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目的 探讨一种简便、稳定、可重复的大鼠成年神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型的制备方法 .方法 以来自于成年Fisher344大鼠的海马神经干细胞系为研究对象,以无血清培养基培养并传代,并用nestin和DAPI免疫荧光双染确认其生物学特性.将三气培养箱氧气浓度调至1%以制备缺氧环境,将培养基换为不含葡萄糖的Earle′s平衡盐溶液,分别缺氧缺糖2h、4h、6h、8h、10h后取出细胞,恢复正常条件继续培养24 h后倒置显微镜下观察细胞形态学变化,CCK-8比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率.同时设置常氧常糖的正常对照组.结果 与正常对照组相比,缺氧缺糖2h组细胞吸光度值明显升高,细胞存活率有一定的增长,但差异无统计学意义(P>0.05).随着缺氧缺糖时间延长,神经干细胞形态学损伤逐渐加重,细胞吸光度值逐渐下降,缺氧缺糖6h后与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);缺氧缺糖6h起细胞存活率均较正常对照组明显下降,比较差异有统计学意义(P<0.05);神经干细胞凋亡率逐渐增高,且均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中缺氧缺糖6h时细胞的凋亡率已超过50%.结论 利用三气培养箱物理缺氧方法 可成功建立一种简便、有效的神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型. 相似文献
2.
①目的 研究杜仲醇提物和水提物对卡介苗-脂多糖(BCG-LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.②方法 小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,即正常对照组、模型对照组、阳性对照组、醇提组和水提组的低、中、高剂量组(40.95、81.90、163.80g生药/kg).观察杜仲提取物对小鼠肝脏组织病理学的影响.各组每天灌胃,给药容量为20mL/(kg·d),连续10天.正常组和模型组给予蒸馏水,阳性组给予联苯双酯0.60g/kg,醇提和水提组分别给予杜仲醇提物或水提物163.80、81.90、40.95g生药/kg.采用BCG-LPS造成小鼠急性肝损伤,10天后取血检测ALT、AST、SOD的活性和MDA、GSH的水平.③结果 杜仲醇提物和水提物能明显降低BCG-LPS所致的肝损伤小鼠肝脾指数的升高(P<0.05)和血清中ALT、AST活性的升高(P<0.05),亦能降低肝组织中MDA 的水平,增加肝组织中SOD的活性和GSH-PX的水平(P<0.05).肝脏组织病理学也显示联苯双酯和杜仲提取物能明显的对抗肝细胞的损伤,但杜仲水提物不如醇提物(P<0.05).④结论 杜仲醇提物具有显著的抗免疫性肝损伤的作用. 相似文献
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目的 了解广州市海珠区18岁以上社区居民脑卒中患病率及高血压、糖尿病等常见危险因素在人群中的分布.方法 2012年12月采用Kish Grid表法分层抽样后问卷调查的方法,在海珠区瑞宝社区抽取1 000人为调查对象,采用x2检验和t检验对结果进行统计分析.结果 海珠区居民脑卒中、冠心病的患病率均较2008年有明显上升(3.4% vs 1.6%,18.5%vs 4.5%),而高血压病、糖尿病、血脂异常、肥胖率和吸烟率均较2008年下降(16.2% vs 22.9%,7.0%vs 9.2%,37.9% vs 59.7%,6.2%vs 7.1%,18.2%vs 24.6%),差异有统计学意义(P<0.05).男性高血压患病率、吸烟率和饮酒率分别为20.0%、29.0%和11.2%,与女性11.9%、5.8%和5.1%相比较高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 海珠区脑卒中患病率上升呈年轻化趋势,冠心病患病率较前增高,应提倡早期对心脑血管疾病相同危险因素进行筛查并控制预防. 相似文献
4.
