南京地区18759例住院新生儿TORCH检测结果分析

目的了解南京地区住院新生儿TORCH感染情况,为相关疾病诊疗提供参考依据。方法采用化学发光免疫分析法对该院2014-2017年18 759例住院新生儿进行弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSVⅠ+Ⅱ)IgM进行血清学检测。结果新生儿TORCH-IgM总阳性率为0.51%,CMV-IgM阳性率最高(0.23%),其次为HSV-IgM(Ⅰ+Ⅱ)0.17%,RV-IgM 0.10%,TOX-IgM0.02%,差异有统计学意义(P0.05)。RV-IgM阳性患儿中,男性新生儿阳性率为0.14%,女性新生儿阳性率为0.05%,差异有统计学意义(P0.05);TORCH-IgM阳性患儿中,早产儿39例,非早产儿56例,早产患儿少于非早产患儿,且早产患儿中HSV感染人数最多;CMV-IgM阳性率呈现逐年上升的趋势,2014-2017年CMV-IgM阳性率分别为0.15%、0.19%、0.24%、0.38%。结论南京地区住院新生儿TORCH-IgM阳性率较低,以CMV感染为主,但CMV-IgM阳性率有逐年上升的趋势,防治形势仍然不可轻视。     

基于羊水代谢组学的唐氏综合征差异代谢物和代谢通路研究

目的:通过非靶向代谢组学的方法分析唐氏综合征(DS)胎儿母体羊水样本,探索DS差异代谢物及其相关代谢通路.方法:应用病例对照研究,6例DS胎儿母体羊水样本作为病例组,40例非DS胎儿母体羊水样本作为对照组,气相色谱飞行时间质谱(GC-TOF-MS)检测所有样本.采用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)分析两组代谢...     

患者数据移动均值法在新生儿遗传代谢病筛查项目室内质控的应用

目的探讨患者数据移动均值法在新生儿遗传代谢病串联质谱检测中室内质量控制的应用方法和价值。 方法收集新生儿筛查样本的串联质谱检测数据，采用常规商品化质控品联合患者数据移动均值法对串联质谱检测项目的室内质量控制进行监控，并评价其效果。 结果根据患者数据移动均值法规则，发现20161027批次实验失败原因为分析前因素，即样本保存不当导致降解；20170620批次实验中使用的商品化质控品存在质量问题。 结论患者数据移动均值法可有效帮助实验室管理室内质量控制，是串联质谱检测中无质控品指标的主要质控方法，是传统质控方法的有益补充。     

异戊酸血症基因新发变异蛋白结构预测

目的 探索异戊酸血症的临床及致病基因突变特点。方法 收集1例异戊酸血症的临床资料及提取患儿及父母外周血基因组DNA，采用基于高通量测序技术的基因Panel进行诊断；同时收集国内已经报道的异戊酸血症的临床资料进行汇总，分析其临床表型和基因特点。结果 本例患儿串联质谱检测结果显示：异戊酰基肉碱初筛值为0.61μmol/L（正常参考值：0.04～0.35μmol/L），召回复查值为0.55μmol/L，尿气相色谱质谱分析：异戊酰甘氨酸含量为0.62 mmol/mol肌酐，略高于正常值。随访至2岁龄无症状，基因诊断结果示IVD:c.149G>C/c.233G>A。其中c.233G>A未见文献报道，蛋白结构预测该位点可能影响FAD结合效率，导致酶活降低，评估为致病性变异。结论 异戊酸血症临床表现无特异性，早期可无症状。新生儿串联质谱筛查有助于该病的早期诊断。     

C14∶1/C12∶1在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症中的应用价值

目的探讨非衍生化串联质谱法(MS/MS)中十四烯酰基肉碱(C14∶1)/十二烯酰基肉碱(C12∶1)在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)中的应用价值, 并探索筛查VLCADD的最佳指标组合方案。方法回顾性分析2014年1月至2021年12月南京市新生儿疾病筛查中心和苏州市新生儿疾病筛查中心17例MS/MS筛查发现并经酰基辅酶A脱氢酶极长链(ACADVL)基因确诊的VLCADD患儿和423 507名经MS/MS筛查正常的新生儿资料。采用受试者工作特征(ROC)曲线分别确定所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1筛查VLCADD的截断值。同时将不同指标单独或联合组成5个结果判读方案, 分别为方案1(C14∶1/C12∶1)、方案2(C14∶1)、方案3(C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16)、方案4(C14∶1/C12∶1+C14∶1)和方案5(C14∶1/C12∶1+C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16), 并计算各方案的检出率、假阳性率、阳性预测值, 采用χ2检验比较其筛查效率。结果所有新生儿组、足月新生儿组和正...     

