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1.
PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及在SW480细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL-3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系.为PRb-3基因功能研究奠定基础.方法 设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTRTM/U6线性载体定向连接,构建pENTRTM/U6真核入门表达载体.通过与pENTRTM/U6 entry clone与pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST载体进行重组,获得pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体.利用包装细胞293FT获得重组的慢病毒,感染大肠癌细胞株SW480细胞,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰PRL-3基因的细胞亚系.结果 成功构建PRL-3 pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为6×105U/L.RT-PCR、Western blotting结果 表明,克隆1 PRL-3mRNA及蛋白显著降低.结论 成功构建人PRL-3基因特异性的慢病毒干扰载体,获得PRL-3基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系. 相似文献
2.
目的 探讨比伐卢定(直接凝血酶抑制剂)在大鼠胰岛分离过程中保护胰岛细胞的作用.方法 将SD大鼠分为比伐卢定处理组和对照组,处理组在胰岛分离全过程中加用比伐卢定进行干预,对照组则不加比伐卢定处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡(采用原位末端核苷酸标记法及流式细胞仪检测)、胰岛产量及活力方面进行比较性研究.结果 比伐卢定5000U处理组的胰岛细胞凋亡计数(5±4)个/HPF、凋亡率(16.5±3.6)%、Fas-1基因表达水平(4.6±1.9)%均显著低于对照组(P<0.01),胰岛产量(315.3±6.1)IEQ、胰岛素释放水平(179.11±2.18)mIU/L和Bcl-2基因表达水平(10.5±1.2)%均显著高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义.结论 胰岛分离过程中加用比伐卢定对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量和保护胰岛活力的作用. 相似文献
3.
目的 确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合.方法 应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子结合.结果 应用TRED在线分析系统确定PRL-3基因的启动子区域位于PRL-0基因上游-700 bp至299 bp之间,在该启动子区域存在多个转录因子如Snail、n-MYC、ARNT、E74A、NF-kappaB、NRF-2及AML-1等的结合位点;在启动子区域的-500 bp至-451 bp之间存在Snail结合的核心寡核苷酸序列CACCTG,在其他多个区域存在多个类似这一核心序列的DNA序列;应用染色质免疫沉淀技术结合PCR扩增的方法对人大肠癌细胞株SW480细胞进行分析,发现Snail可与人大肠癌细胞株SW480 PRL-3基因的启动子区域的DNA片断结合.结论 转录因子Snail可与人大肠癌细胞SW480 PRL-3基因启动子结合,参与PRL-3基因的调控. 相似文献
4.
美白化妆品卫生质量分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:分析美白产品存在的问题,为监督管理提供控制点。方法:采用《化妆品卫生规范》(2002年版)所提供的方法进行铅、汞、砷及微生物指标的检测。结果:经结果分析显示,美容院的美白产品存在严重问题,汞不合格率高达43.8%,且某些样品汞含量为10^4~10^4mg/kg,超过国家标准数万倍,甚至数十万倍。结论:必须加强对美容院产品的监督管理,扩大对美容从业人员的培训。 相似文献
5.
[目的 ]调查香波、浴液化妆品中二口恶烷的含量及人群接触量。 [方法 ]二口恶烷含量测定采用顶空 -气项色谱法 ,人群接触量调查采用讯问调查和推算相结合的方法。 [结果 ]1 2 2件国产香波中二口恶烷检出率为 63 9% ,95 %位数为 1 73 42 μg/g ;64件进口香波中二口恶烷检出率 5 6 2 % ,95 %位数为 34 68μg/g。两样本有显著性差异 (P <0 0 5 )。 5 6件国产浴液中二口恶烷检出率为 47 0 6% ,95 %位数为 1 1 1 6μg/g;进口、合资浴液中二 口恶烷检出率 42 4% ,95 %位数为 1 4 0 2μg/g。两样本有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,沐浴时二 口恶 烷接触量为 0 0 0 1mg/(kg·d)。 [结论 ]本研究调查结果表明 ,二口恶烷检出率高达 63 9% ,国产香波、浴液中二口恶烷含量高于进口及合资产品 ,最高含量为 40 0 μg/g。但是通过人群对香波、浴液中二 口恶 烷的接触量的调查结果 ,与资料报道的危险度评估结果 ( 0 8mg/kg·d- 1 )相比较 ,本研究认为 :不会对人体产生危害。由于考虑二口恶烷具有致癌活性 ,为严格管理洗涤类化妆品卫生质量 ,减少其危害程度 ,建议进行动态监督、检测。 相似文献
6.
目的探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞相应的生物学特性的影响。方法常规进行细胞培养,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞结构;应用运动小室实验检测PRL-3对结直肠癌迁移能力的影响;应用细胞粘附实验测定细胞在I型胶原上的粘附性。结果粘附实验结果表明,与SW480/EGFP/mock和SW480/EGFP细胞相比,SW480-EGFP-PRL-3细胞的粘附能力增强,而SW480-PRL-3-KD1细胞的粘附能力减弱,差异有统计学意义(F=22.013,P〈0.01)。运动小室实验证明,SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW480/EGFP/mock及SW480-PRL-3-KD1细胞的运动能力差异有统计学意义(F=21.368,P〈0.01),说明PRL-3与结直肠癌细胞的运动迁移能力有关。结论 PRL-3基因是结直肠癌细胞粘附、迁移的促进基因。 相似文献
7.
柳玉红 《安徽预防医学杂志》2005,11(6)
超声雾化吸入疗法(以下简称雾化)是应用超声波声能使药液变成细微气雾,再由呼吸道吸入,达到稀释痰液,帮助驱痰,消除炎症,湿化气道,解除支气管痉挛,改善通气的目的。我科2002~2004年收治的80例新生儿肺炎患儿应用超声雾化吸入作为辅助治疗,并经精心护理均收到较好的治疗效果。现 相似文献
8.
9.
目的:建立用电子控温加热板消化化妆品同时测定砷、汞、铅和镉的方法。方法:将样品置于聚四氟乙烯罐体中,加入过氧化氢和硝酸,利用电子控温加热板的温控装置调节温度,消解样品。采用火焰原子吸收分光光度法测定化妆品中铅和镉,氢化物原子荧光光度法测定化妆品中汞和砷。结果:最佳消化条件是0.5 g样品,加2 ml过氧化氢和5 ml硝酸,100℃消化2 h,赶氮1 h。用本法所测样品的平均回收率在95.9%~105.9%之间,各类样品的相对标准偏差在1.4%~7.0%。结论:此方法的准确度好、精密度高,且适于实验室大批样品的检测。 相似文献
10.
浸提法同时测定化妆品中铅和汞 总被引:1,自引:0,他引:1
浸提法同时测定化妆品中铅和汞北京市卫生防疫站(100013)于慧芳柳玉红夏平张勐测定化妆品中铅、汞的国家标准检验方法中的浸提法(GB7917.1-7917.4-87)分别用硝酸和过氧化氢进行消解。由于所加试剂量及定容方式各异,使测定同一样品中的铅和汞... 相似文献