阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎过程中乙型肝炎病毒基因型变化情况分析

目的研究阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)过程中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型变化情况。方法选取16例应用ADV治疗的CHB患者作为研究对象,用一片段PCR法扩增了用药前(baseline,BL)、用药后第28周、52周、92周时的HBV全基因组,克隆后进行全基因组序列测定及基因型分型。结果16例CHB患者治疗开始时(baseline,BL)的HBV基因型分布为:B型9例,C型7例,未发现A、D、E、F基因型。但有5例患者在接受ADV治疗后的28周、52周、92周,基因型发生了变化即从B型变为C型,或从C型变为B型。结论本研究发现,在ADV治疗CHB过程中,31.25%患者体内的HBV基因型发生了变化。这种变化产生的原因及其生物学意义,有待于进一步研究。     

广州地区人腺病毒5型血清中和抗体阳性率初步调查

目的评估广州地区人群中人腺病毒5型(HAdV-5)中和抗体阳性率情况。方法采用以β-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的人重组腺病毒5型载体,运用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人血清样本中HAdV-5的中和抗体。结果 HAdV-5中和抗体的阳性率为82.3%(172/209)。HAdV-5中和抗体在<1:20(低滴度)、1:40-1:160(中滴度)、1:320-1:1280(高滴度)、>1:1280(超高滴度)时均能检测到,而且随着滴度的增加,阳性率逐渐升高。在20～40岁时HAdV-5中和抗体阳性率最高,在<20岁时HAdV-5阳性率最低。结论广州地区人群中针对HAdV-5的先存中和抗体阳性率高,应用基于该种DNA病毒作为载体进行基因疫苗及基因治疗的研究时,具有一定的局限性。     

人文关怀护理在提高卵巢癌患者生活质量及 改善心理状态中的作用

目的评价人文关怀护理在提高卵巢癌患者生活质量及改善心理状态中的作用。方法选取2014年9月—2018年8月收治的卵巢癌患者共计122例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组61例,观察组给予人文关怀护理措施,对照组给予常规护理措施,观察并比较2组患者治疗后生存质量评分、心理状态评分以及不良反应的发生情况。结果对照组生活质量中各项指标评分均优于对照组,差异具有统计学意义(P 0. 05)。治疗前2组患者焦虑自评量表和抑郁自评量表评分相比,差异不具有统计学意义(P 0. 05);治疗后,2组焦虑自评量表和抑郁自评量表评分均有改善,治疗后观察组与对照组心理状态评分相比,差异具有统计学意义(P 0. 05)。2组患者治疗后不良反应的发生率相比,差异具有统计学意义(χ2=4. 3399,P 0. 05)。结论对卵巢癌患者采用人文关怀护理措施可明显提高患者生活质量,改善患者心理状态,降低不良反应的发生率,值得在临床上予以推广。     

广州地区猴腺病毒7型血清流行病学初步调查

目的评估广州地区猴腺病毒7型(SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况。方法首先构建以β-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ。然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-7中和抗体阳性率情况。结果我们发现SAdV-7中和抗体的阳性率为27.8%(58/209)。SAdV-7中和抗体在低滴度时阳性率最高,并且随着滴度的升高,阳性血清分布率逐渐降低。在20～40岁人群中,SAdV-7中和抗体阳性率最高,在<20岁人群中未检测到SAdV-7中和抗体。结论广州地区人群中针对SAdV-7的先存中和抗体阳性率低。因此,SAdV-7在基因治疗及基因疫苗的应用上是一个具有吸引力的候选载体。     

狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排在小鼠致病性和保护性研究

目的 了解M基因重排对病毒致病性和免疫保护性的影响,从而为狂犬病疫苗的开发提供更适合的候选株。方法 将病毒rHEP-Flury和M基因重排株颅内接种1～3 d龄的乳鼠,测定病毒在乳鼠上的半数致死量(LD₅₀)。将rHEP-Flury和M基因重排株以10³、10⁴和10⁵ FFU免疫接种6~8周龄的成鼠,然后用标准攻毒株CVS-24进行颅内感染小鼠,测定小鼠的存活率。同时用ELISA方法检测小鼠血清抗体水平。结果 狂犬病病毒HEP-Flury的M基因重排后,病毒对乳鼠的毒力随着M基因位置远离病毒启动子位置增强,即M24和10⁵FFU时,M基因重排对病毒在成鼠上的保护性没有统计学意义影响;当接种剂量为10³FFU时,M基因重排病毒对小鼠的保护性明显高于rHEP-Flury。结论 狂犬病病毒HEP-Flury的M基因重排能够降低病毒对乳鼠的毒力,提高对小鼠的保护性,为狂犬病疫苗开发奠定基础。     

