组胺对大鼠正常肝细胞及缺氧/复氧时肝细胞活力的影响

目的:评价组胺对大鼠正常肝细胞及缺氧/复氧时肝细胞活力的影响。方法:大鼠肝细胞株,调整细胞密度为1×107cells/L,接种于培养孔中,每孔200μL作为研究对象,本研究包括2个实验,各实验中研究对象随机分为7组。实验1:空白组和2×104μg/L组各12孔,其它各组各6孔,空白组不做任何处理,10μg/L组、102μg/L组、103μg/L组、104μg/L组、2×104μg/L组和5×104μg/L组分别加入相应浓度的组胺,孵育25h,各组取6孔,测定肝细胞活力,取空白组和2×104μg/L组的其它6孔,收集细胞培养上清液和细胞,分别用于测定谷丙转氨酶(ALT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,电镜观察细胞超微结构。实验2:分组方法同实验1,空白组和2×104μg/L组各12孔,其它各组各6孔,空白组不做任何处理,加入相应浓度的组胺后立即进行缺氧1h、复氧24h,各组取6孔,测定肝细胞活力,取空白组和2×104μg/L的其它6孔,收集细胞培养上清液和细胞,分别用于测定ALT和SOD的活性,电镜观察细胞超微结构。结果:实验1:与空白组比较,103μg/L组-5×104μg/L组肝细胞活力增加,且呈浓度依赖性,2×104μg/L组SOD活性升高(P0.05),ALT活性差异无显著(P0.05);电镜下空白组和2×104μg/L组肝细胞未见损伤。实验2:与空白组比较,102μg/L组-5×104μg/L组肝细胞活力降低,其中2×104μg/L组和5×104μg/L组肝细胞活力降低更明显,2×104μg/L组ALT活性升高,SOD活性降低(P0.05),2×104μg/L肝细胞损伤重于空白组。结论:组胺可增加大鼠正常肝细胞活力,且呈浓度依赖性,2×104μg/L组胺可提高其抗氧化能力;组胺可降低缺氧/复氧时大鼠肝细胞活力,且与浓度有关,2×104μg/L组胺可降低其抗氧化能力。     

肝移植围术期血液中单核细胞TLR4表达和血清细胞因子变化的关系

目的： 探讨肝移植围术期血液中单核细胞TLR4及血清细胞因子浓度的变化。方法：采集15例肝移植患者外周静脉血，用流式细胞仪检测单核细胞TLR4的表达；ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-8，分析TLR4表达与细胞因子的关系。结果：单核细胞TLR4在新肝期3 h、新肝24 h显著上调表达(P<005)；新肝24 h细胞因子的浓度显著高于其它各时间点 (P<001)；新肝24 h时TNF-α、IL-1β和IL-8的浓度与单核细胞TLR4的表达呈正相关(P<005)；发生急性肺损伤患者TLR4表达强且血清细胞因子水平升高。     

门、腔静脉阻断与开放对门静脉高压模型犬肺组织与肺动脉iNOS、eNOS和ET表达的影响

目的观察门静脉和下腔静脉阻断与开放后门静脉高压模型犬肺组织和肺动脉的病理学特点及诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和内皮素（ET）基因与蛋白表达的变化。方法正常家犬18只,随机均分为阴性对照组、对照组和门静脉高压模型组,进行门静脉和肝后下腔静脉阻断与开放实验。在术毕观察右下肺动脉和肺组织病理形态学特征,并检测肺组织和肺动脉iNOS、eNOS和ET基因与蛋白表达的变化。结果模型组与对照组肺组织和肺动脉在经历门、腔静脉阻断与开放后均存在不同程度病理形态学改变,但以模型组改变更为显著;模型组肺组织iNOS和肺动脉iNOS、eNOS基因和蛋白的表达显著强于阴性对照组和对照组（P〈0．05）。结论肺组织和肺动脉在经历门、腔静脉阻断与开放后均存在明显的病理形态学改变。肺动脉iNOS和eNOS基因和蛋白表达水平明显上调,可能在一定程度上参与门静脉高压肝移植围术期肺循环的变化;而门静脉高压肝移植围术期易并发急性肺损伤则可能与肺组织中iNOS基因和蛋白表达水平上调有关。     

Proseal喉罩在妇科腹腔镜手术麻醉中的应用

目的观察正压通气下Proseal喉罩用于妇科腹腔镜手术的安全性、可行性。方法妇科腹腔镜择期手术病人50例,ASAⅠ~Ⅱ级,随机分为喉罩组(L组,25例)和气管插管组(T组,25例),麻醉后记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)、气道峰压(Pmax)、气道平均压(Pmean)、脉搏血氧饱和度(SpO2)、呼气末二氧化碳分压(PETCO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)的数值及插管(罩)期、拔管(罩)期、术后24h相关并发症。结果(1)HR、MAP变化:插管(罩)期和拔管(罩)期T组明显升高(P<0.05),L组无明显变化(P>0.05)。(2)两组PETCO2、PaCO2、Pmax、Pmean随麻醉、气腹的影响变化是一致的,组间比较各时间点差异无显著性(P>0.05),两组的SpO2一直保持稳定水平。(3)两组并发症比较:插管(罩)期L组有3例体动,1例呛咳,T组无体动及呛咳,差异无显著性(P>0.05);拔管(罩)期T组体动、呛咳发生率明显高于L组(P<0.05);术后24h咽痛、声嘶发生率T组明显高于L组(P<0.05)。(4)手术医师对手术条件的评价100%满意。结论本研究显示妇科腹腔镜手术中Proseal喉罩可以达到与气管插管一样满意的通气效果,且安全可靠。     

