基因技术与中药现代化

目前,基因技术在中药领域应用较多的是基因指纹图谱,主要针对药材鉴定,而在药靶基因、毒副反应基因以及药用基因与活性蛋白/肽类等方面的研究则较少涉及。本文介绍了基因技术在上述中药研究与开发应用领域的作用。同时提出了一些新见解。     

联合检测五项生化指标在慢性肾脏病诊断中的意义

目的:了解尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、β2-微球蛋白(β2-MG)和胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)五项肾功能指标在慢性肾脏病(CKD)诊断中的意义。方法:使用全自动生化分析仪对137例CKD患者和50例正常人血清中五项肾功能指标进行检测,检测结果进行统计学分析。结果:CKD疾患组血清中Urea、Cr、UA、β2-MG和Cys-C浓度与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。在诊断CKD中,各单项指标敏感度以β2-MG和Cys-C为最高,为83.9%和91.2%,在糖尿病肾病、高血压肾病的诊断中阳性率达62.5%、69%和79.5%、86.5%。组合检测较单项指标敏感度和准确度高,各种组合检测中,以联合检测五项肾功能指标组敏感度和准确度最高,达100%和97.9%。结论:多指标联合检测CKD方法简便,敏感性、特异性和准确度高,对CKD预报具有重要价值,适合在临床工作中推广使用。     

从噬菌体抗体库中筛选D二聚体特异的Fab抗体

目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D二聚体单克隆抗体并进行可溶性表达。方法:以人D二聚体标准品为抗原对所构建的噬菌体抗体库进行两轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,从中筛选出抗人D二聚体的噬菌体Fab抗体,并在大肠杆菌细胞中进行可溶性表达。结果:经4次电转化构建了库容为2. 8×108cfu的抗体库,滴度为4. 1×1014PFU/mL,Fab基因重组率为46%。经过淘筛后携带抗人D二聚体抗体的特异性噬菌体得到了明显的富集。用试剂盒以ELISA法检测对人D二聚体的结合活性,得到抗人D二聚体单克隆抗体。筛选出的阳性克隆成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达筛选出的阳性克隆在大肠杆菌细胞中可溶性表达。结论:人D二聚体标准品对抗体库的淘筛,富集了表面呈现抗人D二聚体的单克隆抗体的噬菌体,成功构建了人源性抗D二聚体噬菌体抗体,并成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达。     

五项诊断指标联合检测对糖尿病肾病患者应用的价值

目的：研究糖尿病肾病（DN）患者血清同型半胱氨酸（HCY）、胱抑素C（Cys—C）、仪1-微球蛋白（α1-MG）、可溶性血栓调节蛋白（sTM）及C反应蛋白（CRP）等5项诊断指标的变化及其诊断价值。方法：将292例糖尿病患者（DM组）分为单纯性糖尿病组（SDM组）95例,早期糖尿病肾病纽（EDN组）98例,临床糖尿病肾病组（CDN组）99例,与健康对照组（102例）平行检测上述5项指标。结果：DM组各项指标水平明显高于健康对照组（P〈0．01）。糖尿病肾病组（DN）血清5项指标水平组间存在显著差异（P〈0．01）。并且随着DN病情进展,各项指标随着24h尿蛋白排泄率（UAER）的增加逐渐增高（P〈0．01）,且互相之间关系密切,表明其升高与DN的发生、发展密切相关。在DM患者的病情发展过程中,HCY、Cys—C、α1-MG、sTM、CRP最早出现,可为疾病的早期诊断提供数据。结论：血清HCY、CYS—C、α1-MG水平可作为DN早期肾损伤的反应肾小球滤过功能的敏感指标;sTM反映高HCY水平的DN患者的微血管损伤程度;CRP与DN患者病情正相关,可作为DN患者病情检测新指标,5项联合检测可提高检出敏感性及阳性率,全面协助DN肾损伤的早期诊断。     

电化学发光法和酶联免疫吸附法对HBSAg和HBSAb测试结果的评价

目的：探讨电化学发光法（ECLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的差异。方法：分别使用ECLIA和ELISA法对2013年1-12月广州医学院荔湾医院收集的标本进行HBV-M检测,分析两种检测方法的差异及临床应用价值。结果：两种检测方法测定HBs Ag的阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,有较好的一致性（Ka Pp=0.96）。ELISA法测定HBs Ab的S/CO比值〉11.0者156例,其中152例ECLIA法测定值〉100 mlU/mL,一致性达97.4%。结论：ELISA法测定HBs Ag与ECllA法测定结果一致;与ECLIA相比,ELISA测定的HBs Ab具有肯定的免疫保护作用的S/CO比值〉11.0;不具有免疫保护作用的S/CO比值〈5。     

