PBL与LBL相结合教学法在人体解剖学教学中的运用

目的探讨PBL与LBL相结合教学法在人体解剖学教学中的教学效果。方法将本校2013级美容班156人随机均分成LBL组、PBL组和PBL＋LBL组3组,采用教师评教和考试测评进行教学效果评估。结果 PBL教学法与LBL教学法具有很强的互补性,二者结合,能取得较为满意的教学效果。结论 PBL与LBL相结合教学法不仅增强了学生对课本内容的记忆,而且使学生能将所学知识灵活运用到临床病例分析中,提高了学生的综合素质。     

CIK细胞体外逆转多药耐药性的研究

目的:研究CIK细胞体外逆转多药耐药(multidrug resistance,MDR)可行性。方法:用人外周血分离出的单个核细胞,在不同细胞因子诱导下培养成细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)及树突状细胞(DC),然后将其与成熟DC进行共培养,作为效应细胞,以K562敏感株与耐药细胞株为靶细胞进行体外逆转研究。流式细胞术检测靶细胞的P-gp表达及细胞内的ADR相对含量,MTT法测定其细胞毒作用,RT-PCR检测mdr-1基因耐药性逆转表达状况。结果:K562/ADR耐药细胞株ADR含量经效应细胞细胞作用后,细胞内的ADR含量分别提高了13.80%、39.50%,(P<0.01);,P-gp分别降低12.00%、42.69%,(P<0.01),mdr-1基因表达呈下调趋势,效应细胞对靶细胞的细胞毒作用分别达45.8%、78.9%,(P<0.01)。结论:CIK+K562/ADR-DC对P-gp高表达K562/ADR耐药细胞株具有特异性的细胞毒作用,有效提高了细胞内的ADR含量,下调了P-gp、mdr-1表达,使免疫效应细胞体外逆转多药耐药的效果得以显现。     

CMV感染监测在同种异基因造血干细胞移植中的应用

目的 探讨不同方法CMV监测在同种异基因造血干细胞移植中应用的可行性.方法 应用荧光定量VCR(FQ-PCR)和酶联免疫(ELISA)试剂盒分别检测13名 allo-HSCT 受者、170份标本的血浆 DNA 负荷量和血清IgM抗体.同时应用流式细胞术(FCM)检测94份标本白细胞pp65 抗原.结果 FQ-PCR、FCM、ELISA 栓出率分别为:35.51%、30.85%、13.08%.FQ-PCR与FCM方法对CMV感染的阳性检出率差别无统计学意义(P>0.05),ELISA的阳性检出率明显低于 FQ-PCR 和 FCM,其差别具有统计学意义(P<0.05).结论 FCM检测pp65抗原和FQ-PCR检测DNA负荷量可用于allo-HSCT后CMV感染的早期诊断.     

应用FACS检测CIK的抗肿瘤活性

目的 探讨体外CIK细胞(cytokine-induced killer)对肿瘤细胞的细胞毒作用.方法 从健康人外周血分离淋巴细胞,经过IFN γ、CD3McAb、IL-2诱导、培养,获得CIK细胞.FACS检测CIK细胞的表型;用CFSE标记靶细胞以区分效应细胞,再以PI染色,FACS检测靶细胞的死亡率.结果 CIK细胞高度表达CD3、CD8 、CD3 CD8 、CD3 CD56 ,依次为089.33%、46.26%、58.98%、30.83%.CIK对NK敏感的K562及不敏感HL60、Hela均表现出较强杀伤活性.结论 细胞因子IFN γ、CD3McAb、IL-2体外诱导的单核细胞具有强大的增殖力和杀伤活性及非MHC限制性.     

异基因造血干细胞移植后微小残留病灶的动态监测

目的探讨bcr／abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病(CML)治疗效果及微小残留病灶监测方面的价值。方法应用RT—nested—PCR方法定期检测异基因造血干细胞移植(allo—HSCT)治疗慢性粒细胞性白血病患者前后融合基因表达情况。结果异基因造血干细胞移植患者在移植后1个月到2个月bcr／abl融合基因转阴率为76％,100天转阴率达88％。结论RT—nested PCR方法检测bcr／abl融合基因可以作为临床诊断、判定预后的指标,适用于微小残留病变的监测。     

细胞因子诱导杀伤细胞联合阿霉素逆转人红白血病耐药细胞株K562/ADR的研究

目的 探讨细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞与阿霉素对肿瘤多药耐药逆转作用的影响.方法 体外诱导、扩增人外周血单个核细胞(PBMC)作为效应细胞,联合不同浓度的阿霉素与其耐药靶细胞K562/ADR进行共培养,经四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法计算半数抑制浓度(IC50)、耐药倍数和逆转倍数;流式细胞仪检测细胞内阿霉素相对含量和P糖蛋白(Pgp)表达水平;RT-PCR检测mdr-1基因mRNA表达.结果 阿霉素对K562和K562/ADR的IC50分别为(0.68±0.04)μmol/L和(66.23±4.38)μmol/L;K562/ADR对阿霉素的耐药倍数为97.43倍;经CIK细胞联合阿霉素处理48 h(效靶比1:5、ADR 1.1 μmol/L)后,IC50为(32.15±0.79)μmol/L,联合逆转倍数为2.06倍.细胞内的阿霉素相对含量增加的同时Pgp表达降低.mdr-1基因mRNA相对表达值也呈下调趋势.结论 CIK细胞联合阿霉素可增加化疗药物阿霉素对耐药靶细胞K562/ADR的敏感性,提高耐药靶细胞内的阿霉素浓度,有效下调mdr-1基因及Pgp的表达,使CIK联合阿霉素对多药耐药的逆转效果得以显现.