上海人群面肩肱型肌营养不良症相关位点的D4Z4多态性

目的 对上海人群4p35位点D4Z4重复序列进行研究，分析D4Z4的多态性。方法 191名正常上海人的基因组DNA经EooR I/Bln I双酶水解后，应用脉冲场凝胶电泳及Southem印迹测定其染色体4p35位点的D4Z4片段长度，并对短的D4Z4片段Kpn I酶进行部分酶切以计数其D4Z4串联重复序列数。结果 在191名正常上海人群中，有17人（占8.9％）携带短的D4Z4片段，其长度在22－34kb之间；其中16人携带的短D4Z4片段位于4q35位点，1人携带的短D4Z4片段为4q35→10q26。结论 面肩肱型肌营养不良症的发病虽与4q35位点D4Z4片段的串联重复序列数减少有关，但上海人群中携带4q35位点短的D4Z4片段个体的比例明显高于西方人群，提示其他因素可能也参与面肩肱型肌营养不良症的发病。     

免疫细胞化学标记在积液细胞学鉴别诊断中的应用

目的 探讨免疫细胞化学特异性标记非肿瘤性增生的间皮细胞、转移性腺癌及恶性间皮瘤细胞在积液细胞学鉴别诊断中的意义。方法 浆膜腔积液标本170例,苏木素-伊红（HE）染色,镜检细胞学形态,免疫细胞化学标记一系列单克隆抗体：癌胚抗原（CEA）、上皮细胞膜抗原（EMA）、细胞角蛋白（CK）、上皮相关抗原（MOC-31）、上皮细胞钙粘蛋白E、波形蛋白（VIM）和结蛋白。酶染色采用生物素化酶二步法。采用双盲法阅读免疫细胞化学染色结果。结果 上述几种抗体在反应性增生的间皮细胞、癌和恶性间皮瘤3组标本中表达差异有统计学意义（P〈0．01）。其中癌症组的CEA、EMA、MOC-31、钙粘蛋白E和CK阳性表达率分别为88％、97％、89％、92％和94％,而VIM和结蛋白呈现低表达,阳性表达率分别为6％和11％。良性间皮细胞标本组中,VIM和结蛋白阳性表达率分别为84％和91％,而CEA、EMA、MOC-31、钙粘蛋白E显示低表达,阳性表达率分别为13％、16％、9％和6％。恶性间皮瘤标本组中,CK、VIM、结蛋白呈现强阳性表达,阳性率为100％,而CEA、EMA、MOC-31、钙粘蛋白E表达呈阴性。结论 选择一组特异性免疫细胞化学标记,可帮助传统的细胞形态学检查,对良、恶性浆膜腔积液的鉴别诊断起重要作用。     

尿液中肿瘤标志物检测在膀胱癌诊断中的应用研究进展

膀胱癌是一种十分容易复发的恶性肿瘤,治疗后需严密随访。目前膀胱镜检查及可疑病变处活检仍是膀胱癌诊断和随访的金标准[1]。然而,这些检查属侵入性检查,患者有一定痛苦,还可能会导致尿路感染,这使膀胱镜检查的临床应用受到限制。尿细胞学检查(urinarycytology)是非侵入性检查,能直接识别尿中脱落的肿瘤细胞,它对诊断膀胱癌的特异性很高,但敏感性较低,尤其对低分级肿瘤的敏感性仅为20%～40%。理想的早期诊断和监测膀胱癌的方法应该是客观的、非侵入性的、具有高敏感性和特异性,且操作简便,费用低廉。本文就近年来用尿液中肿瘤标志物检测膀…     

用尼龙毛法组分淋巴细胞

本文报道用尼龙毛法分离T和B淋巴细胞。讨论了血小板的去除以及用涤纶纤维代替尼龙毛,用 Hanks液代替 199培基的使用。结果表明,用本法分离 T、B淋巴细胞是一种简易、快速、纯度较好、得率高、基本上不损害细胞的方法。     

桥本甲状腺炎患者白介素-2及受体与甲状腺过氧化物酶抗体的关系

目的：探讨桥本甲状腺炎（HT）患者外周血中白介素-2（IL-2）及白介素-2受体（IL-2R）与甲状腺过氧化物酶抗体（TPoAb）的关系。方法：将86例HT患者分为初诊、复诊2组,并另选20名健康体检者作为正常对照组。采用酶联免疫吸附（ELISA）夹心法检测受检者外周血中的IL-2及IL-2R,并采用微粒子酶免化学发光分析法检测TPoAb浓度水平,观察IL-2及IL-2R与TPoAb的关系。结果：IL-2在初诊HT组、复诊HT组与正常对照组中的含量分别为（25.01±3.31）ng/L、（23.17±5.89）ng/L和（24.05±3.92）ng/L,3组间两两比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;IL-2R在初诊HT组、复诊HT组和正常组水平分别为（1125.94±743.87）ng/L、（722.93±640.06）ng/L和（293.48±113.35）ng/L,3组间两两比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。复诊HT组的TPoAb含量为（169.75±44.36）IU/L,高于正常组的（8.30±1.70）IU/L,低于初诊HT组的（460.96±299.05）IU/L,3组间两两比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。HT患者外周血中的IL-2R含量与TPoAb水平呈正相关（r=0.696,P〈0.01）。结论：HT患者外周血IL-2R含量升高,且与TPoAb水平呈正相关,检测IL-2R含量有助于观测患者的免疫功能状态。     