关于肉桂酸锗类化合物治疗剂量毒副作用的实验研究

目的本文对肉桂酸锗类化合物的毒副作用进行了研究探讨。方法（1）采用急性毒性试验计算半数致死量和最大耐受量；（2）计算脾重指数和胸腺指数；（3）镜下观察各脏器病理变化。结果（1）无法计算出LD50说明药物毒性甚小，动物最大耐受量可达1．2g／Kg体重；（2）治疗组小鼠脾重指数和胸腺指数几乎均无统计学意义，说明对小鼠的免疫功能在短期内无明显影响；（3）治疗组各脏器镜下未见明显药物损伤的病理变化。结论实验证明肉桂酸锗类化合物无明显毒副作用，这为进一步的抗肿瘤活性研究及开发应用提供了可靠依据。     

HC2-HPV-DNA联合TCT筛查宫颈癌早期及癌前病变的临床分析

目的:探究采用二代杂交捕获法检测高危人乳头瘤病毒DNA(hybrid capture2-human papillomavirus-DNA,HC2-HPV-DNA)方法联合薄层液基细胞学(thinprep cytology test,TCT)检查在宫颈癌早期及癌前病变筛查中的应用价值。方法:采用两种方法对本院妇科门诊377例发现宫颈病变的患者进行筛查,同时做病理组织学活检。结果:HC2-HPV-DNA的阳性率随着宫颈病变严重程度的增加而升高,差异有统计学义意(P<0.05),HC2-HPV-DNA与TCT联合检测时,对于CINⅠ及以上病变诊断的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为93.2%、87.1%、90.2%、88.1%和92.6%,均较单独应用时显著提高。结论:HC2-HPV-DNA与TCT方法联合运用可提高宫颈癌早期及癌前病变诊断的准确性。     

动脉氧分压对心肺复苏后患者生存时间的影响

目的：了解动脉氧分压（PaO2）对末梢循环差的患者生存时间的影响。方法：选择心肺复苏术后机械通气的91例ICU死亡患者,入院末梢血氧均≤80％,根据PaO2分组：第一组60～80mmHg;第二组80～150mmHg;第三组〉150mmHg,分析对生存时间的影响。结果iPaO260～80mmHg组和PaO2〉150mmHg组两组患者的生存时间较PaO280～150mmHg组短,P〈0．001。而PaO2〉60且〈80mmHg组和PaO2〉150mmHg组两组患者生存时间长,P〈0．05。结论：动脉血氧分压适度患者具有较长的生存时间;动脉氧分压过高可能给患者带来严重的损害。     

单纯疱疹病毒抗体检测在生殖器疱疹断中的应用

目的 探讨单纯疱疹病毒(HSV)抗体检测对生殖器疱疹的诊断意义,了解疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒感染情况.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)对140例疑似生殖器疱疹患者(观察组)进行HSV抗体检测.另选100例健康体检人员血清作为对照组.结果 140例疑似生殖器疱疹患者HSV-ⅠIgM、HSV-ⅠIgG的检出率分...     

社区医疗机构多重耐药铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶检测

目的 了解多重耐药铜绿假单胞菌(M RPA)的社区感染情况及产金属β内酰胺酶(MBL)情况.方法 2011年1月至12月在广州市多个社区医院收集分离出MRPA 54株.采用MicroScan Walk Away 40S1全自动细菌鉴定与药敏检测系统检测其对亚胺培南等11种抗菌药物的耐药性,比较亚胺培南耐药铜绿假单胞菌与亚胺培南敏感铜绿假单胞菌对常用9种抗菌药物的耐药率.改良三维实验分析亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产MBL情况.结果 54株MRPA中有29株对亚胺培南耐药,占53.7％( 29/54).三维试验显示有9株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产MBL,占31.0％( 9/29).亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对常用7种抗菌药物的耐药率显著高于亚胺培南敏感铜绿假单胞菌(头孢他啶:65.5％比36.0％;头孢噻肟:89.7％比44.0％;头孢曲松:100.0％比52.0％:氨曲南:72.4％比36.0％,氧氟沙星:70.0％比32.0％;哌拉西林-他唑巴坦:58.6％比16.0％;阿米卡星:62.1％比32.0％,均P＜0.05).结论 社区医疗机构临床分离MRPA 产MBL的比率较高.