异丙酚对LPS诱导中性粒细胞Toll样受体2和Toll样受体4表达的影响

目的 探讨异丙酚对内毒素(LPS)诱导中性粒细胞Toll样受体2(TLR2)和TLR4表达的影响.方法 健康志愿者6名,年龄20～35岁,各采集外周静脉血样50 ml,加入20 U/ml肝素抗凝,分离提纯中性粒细胞,制备细胞悬液,然后随机分为6组,每组6皿:对照组(C组)不给予任何药物,置于37℃、5%CO_2培养箱中培养12 h;异丙酚脂质溶剂intralipid组(I组)、异丙酚组(P组)和LPS组(L组):分别加入intralipid(终浓度为5 μg/ml)、异丙酚(终浓度为5 μg/ml)或LPS(终浓度为1μg/ml),置于37℃、5%CO_2培养箱中孵育12 h;intralipid+LPS组(IL组)和异丙酚+LPS组(PL组)先分别加入intralipid(终浓度为5 μg/ml)或异丙酚(终浓度为5 μg/ml)后,置于37℃、5%CO_2培养箱中孵育20 min,然后加入LPS(终浓度为1μg/ml),置于37℃、5%CO_2培养箱孵育12 h.采用流式细胞仪测定中性粒细胞膜TLR2和TLR4的表达;采用荧光定量PGR检测中性粒细胞膜TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达;采用ELISA法测定培养上清液TNF-α和IL-8的浓度.结果 与C组比较,I组和P组TLB2和TLR4的表达、1NF-α和IL-8L-8的浓度差异无统计学意义(P>0.05),L组和IL组TLR2和TLR4的表达上调,L组TNF-α和IL-8L-8的浓度升高,IL组IL-8浓度升高(P<0.05);与L组比较,IL组TLR2和TLR4的表达、TNF-α和IL-8L-8的浓度差异无统计学意义(P>0.05),PL组TLR2和TLR4的表达下调,TNF-α和IL-8L-8的浓度降低(P<0.05).各组TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 异丙酚可下调LPS诱导的中性粒细胞TLR2和TLR4的表达,从而抑制炎性反应.     

氯胺酮复合曲马多病人自控静脉镇痛用于肝功能不全患者术后镇痛

目的　研究小剂量氯胺酮复合曲马多应用于肝功能不全患者术后病人自控静脉镇痛(PCIA)的可行性和安全性。方法 4 0例肝炎后肝硬化合并脾功能亢进需行脾切除术的患者 ,ASAⅡ～Ⅲ级 ,随机等分为T组 (曲马多 15 0 0mg、恩丹西酮 8mg加生理盐水至 15 0ml)、TK组 (曲马多12 0 0mg、氯胺酮 30 0mg、恩丹西酮 8mg加生理盐水至 15 0ml)。两组持续输注速度 0 0 3ml·kg 1·h 1,首剂为 0 1ml/kg ,单次PCA给药剂量 2ml,锁定时间 15min。记录术后第 2、4、8、16、2 4、36、4 8、72h的VAS评分、PCIA用药量、PCA总按压次数 /有效按压次数 (D/D)、呼吸和循环的状况以及不良反应的发生情况。结果　两组患者一般情况相同 ,术后第 3天的肝功能与术前相比无显著差异 (P >0 0 5 )。两组患者呼吸通畅 ,SpO2 均在 96 %以上。在术后 36h内TK组的VAS评分、用药量、D/D明显低于T组 (P <0 0 1) ,36h以后无显著差异 (P >0 0 5 ) ;两组患者的并发症发生率无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　小剂量氯胺酮复合曲马多可以改善镇痛效果 ,明显减少曲马多的用量 ,可以安全有效地应用于肝功能不全的患者术后静脉镇痛     

