肠道病毒71 VP1基因的原核表达及其抗血清的制备

目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备VP1抗血清,ELISA检测抗体效价。同时构建真核表达载体,利用其在真核细胞中的瞬时表达检测抗血清的特异性。结果通过克隆获得VP1原核表达载体,IPTG诱导VP1蛋白表达并纯化,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达且纯化浓度较高,将重组蛋白乳化后免疫新西兰兔3次,取血检测抗血清的效价,ELISA结果显示抗体效价为1∶64 000,利用所构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP1表达VP1对抗血清进行检测,Western blot结果表明抗血清可较好的与VP1特异性结合。结论制备具有免疫原性的VP1蛋白及其效价较高的抗血清,为进一步研究抗EV71诊断方法、血清学诊断试剂盒及抗病毒疫苗的研制奠定基础。     

国产高敏HCV-RNA定量试剂与国产普敏及进口高敏试剂一致性分析

目的 分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法 选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与国产普敏HCV-RNA核酸检测试剂B进行HCV-RNA定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果均为阳性的样本（≥500 IU/mL,87例）进行Bland-Altman一致性分析;选择稀释样本（15～500 IU/mL,60例）,采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂C进行HCV-RNA平行定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果进行Bland-Altman一致性分析。结果 Bland-Altman分析显示试剂A与试剂B定量值差值均值为（-0.032 6）log10IU/mL,95%置信区间为（-0.462 6～0.397 4）log10IU/mL,95.4%(83/87)的样本检测值在95%置信区间内。试剂A与试剂C定量值差值均值为0.180 0 log10IU/mL,95%可信...     

半夏泻心汤治疗慢性胃病随机平行对照研究

[目的]观察半夏泻心汤治疗慢性胃病疗效。[方法]使用随机平行对照研究,将150例门诊患者按随机数字表法分为两组。对照组75例甲氰米呱片,0.1g/次,3次/d。土霉素片,0.5g/次,3次/d。干酵母片,0.9g/次,3次/d。治疗组75例半夏泻心汤(半夏、黄连各10g,黄芩9g,干姜10g,党参15g,炙甘草10g,大枣7枚);1剂/d,水煎120mL,早晚口服。热象偏重去党参加大黄10g;寒象偏重加吴茱萸3.5g;气滞加香附、木香各10g;黑便加白及10g,煅瓦楞子15g。连续治疗7d为1疗程。观测临床症状、不良反应。连续治疗4疗程,判定疗效。[结果]治疗组痊愈31例,显效21例,有效18例,无效5例,总有效率93.33%。对照组痊愈22例,显效16例,有效23例,无效14例,总有效率83.33%。治疗组疗效优于对照组(P0.05)。[结论]半夏泻心汤治疗慢性胃病效果显著,值得推广。     

Nesfatin-1致肠易激综合征内脏高敏感发生机制的研究

肠易激综合征(IBS)是一种慢性肠道功能障碍性疾病,由于病因和发病机制尚未明确,临床治疗效果仍欠佳。Nesfatin-1是一种来源于核组蛋白2的新型脑肠肽,可与多种调节蛋白相互作用,参与机体能量代谢、糖脂平衡、胃肠运动、摄食调节等许多生理和病理过程。内脏高敏感是IBS重要的生物学特征和发病机制之一,Nesfatin-1可通过多种途径在IBS内脏高敏感的病理生理过程中发挥重要作用,因此,Nesfatin-1有望成为治疗IBS内脏高敏感的一个新型靶点,为IBS的临床治疗提供新思路和策略。