新型富集方法在结核分枝杆菌检测中的应用

结核病(tuberculosis)主要是由结核分枝杆菌感染引起的疾病,目前全球大约20亿人,即约占全球1/3的人口感染过结核分枝杆菌。每年与结核分枝杆菌感染有关的病例数超过880万例,而将近200万人死于此病。世界卫生组织专家预测如果未来病情不进一步加强控制,到2020年新发现的感染结核分枝杆菌的患者数可达10亿,死亡人数将达3 600万。及时诊断和治疗是防止结核病的有力措施,也是全球控制结核病的重要举措。     

Beckman Coulter LH750血液分析仪复检规则的制定和评价

目的制定和评价本院Beckman Coulter LH750血液分析仪复检规则。方法上海瑞金医院门诊与病房标本共1000份乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝的全血标本对复检规则草案进行评估,另选取2007年8月至2007年9月经血常规审核软件DM2审核的门诊、病房20695份标本结果对复检规则进行评价。结果通过检测1000份标本,其2．2％的假阴性低于国际血液学复检专家组制定5％的最大允许范围。其假阴性主要集中于有核红细胞、红细胞形态和血小板形态3个项目。经对20695份标本结果进行分析,本室复检规则自动确认占总标本的66．4％,需复检占33．6％,仪器报警分布以中晚幼粒细胞（IMM．NE2）报警为多,占44．4％,血小板聚集（PLT Clumps）其次,占16．9％,细胞计数超出审核范围共5943项,以血小板计数为多（28．4％）,其中首次结果超出审核范围的以白细胞（29．9％）、血小板（31．6％）居多,与历次前后差异结果相比较（8-check）未通过审核的共1148例,以血小板计数居多。结论目前,复检规则的制定和执行越来越受到重视,可以提高血常规检验质量,减少差错,我院采用白细胞分类百分比作为衡量指标,相对“41条复检规则”中的白细胞分类规则,我院的分类采用的百分比作为衡量指标要求更为严格,减少了其假阴性的发生率。加大血小板复查量,可有效地发现假性血小板聚集,提高了我院的报告质量。关于历史结果我院因门诊患者一般1至2周复诊,故将历史结果比较定在2周。允许范围初步订在20％,但仍需对此进行进一步的探讨。     

血友病A携带者检测与产前诊断

目的 建立简便、快速的血友病A携带者检测与产前诊断体系。方法 用PCR方法直接检测FⅧ内含子22倒位或对FⅧ基因内的BclⅠ位点、内含子13和22中STR和FⅧ基因外的DXS52（ST14）位点的多态性进行遗传连锁分析。结果 应用内含子22例位的直接诊断率为47．6％;Bcl Ⅰ位点的可诊断率为27．8％;内含子13和22中STR的可诊断率分别为28．6％及29．4％;DCS52的可诊断率为81．3％;综合应用直接诊断和间接遗传连锁分析,对21个家系进行检测,可诊断率为94．7％。结论 血友病A的携带者检测与产前诊断可先进行内含子22倒位的检测,若结果为阳性即可作出诊断;若内含子22例位的检测结果为阴性,则可利用FⅧ基因内、外的多个位点多态性结果进行遗传连锁分析,以作出最终的诊断。     

Duchenne型肌营养不良症病人中出现"返祖纤维"的免疫荧光和分子生物学研究

目的：探讨临床诊断为Duchenne型肌营养不良（Duchenne's muscular dystrophy,DMD)病人的免疫荧光检测中出现“返祖纤维”现象的可能机制。方法；对病人的肌肉组织行免疫荧光检查抗肌营养不良蛋白（dystrophin)抗体，并同时对病人DMD基因中的25个外显子进行检测。结果：21例病人中有5例出现“返祖纤维”现象，即在免疫荧光检测中有单个或一小簇肌纤维呈阳性反应，其余呈阴性表现，多重PCR检测该5例病人，其中3例有外显子缺失。结论：“返祖纤维”现象提示：病人的个别肌纤维可能存在完整的抗肌营养不良蛋白基因表达，其发病机制可能有别于传统意义上的DMD发病机制。“返祖纤维”现象可用来评估病人的预后，并为临床治疗提供一些新的思路。     

用腺苷处理区分人类T淋巴细胞亚群的初步观察

本文报告人的外周血T淋巴细胞在体外用腺苷处理后可分成两个亚群:AS细胞(腺苷敏感细胞)和AR细胞(腺苷抵抗细胞),AS和AR细胞的正常值以及它们的表面标志和一般形态学及超微结构特征,证明约80％的AS细胞有对IgG分子的Fc受体,AS和AR细胞主要是T细胞。两种细胞在超微结构方面有显著的差别。用ConA-SC模型测定AS细胞中含有高的ConASC活性,而AR细胞则否。