正本文报道1例以反复肺血栓形成起病并转为慢性血栓性肺动脉高压(chronic thromboembolic pulmonary hypertension,CTEPH)的原发性抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)病例,探讨APS患者出现CTEPH的高危因素。1病例报告患者,男性,29岁,因胸痛5月余、活动耐 相似文献
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目的了解广州市海珠区18岁以上社区居民脑卒中患病率及高血压、糖尿病等常见危险因素在人群中的分布。方法 2012年12月采用KishGrid表法分层抽样后问卷调查的方法,在海珠区瑞宝社区抽取1000人为调查对象,采用χ2检验和t检验对结果进行统计分析。结果海珠区居民脑卒中、冠心病的患病率均较2008年有明显上升(3.4%vs1.6%,18.5%vs4.5%),而高血压病、糖尿病、血脂异常、肥胖率和吸烟率均较2008年下降(16.2%vs22.9%,7.0%vs9.2%,37.9%vs59.7%,6.2%vs7.1%,18.2%vs24.6%),差异有统计学意义(P〈0.05)。男性高血压患病率、吸烟率和饮酒率分别为20.0%、29.0%和11.2%,与女性11.9%、5.8%和5.1%相比较高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论海珠区脑卒中患病率上升呈年轻化趋势,冠心病患病率较前增高,应提倡早期对心脑血管疾病相同危险因素进行筛查并控制预防。 相似文献
7.
目的 探讨不同浓度的葡萄糖对氧/糖剥夺条件下体外成年大鼠神经干细胞活力和增殖的影响。 方法 无血清培养成年Fisher 344大鼠海马神经干细胞系,用Nestin和DAPI免疫荧光双染以确认其生物学特性。将三气培养箱氧气浓度调至1%以制备缺氧环境,将培养基换为无糖Earle’s平衡盐溶液缺氧培养6 h后更换为含有不同浓度葡萄糖(7.5、17.5、27.75、41.75、83.75 mmol/L)的培养基恢复正常条件继续培养后,检测神经干细胞的活力和形态学改变。同时设置常氧常糖为正常对照组和甘露醇为渗透压对照组。 结果 CCK-8检测显示,常糖常氧正常对照组细胞吸光度值较缺氧模型组高,7.5 mmol/l糖培养组以及41.75 mmol/L和83.75 mmol/L糖培养组吸光度值均较正常糖缺氧组(17.5 mmol/L)低,差异有统计学意义(P<0.05);而27.75 mmol/L糖培养组吸光度值较正常糖缺氧组低,差异无统计学意义,且排除了高糖培养基引起的渗透压力的影响。各组细胞形态学改变与CCK-8检测结果一致。 结论 缺氧后轻度升高的糖对体外缺氧成年神经干细胞的损伤可能有保护作用,而较低浓度和更高浓度的葡萄糖则加重其损伤。 相似文献
8.
摘要:目的动态观察大鼠急性脑缺血后不同时期外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞和脑组织中Foxp3的表达,探讨其在急性
缺血性卒中病理生理演变过程中的作用。方法48 只Wistar 大鼠按随机数字表法分为缺血组和假手术组。参考改良的
Zea-Longer插线方法将缺血组大鼠制作成右侧大脑中动脉线栓脑缺血动物模型。采用流式细胞术和免疫组化染色检测造模后
1、3、7、14 d时大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞表达和脑组织中Foxp3表达,同时采用改良NSS神经功能评分观察大鼠
行为学变化。结果缺血组和假手术组大鼠神经功能缺损评分在模型制备后逐渐下降(P<0.01)。流式细胞术显示脑缺血后1、
3 d时缺血组大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞的表达与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),7、14 d时表达明显高
于假手术组(P<0.05),且与大鼠的神经功能评分呈负相关(r=-0.68,P=0.01)。免疫组化显示脑缺血后1 d时缺血组大鼠脑组织
