山东省1970～2005年白血病死亡率及其变化趋势

目的分析山东省1970～2005年白血病的死亡率和变化趋势。方法收集1970～1974年、1985～1989年、1990～1992年和2004～2005年山东省全死因死亡回顾调查资料,计算死亡率和世界人口标化死亡率,采用Joinpoint回归模型分析变化趋势。结果 4个时期白血病死亡率分别为1.97/10万、3.63/10万、3.96/10万和4.36/10万,其中男性分别为2.20/10万、4.05/10万、4.25/10万和4.86/10万,女性分别为1.73/10万、3.19/10万、3.66/10万和3.85/10万。男女各个年龄组的白血病死亡率都呈上升趋势;其中5～岁以下有一小高峰,而60～岁开始增速增加,到80～岁达到最高峰。1970～1992年白血病死亡率上升幅度比较大,校正资料缺失年后,年均上升3.546%,有统计学差异;而1992年后上升幅度比较小,年均上升0.445%,无统计学差异。按抽样的县市分析,在工业经济发展比较快的地方白血病死亡率上升幅度大。结论在过去35年中山东白血病死亡率呈缓慢上升趋势。     

肝脾γδT细胞淋巴瘤一例并文献复习

 目的　分析肝脾γδT细胞淋巴瘤（HSTCL）的病因、诊断、治疗及预后。方法　分析1例HSTCL患者的临床诊疗经过并复习相关文献。结果　该例患者通过脾脏切除病理学确诊,给予DVLD方案（脂质体多柔比星+硼替佐米+左旋门冬酰胺酶+地塞米松）化疗,疗效待评估。结论　HSTCL临床罕见,诊断困难,预后极差,尽早给予高强度化疗联合造血干细胞移植为一种疗效较好的治疗手段。     

树突状细胞体外高效诱导白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞生成

[目的]研究体外诱导产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及其抗白血病反应.[方法]应用mGM-CSF及mIL-4细胞因子从小鼠骨髓细胞扩增出成熟树突状细胞(DC),使其负载冻融法制备的白血病细胞相关抗原(TAA),通过观察DC诱导的白血病特异性CTL的免疫表型,MTT分析其对于L7212细胞的抑制率,利用ELISA评价IL-2和IL-4水平.[结果]骨髓单个核细胞经mGM-CSF、mIL-4的联合作用7天后光镜及扫描电镜下观察到大量成熟DC生成.经负载TAA的DC活化后T细胞中CD3 、CD8 、CD25 细胞明显增多.FCM显示CD3 、CD8 、CD25 T细胞显著增多,CD8 细胞多于CD4 细胞.活化后T细胞对L7212细胞有特异性杀伤活性,在效靶比为50:1培养72 h后杀伤率达90.1%±2.7%.DC与T细胞共培养上清中IL-2的分泌水平为4.656±0.62pg/ml,明显高于普通T细胞培养组的1.436±0.11pg/ml(P=0.011),IL-4水平则无明显变化(P＞0.05).[结论] mGM-CSF及mIL-4配伍诱导生成的DCs经L7212冻融抗原负载后可在体外高效诱导白血病特异性CTL生成.     

树突细胞应用于荷白血病小鼠免疫治疗的实验研究

目的探讨白血病抗原活化的树突细胞(DC)应用于荷白血病小鼠异基因骨髓移植 (allo-BMT)后免疫治疗的可行性及有效性。方法应用mGM-CSF及mIl-4从小鼠骨髓细胞扩增出成熟DC,使其负载经冻融法制备的L7212白血病细胞相关抗原。将进行allo-BMT后的荷白血病小鼠分 A(对照组)、B(T细胞组)、C(DC T细胞组)三组进行免疫治疗,观察小鼠生存率、生存期、移植物抗宿主病(GVHD)发生等情况及血清细胞因子水平和脾细胞细胞毒活力变化。对各组长期生存小鼠行二次攻击,以观察其体内抗白血病免疫能力。结果小鼠骨髓单个核细胞经mGM-CSF、mIL-4联合作用7 d可生成大量成熟DC。B、C二组复发率分别为30％及0％,移植后长期生存率分别为30％及 70％,两组差异均有统计学意义(P<0．05),而GVHD发生率差异无统计学意义。两组平均生存时间分别为(32．95±13．29)d、(41．15±13．88)d,差异有统计学意义(P<0．01)。MYT法检测发现C组小鼠脾细胞对L7212细胞产生特异性杀伤作用;EIJSA法检测显示血清中Th1类因子IL-2水平为 (419．75±26．66)pg／ml,明显高于其他两组(P<0．01)。二次攻击后B、C二组生存率分别为33．3％及85．7％,差异有统计学意义(P<0．05)。结论肿瘤抗原负载的DC联合供者淋巴细胞输注是增强 allo-BMT后移植物抗白血病效应、减少白血病复发的有效手段。     

