-224),对比2组miR-92a与miR-224表达水平及其诊断价值。收集并整理病理资料,以■表示计量资料,行t检验;以n(%)表示计数资料,行χ²检验。结果 研究组miR-92a、miR-224相对表达高于对照组,差异有统计学意义,P<0.05。miR-92a的表达对宫颈癌诊断的最佳截断点为5.25,灵敏度67.92%,特异度80.00%,AUC为0.687,95%CI为0.598～0.767;miR-92a的表达对宫颈癌诊断的最佳截断点为4.62,灵敏度64....     

M蛋白干扰临床实验室检测项目的研究进展

M蛋白是一种特殊的免疫球蛋白,其存在可能影响一些临床血液检验项目的实验室检测结果。M蛋白的干扰存在于检验前、检验中和检验后,严重影响其他检测项目的准确性。在血清肌酐、尿酸、脂蛋白、总蛋白、胆红素、血糖、血磷、血红蛋白、糖化白蛋白检测中,高浓度的M蛋白可造成结果出现假性高值或假性低值;在25-OH维生素D、促甲状腺素、C反应蛋白、万古霉素、庆大霉素、丙戊酸钠药物浓度的检测中,M蛋白的异常存在干扰了实际检测结果。针对以上问题,解决方案包括如检验前稀释血清或去除蛋白、检验中使用蛋白稳定剂或优化反应条件等。临床上,还可以发现隐匿性的M蛋白,能够在疾病发生前有效检出M蛋白,对于疾病的治疗和预后发展都将出现新的转机。     

psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒的构建及在真核细胞中的表达

［摘要］目的: 以psiCHECK-2质粒为骨架,构建带有远红外荧光蛋白mLumin和增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,eGFP）的双荧光蛋白报告基因质粒psiCHECK-2-eGFP-mLumin。方法： PCR扩增mLumin和eGFP基因片段,分别取代海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶插入psiCHECK-2质粒中,构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因重组质粒mLumin。通过测序验证插入序列,并将此质粒转入HEK293T细胞,分别用PCR和荧光显微镜鉴定eGFP和mLumin在细胞中的表达。结果： DNA测序结果证实连接在psiCHECK-2质粒上的eGFP和mLumin基因序列与基因库中的序列一致。将psiCHECK-2-eGFP-mLumin质粒转染HEK293T细胞,能成功表达eGFP和mLumin蛋白。结论： 成功构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒,且可在真核细胞中表达。     

CD39+和CD73+调节性T细胞与原发性胆汁性胆管炎肝脏损伤的相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者腺苷代谢通路相关分子的变化及其与PBC炎性损伤的关系。方法连续选择2016年10月-2017年10月在太仓市第一人民医院和常熟市第二人民医院就诊的PBC患者49例和体检健康者36例。流式细胞术分析外周血腺苷代谢通路关键分子CD39和CD73在CD4+T细胞和Foxp3+调节性T细胞(Treg)中的表达情况,高效液相色谱串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析患者血清三磷酸腺苷(ATP)水平。分析以上指标的统计学差异及其与肝脏炎性损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)和Mayo评分之间的相关性。结果 PBC组CD4+CD39+T细胞占CD4+T细胞比例[(5.28±1.92)%]较对照组[(11.01±3.19)%]显著降低(t=10.25,P0.01),CD4+CD25+Foxp3+CD39+T细胞(CD39+Treg)在Foxp3+Treg中所占比例[(23.75±9.48)%]同样显著低于对照组[(54.68±5.18)%],差异有统计学意义(t=13.79,P0.01)。PBC组和对照组CD4+CD73+T细胞在CD4+T细胞中的占比和CD4+CD25+Foxp3+CD73+T细胞在Foxp3+Treg中的占比差异无统计学意义(t值分别为2.235和1.083,P0.05)。PBC组血清ATP水平[(200.28±79.41)μg/L]明显高于对照组[(89.20±33.76)μg/L],差异有统计学意义(t=8.367,P0.01)。PBC组CD39+Treg占Treg比例与ATP、GGT和Mayo评分水平呈负相关关系(r值分别为-0.413、-0.378和-0.382,P值分别为0.003、0.007和0.007)。结论 CD39+Treg在PBC患者中比例显著降低,可能通过降低ATP的分解导致炎性损伤加剧。CD73+Treg在PBC患者中未见明显变化。