人脐血间充质干细胞的分离与纯化

目的:探讨人脐血间充质干细胞(MSC)的培养纯化条件。方法:比较不同的梯度离心速度及时间、接种密度、首次换液时间、不同培养基对脐血中的MSC分离及原代培养过程的影响,以流式细胞仪对优化条件下培养的MSC进行细胞周期分析,并对细胞表面标志进行检测。结果:在其他条件不变的情况下,以1 000g×15 min的梯度离心速度及时间分离脐血为最宜,5×106/mL是脐血MSC培养的适宜接种密度,首次换液时间7 d。优化条件下培养的MSC传至3代时,几乎全部强表达CD29、CD44。结论:建立了一种优化的人脐血MSC分离纯化方法。     

大鼠胚胎脊髓组织移植的实验研究

为研究大鼠胚胎脊髓组织至成鼠后影响移植存活、生长、再生及与宿主神经元功能联络的的因素，采用快速提取、移植胚胎脊神经元细胞悬液（ＥＴ），并设加入自体现周围神经雪旺氏细胞（ＳＣ）悬液移植组（ＥＳＴ）对照。结果两组移植神经元均有不同程度存活。ＥＴ组存活数最多（Ｐ〈０．０１），ＥＳＴ组分化最好（Ｐ〈０．０１），术后１０周辣根过化酶（ＨＲＰ）逆行示踪有神经功能联络。认为移植的胚胎脊髓神经元可存活、分化，并与     

人脐血间充质干细胞体外向神经元样细胞分化的实验研究

目的:探讨来源于人脐带血的间充质干细胞体外诱导分化成神经元样细胞的可行性。方法:采用密度梯度离心方法分离人脐带血单个核细胞,用MesenCult培养液体外扩增生长传代培养,于倒置显微镜下观察其生长特性。取第3代的脐血间充质干细胞,用10μg／L成纤维细胞生长因子和30μmol／L全反式维甲酸诱导培养的细胞向神经细胞分化。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,于诱导前、诱导后5 d和10 d分别进行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色。结果:培养3代的脐血间充质干细胞经全反式维甲酸和成纤维细胞生长因子诱导后发生形态改变,呈双极或多极的神经元样形态,诱导5 d时神经元特异性烯醇化酶表达率为(30.3±5.2)％,而诱导10 d时达到(53．9±6.5)％,二者差异有统计学意义(P<0．05),不表达胶质纤维酸性蛋白。结论:脐血间充质干细胞经成纤维细胞生长因子和全反式维甲酸体外诱导,能够分化为神经元样细胞。     

不同浓度EGF对人脐血间充质干细胞增殖的研究

目的探索不同浓度表皮生长因子（EGF）对人脐血间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）增殖的影响。方法无菌条件下来集正常人脐血，密度梯度离心法分离脐血单个核细胞，用Mesencult培养基进行纯化和扩增培养，通过MTT法检测不同浓度的EGF的促人脐血MSCs增殖作用。结果EGF的5—100ng／ml各浓度组增殖效应均明显大于对照组（P〈0．05），10ng／ml组明显大于其它各浓度组（P〈0．01）。结论EGF对体外培养的人脐血MSCs有促进增殖的作用，此作用呈剂量依赖性。     

影像学在诊断颈椎病中的应用

目的通过对85例颈椎病影像学资料进行分析,探讨颈椎病的影像学特征及其X线片、CT、MRI及MRA检查方法的选择原则,以便临床上对不同类型以及不同程度的颈椎病选择合适的诊断技术。方法 2005年6月2009年7月,85例均行颈椎标准X线片、CT、MRI及MRA检查,对其影像学资料进行分析。结果颈椎病以椎体及小关节增生、生理曲度改变、椎间隙变窄和局部失稳为常见X线表现,X线片、CT、MRI及MRA对颈椎病的诊断有不同的优点及限度。结论 X线片为首选检查方法 ,绝大部分可明确诊断,特殊情况加做CT、MRI或MRA检查。     

人脐带血采集数量和质量的影响因素研究

目的:探讨人脐带血采集数量和质量的若干影响因素及提高脐带血采集数量和质量的方法。方法:采集脐带血260例,分析产妇及胎儿的若干影响因素与脐血采集数量和质量的关系。结果:分娩方式、婴儿体重、胎盘娩出方式可影响脐血采集质和量(P<0.05)。另外,采集过程中的污染等也可影响脐血采集。结论:选择合适的供者和采集的方法可有效提高脐血采集数量和质量。     

腹腔镜手术治疗小儿精索静脉曲张29例

目的 :探讨腹腔镜治疗小儿精索静脉曲张 (2 9例 )的手术方法及其优越性。方法 :用腹腔镜行精索静脉高位结扎术。结果 :随访 1～ 3年 ,曲张静脉完全消失 18例 ,明显减轻 11例 ,阴囊外观基本恢复正常 ,睾丸发育良好。结论 :本法简便 ,组织创伤轻微 ,恢复快 ,是治疗小儿精索静脉曲张行之有效的方法