中即可观察到Foxp3表达,且主要集中在缺血灶区域,在未缺血侧也可观察到Foxp3表达,但表达量较少,而假手术组脑组织中
未见Foxp3表达。结论CD4+ CD25+调节性T细胞参与了大鼠急性脑缺血后炎症免疫反应的发生发展过程,且在脑缺血后1 d
时便开始参与脑缺血性损伤的免疫调节,这种免疫调节对脑细胞有着保护作用。
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缺血性卒中病理生理演变过程中的作用。方法48 只Wistar 大鼠按随机数字表法分为缺血组和假手术组。参考改良的
Zea-Longer插线方法将缺血组大鼠制作成右侧大脑中动脉线栓脑缺血动物模型。采用流式细胞术和免疫组化染色检测造模后
1、3、7、14 d时大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞表达和脑组织中Foxp3表达,同时采用改良NSS神经功能评分观察大鼠
行为学变化。结果缺血组和假手术组大鼠神经功能缺损评分在模型制备后逐渐下降(P<0.01)。流式细胞术显示脑缺血后1、
3 d时缺血组大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞的表达与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),7、14 d时表达明显高
于假手术组(P<0.05),且与大鼠的神经功能评分呈负相关(r=-0.68,P=0.01)。免疫组化显示脑缺血后1 d时缺血组大鼠脑组织
中即可观察到Foxp3表达,且主要集中在缺血灶区域,在未缺血侧也可观察到Foxp3表达,但表达量较少,而假手术组脑组织中
未见Foxp3表达。结论CD4+ CD25+调节性T细胞参与了大鼠急性脑缺血后炎症免疫反应的发生发展过程,且在脑缺血后1 d
时便开始参与脑缺血性损伤的免疫调节,这种免疫调节对脑细胞有着保护作用。
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9.
背景:异体皮质干燥异体骨为多孔状结构,孔均匀且相互贯通,孔径200μm左右,在形态结构上与人类无机骨极为相似。目的:观察应用骨形态发生蛋白-骨髓间充质干细胞-异体皮质人工骨复合物治疗骨折不愈合及骨缺损的临床效果。方法:选择33例创伤性骨缺损患者,其中男19例,女14例;年龄26-85岁。首先提取患者自体骨髓间充质干细胞,进一步以异体皮质人工骨为支架材料,同时导入骨形态发生蛋白和骨髓间充质干细胞,通过人工合成方式制成骨形态发生蛋白-骨髓间充质干细胞-异体皮质人工骨复合物,植入骨缺损处,每例植入人工骨复合物20-45 g。结果与结论:随访6个月-2.5年,根据Mankin及Komender等对同种异体骨移植结果的评分标准,满意32例,不满意1例。复查X射线片示32例达骨性愈合,其中新鲜骨折愈合时间2-7个月,陈旧性骨折愈合时间4-9个月。同种异体松质骨6-9周开始与自体骨融合爬行替代。1例感染性骨缺损移植后迟发性感染,去除内固定及同种异体骨,置管冲洗、局部稳定后再次植骨愈合,随访2年1个月骨感染未复发;1例钢板松动致骨折未愈合,再次行内固定、自体骨移植后骨折愈合。表明应用骨形态发生蛋白-骨髓间充质干细胞-异体皮质人工骨复合物治疗骨折不愈合及骨缺损无明显不良反应,修复效果良好。 相似文献
10.
目的 探讨不同类型体力活动与缺血性脑卒中的关系.方法 运用病例对照研究的方法,将146例缺血性脑卒中患者作为病例组,156名非脑血管疾病居民作为对照组,运用多因素非条件Logisitic回归模型分析不同类型体力活动与缺血性脑卒中的相关性.结果 多因素非条件Logistic回归分析提示,与闲暇时间体力活动不活跃居民比较,闲暇时间体力活动活跃居民的OR=0.042(95%CI:0.011~0.158),与交通行程体力活动不活跃居民比较,交通行程体力活动活跃居民的OR=0.181(95%CI:0.061~0.534).结论 在该调查人群中闲暇时间体力活动、交通行程体力活动可能与缺血性脑卒中相关. 相似文献