非靶向代谢组学方法探究母体羊水中先天性心脏病差异代谢物及相关代谢通路

摘要:目的?通过非靶向代谢组学方法探究先天性心脏病(congenital heart disease，CHD)差异代谢物和代谢通路。方法?采用病例-对照研究，以78例CHD胎儿母体羊水样本作为CHD组，126例非CHD胎儿母体羊水样本作为对照组。应用气相色谱飞行时间质谱(GC-TOF-MS)检测2组代谢物。采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行建模，通过多维和单维统计分析寻找差异代谢物。KEGG数据库进行代谢通路富集分析，R语言绘制ROC曲线。结果?CHD组与对照组间存在明显分离趋势，2组间共发现43种差异表达的代谢物(P<0.05)，主要涉及谷氨酸和精氨酸等多条代谢通路。苏氨酸和核糖醇在室间隔缺损(VSD)及法洛四联症(TOF)之间存在差异(P值分别为0.018和0.037)。苯丙氨酸检测VSD敏感性最高(100%)，谷氨酸/焦谷氨酸比值检测VSD特异性最高(97.5%)；尿酸和天冬酰胺检测TOF敏感性最高(100%)，谷氨酸/焦谷氨酸比值检测TOF特异性最高(82.5%)。结论?羊水代谢组学分析证实CHD存在多种代谢物的变化，且多条代谢通路被扰动。     

电喷雾串联质谱法检测干血斑中谷氨酰胺、谷氨酸及其临床初步应用

目的?建立一种采用电喷雾串联质谱法（ESI-MS／MS）检测干血斑样品中谷氨酰胺（Gln）和谷氨酸（Glu）含量的方法，评价其用于筛查新生儿鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症和氨甲酰磷酸合成酶缺乏症的可行性。方法?收集2020年6—9月新生儿筛查足跟血干血斑样品，用非衍生化串联质谱检测试剂盒萃取样品，完成常规串联质谱检测项目后，将残余样品作为Gln 和Glu的检测对象，复溶后选择正离子扫描模式进行分析测定，统计分析ESI-MS／MS 检测Gln 和Glu 的正确度、精密度和稳定性，并评价其临床应用。结果?Gln在125～1 250 μmol／L浓度范围内回收率和正确度均良好，回收率为98.01%～107.24%，偏倚为0.56%～4.8%；Glu在250～1 250 μmol／L浓度范围内回收率良好，回收率为102.06%～113.65%，在250～1 250 μmol／L浓度范围内正确度良好，偏倚为0.09%～7.67%。Gln精密度良好，Glu精密度稍差。稳定性实验证实在样品复溶前后，Gln 差异无统计学意义，但Glu差异有统计学意义。结合Gln和Glu检测结果，6份鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症确诊患儿干血斑样品检出率为100%，并确定Gln的参考区间为＜106.63 μmol／L，Glu 的参考区间为＜188.24 μmol／L。结论?成功建立了检测Gln 和Glu的ESI-MS／MS法，该方法操作简单、成本低，不影响临床常规检测。     

基于芯片捕获二代测序技术在新生儿疾病筛查中的应用

目的 探讨芯片捕获二代测序技术在新生儿疾病筛查中的临床应用价值。方法 收集新生儿遗传代谢病筛查干血滤纸片样本，采用芯片捕获二代测序技术对169种常见疾病致病基因的已报道致病位点进行检测，检出位点采用Sanger测序验证。结果 150例样本中有4例为可疑阳性患者(阳性率为2.67%),88例为致病基因携带者(携带率为58.67%),58例未检测到致病基因变异。其中，携带1个致病基因变异的样本高达40.7%,最多可见携带4个不同的致病基因变异。携带频率最高的致病基因为GJB2和SLC26A4,其次为PAH、SLC22A5、DUOX2、SLC12A3、USH2A及ACADS。结论 基于芯片捕获二代测序技术的新生儿疾病筛查扩大了筛查病种，与传统生化筛查结果进行结合和分析，可有效降低筛查假阳性率，提高阳性预测值，具有重要的临床价值。     

四例极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症患儿的串联质谱及基因变异分析

目的:探讨4例极长链酰基辅酶A脱氢酶(very long chain acyl-coenzyme A dehydrogenase,VLCAD)缺乏症的临床特征及基因变异特点。方法:对新生儿筛查中十四烯酰基肉碱(C14：1)≥0.4 μmol/L的新生儿召回复查,通过串联质谱、基因检测确诊4例VLCAD缺乏症患儿,对确诊...