心肌缺血再灌注损伤小鼠E1A激活基因阻遏子基因表达及其对心肌的保护作用

目的探讨心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury,MIR)小鼠E1A激活基因阻遏子基因(cellular repressor of E1A-stimulated gene,CREG)表达变化,及其对损伤心肌的保护作用。方法 CREG基因半敲除C57BL/6模型小鼠18只(A组),36只未敲除CREG基因C57BL/6小鼠随机分为B、C组各18只,3组采用线栓法制备MIR模型。建模前B组皮下微渗透泵给予外源性重组CREG蛋白1.5mg/(kg·d),连续14d,A、C组给予等量生理盐水。MIR后2h各组均处死6只小鼠,采用Western blot法检测心肌CREG蛋白表达,反转录PCR法检测心肌CREG mRNA表达;MIR后12h各组均取6只小鼠检测左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左心室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV),血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,GOP)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);MIR 24h检测各组剩余6只小鼠心肌细胞凋亡指数。结果 A组心肌组织CREG蛋白、CREG mRNA表达(0.33±0.07、0.51±0.09)低于B组(0.85±0.19、0.97±0.10)、C组(0.67±0.15、0.99±0.05)(P0.05);C组CREG蛋白表达低于B组(P0.05),CREG mRNA表达与B组比较差异无统计学意义(P0.05);A组LVEF[(34.2±3.1)%]低于B、C组[(58.7±5.1)%、(41.4±4.5)%](P0.05),LVEDV[(121.8±14.0)μL]、LVESV[(77.2±9.0)μL]高于B组[(93.1±7.7)、(43.8±6.1)μL]、C组[(95.0±8.5)、(45.2±5.4)μL](P0.05),C组LVEF低于B组(P0.05);A组血清CK[(1 481.6±339.2)]u/L、CK-MB[(539.5±54.0)u/L]、GOP[(519.8±43.2)u/L]、LDH[(923.8±211.3)u/L]高于B组[(682.3±155.9)、(458.7±44.4)、(431.2±29.7)、(401.4±98.6)u/L]、C组[(874.0±193.5)、(489.1±47.1)、(460.0±32.5)、(600.5±115.8)u/L](P0.05),且C组各指标均高于B组(P0.05);A组心肌细胞凋亡指数[(57.21±2.26)%]明显高于B、C组[(16.94±1.75)%、(26.16±1.90)%](P0.05),C组高于B组(P0.05)。结论 CREG蛋白高表达对MIR心肌具有保护作用,其机制可能与减轻心肌细胞凋亡、降低心肌酶水平有关。