多重PCR快速鉴定大肠杆菌O157

目的根据GenBank中编码大肠杆菌16SrRNA的基因、rfbE(O157抗原基因)、vt1(Vero毒素1基因)、vt2(Vero毒素2基因)和eaeA(紧密素基因)5种基因的特异性序列,设计合成5对引物,建立了快速鉴定大肠杆菌O157的多重PCR方法。该方法的检测敏感度为细菌纯培养物为104CFU/ml,含菌3-4CFU/g鸡肉组织样品经预增菌8h后能检出。用此方法检测2000-2004年间从动物组织和粪便中临床分离的64株菌株,结果10株鉴定为大肠杆菌O157,与血清凝集试验结果完全吻合。其中8株能扩增上述5条特异性条带,与预期产物完全一致,2株能扩增出除vt1基因外的4条特异性条带,其它54株菌株只能扩增出大肠杆菌16SrRNA。该方法能直接鉴定产多种毒力因子的大肠杆菌O157,特异性强,为检测和鉴定大肠杆菌O157提供了一个新方法。     

HBV特异性CTLs表面CD244和PD-1共表达与慢性乙型肝炎严重程度的相关性

 目的：探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血乙型肝炎病毒（HBV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）表面CD244与程序性死亡蛋白1（PD-1) 的共表达模式及其与疾病进展的关系。方法：采集81例CHB患者和14例健康者外周血,分离外周血单个核细胞（PBMC）;利用主要组织相容性复合体I（MHC-I）-肽五聚体技术标定HBV表位特异性CTLs;荧光抗体标记细胞表面CD244与PD-1分子,流式细胞术检测。结果：CHB患者CD244与PD-1在HBV特异性CTLs表面共表达较总CD8⁺ T细胞表面明显升高（67.48%±17.16% vs 14.01%±7.97%,P<0.01）;HBV感染的不同临床类型中,轻中度的CHB患者HBV特异性CTLs表面CD244与PD-1共表达水平较免疫耐受者明显升高(72.05%±16.86% vs 53.11%±18.05%,P<0.05),肝衰竭组CD244与PD-1共表达水平较轻中度CHB下调（63.11%±13.87% vs 72.05%±16.86%,P<0.05）并伴随干扰素γ（IFN-γ）分泌功能的恢复（30.95%±20.29% vs 13.63%±10.46%,P<0.01）。结论：CHB患者HBV特异性CTLs细胞表面高共表达CD244与PD-1分子,CD244与PD-1共表达在CHB不同临床类型中有差异,并与IFN-γ分泌水平呈负相关,提示CD244可能与CHB患者HBV特异性CTLs功能低下及CHB疾病进展相关。     

广州地区人腺病毒5型血清中和抗体阳性率初步调查

目的评估广州地区人群中人腺病毒5型（HAdV-5）中和抗体阳性率情况。方法采用以β-半乳糖苷酶（LacZ）为报告基因,结合CMV启动子的人重组腺病毒5型载体,运用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人血清样本中HAdV-5的中和抗体。结果 HAdV-5中和抗体的阳性率为82.3%（172/209）。HAdV-5中和抗体在〈1：20（低滴度）、1：40-1：160（中滴度）、1：320-1：1280（高滴度）、〉1：1280（超高滴度）时均能检测到,而且随着滴度的增加,阳性率逐渐升高。在20～40岁时HAdV-5中和抗体阳性率最高,在〈20岁时HAdV-5阳性率最低。结论广州地区人群中针对HAdV-5的先存中和抗体阳性率高,应用基于该种DNA病毒作为载体进行基因疫苗及基因治疗的研究时,具有一定的局限性。     

广州地区猴腺病毒7型血清流行病学初步调查

目的 评估广州地区猴腺病毒7型( SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况. 方法 首先构建以B-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ.然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-7中和抗体阳性率隋况. 结果 我们发现S...