肝移植围术期中性粒细胞Toll样受体4表达与术后全身炎症反应综合征的关系

目的研究肝移植围术期中性粒细胞Toll样受体(TLR4)表达和血清炎性因子浓度的变化及其与肝移植术后全身炎症反应综合征(SIRS)的关系。方法设计自身配对实验,采集18例肝移植患者麻醉后手术前、无肝25 min、新肝3 h、新肝24 h时的中心静脉血,用流式细胞仪检测中性粒细胞TLR4的表达;ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-8浓度;通过术后随访,按术后7 d内是否发生SIRS,将患者分为SIRS组(n=7)与非SIRS组(n=11),分析围术期中性粒细胞TLR4表达与术后SIRS的关系。结果肝移植术后出现SIRS和未出现SIRS的患者术前Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分无显著性差异(p>0.05);在SIRS患者中,中性粒细胞TLR4表达在无肝期25 min和24 h显著上调(p<0.05),围术期血清TNF-α、IL-1β和IL-8浓度也显著升高(p<0.01,p<0.05),与TLR4的表达呈正相关(p<0.05);而在非SIRS患者中,中性粒细胞TLR4表达及血清细胞因子的浓度无明显变化。结论肝移植围术期中性粒细胞TLR4表达上调可能是术后发生SIRS的高危因素。     

曲马多与地塞米松预防产妇腰硬联合麻醉后寒战效果比较

目的　观察曲马多和地塞米松预防产妇腰硬联合麻醉后寒战的效果。方法　 60例择期在腰硬联合麻醉下行剖宫产的产妇 ,ASAⅠ～Ⅱ级 ,随机分为T组 (曲马多组 )、D组 (地塞米松组 )、C组 (对照组 ) ,每组 2 0例。麻醉后产妇平卧 ,T组即给予曲马多 3 0mg静脉注射 ;D组即给予地塞米松 10mg静脉注射 ;C组即给予生理盐水 0 0 5ml/kg静脉注射 ,药物预防组均采用 0 0 5ml/kg生理盐水稀释。持续监测围术期呼吸、循环的变化 ,测定麻醉阻滞平面 ,记录胎儿出生后的Apgar评分 ,观察记录产妇寒战发生的情况。结果　 3组产妇一般情况相同 (P >0 0 5 ) ;3组产妇呼吸通畅 ,SpO2 均在 95 %以上 ,围术期循环变化差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;3组胎儿出生后Apgar评分差异亦无显著性 (P >0 0 5 ) ;预防性用药组产妇麻醉后寒战的发生率显著降低及寒战程度较轻 (P <0 0 5 )。结论　曲马多 3 0mg和地塞米松 10mg静脉注射能够完全有效的预防腰硬联合麻醉后产妇的寒战反应 ,综合比较 ,曲马多可能是一个更好的选择。     

NO吸入对肝移植急性肺损伤大鼠肺组织iNOS、IL-1β及IL-6的影响

【目的】观察一氧化氮(NO)吸入对肝移植急性肺损伤大鼠肺组织诱导型NO合酶(iNOS)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响与意义。【方法】选用SD大鼠24只,按随机数字表法分为对照组(C组)、自体原位肝移植组(M组)和NO吸入组(T组),每组8只。对照组开腹游离肝叶后即关腹,后两组行大鼠自体原位肝移植。对照组及自体原位肝移植组术后于室内吸空气,NO吸入组术后即放入特制的密封盒内(NO体积分数为20×10-6)。手术结束后8 h行肺脏病理检查,测定肺组织干湿质量比(W/D),并检测iNOS、IL-1β、IL-6水平。【结果】①C组肺组织结构基本正常,M组肺组织炎症损伤明显,T组肺组织炎症损伤较M组明显减轻。②M组肺组织W/D明显高于对照组,T组则低于M组,但仍高于对照组。③M组iNOS活性及蛋白表达、IL-1β、IL-6水平较C组明显升高,T组则较M组降低,但仍高于C组。【结论】肝移植术后NO吸入可抑制肺组织iNOS活性及蛋白表达,降低IL-1β、IL-6水平,肺组织病理损伤减轻,干湿质量比下降。     

自体原位肝移植大鼠急性肾损伤的研究

【目的】 建立SD大鼠自体原位肝移植模型,观察自体模拟肝移植后大鼠肾功能与病理学变化特点【方法】 SD大鼠40只,随机分为对照组(C组,n = 8)和模型组(M组),模型组根据肝脏再灌注时间,再分为再灌注4 h模型组(M1组,n = 8),再灌注8 h模型组(M2组,n = 8),再灌注16 h模型组(M3组,n = 8),再灌注24 h模型组(M4组,n = 8)4个亚组?对照组在麻醉后只进行开腹和血管的分离,不进行肝脏的阻断和灌注;模型组则进行自体肝移植手术,分别在肝脏再灌注后4?8?16?24 h时取左肾组织和血标本,观察其血肌酐?尿素氮和病理形态学变化【结果】与C组相比,模型组大鼠肾脏在肝脏再灌注后出现明显的病理学损伤,可见间质出现较多炎性细胞浸润,肾小管扩张,部分肾小管上皮细胞变性,坏死,脱落,较多管型形成,在再灌注8 h时最为显著,在再灌注16 h开始修复;血清肌酐和尿素氮在肝脏再灌注后明显升高,在再灌注后16 h达到高峰,在24 h恢复?【结论】 SD大鼠经历自体原位肝移植后,肾脏出现病理损伤和功能损害