不明原因发热124例临床分析

目的 探讨长期不明原因发热(FUO)的病因构成及临床诊断思路.方法 回顾性分析2009年7月至2011年1月符合长期不明原因发热诊断标准的住院患者124例临床资料.结果 124例患者最终确诊120例,确诊率为96.8％,其中感染性疾病62例(包括细菌感染54例,病毒感染6例,真菌感染2例)占51.7％,风湿免疫病37例,占30.8％,恶性疾病12例,占10％.结论 感染性疾病是发热原因待查的主要病因,其次为风湿免疫病和恶性疾病.     

鼠尾草酸逆转K562/A02细胞多药耐药的机制研究

Objective To investigate the effects of carnosic acid(CA)on reversal of the muhidrug resistance(MDR)of human leukemia cell line K562/A02 and its mechanism.Methods MTT assay was used to determine the sensitivity of K562/A02 cells to adriamycin(ADM)pre-and post-treated with CA.Flow cytometry(FCM)and laser scanning confocal microscopy(LSCM)were used to measure intracellular fluorescence intensity and concentration of ADM respectively.The expression level of mdr1 was detected by semi-quantitative RT-PCR.P-glycoprotein(P-gp)expression was detected by FCM and Western blot.Resuits CA decreased,IC50 of ADM in K562/A02 cells from 16.31 μg/mL to 1.35μg/mL,being a 12.08fold decrease.The intracellular ADM fluorescence intensity of K562/A02 was increased from 17.05 t0 60.53after treated with CA(P<0.01).In living K562/A02 ceils,after treated with CA,the diffuse distribution of intracellular ADM was recovered in both nuclear and cytoplasm,and the concentration of intracellular ADM increased from 4.93μg/mL to 15.43μg/mL.RT-PCR assay showed that CA inhibited the expressions of mdr1 mRNA in K562/A02 cells(P<0.01).Mean fluorescence intensity of P-gp detected by FCM in CA-treated K562/A02 was decreased to 22.80 as compared with that in untreated K562/A02 cells(44.40,P<0.05).Conclusion CA can reverse the MDR of K562/A02 cells in vitro.The mechanism may be associated with down-regulation of mdr1 and inhibition of P-gp function.     

鼠尾草酸逆转K562/A02细胞多药耐药的机制研究

Objective To investigate the effects of carnosic acid(CA)on reversal of the muhidrug resistance(MDR)of human leukemia cell line K562/A02 and its mechanism.Methods MTT assay was used to determine the sensitivity of K562/A02 cells to adriamycin(ADM)pre-and post-treated with CA.Flow cytometry(FCM)and laser scanning confocal microscopy(LSCM)were used to measure intracellular fluorescence intensity and concentration of ADM respectively.The expression level of mdr1 was detected by semi-quantitative RT-PCR.P-glycoprotein(P-gp)expression was detected by FCM and Western blot.Resuits CA decreased,IC50 of ADM in K562/A02 cells from 16.31 μg/mL to 1.35μg/mL,being a 12.08fold decrease.The intracellular ADM fluorescence intensity of K562/A02 was increased from 17.05 t0 60.53after treated with CA(P<0.01).In living K562/A02 ceils,after treated with CA,the diffuse distribution of intracellular ADM was recovered in both nuclear and cytoplasm,and the concentration of intracellular ADM increased from 4.93μg/mL to 15.43μg/mL.RT-PCR assay showed that CA inhibited the expressions of mdr1 mRNA in K562/A02 cells(P<0.01).Mean fluorescence intensity of P-gp detected by FCM in CA-treated K562/A02 was decreased to 22.80 as compared with that in untreated K562/A02 cells(44.40,P<0.05).Conclusion CA can reverse the MDR of K562/A02 cells in vitro.The mechanism may be associated with down-regulation of mdr1 and inhibition of P-gp function.     

腺病毒介导MOMP基因转染对树突状细胞免疫功能的影响

目的 探讨腺病毒(Ad)介导E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因转染对树突状细胞(DC)的表型及体内免疫功能的影响.方法 用小鼠重组粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白细胞介素4(IL-4)从小鼠骨髓干细胞中诱导培养DC,并用大肠杆菌脂多糖(LPS)促进DC的成熟,流式细胞仪检测DC表型.用不同感染滴度(MOI)的含增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组Ad转染DC,荧光显微镜下观察EGFP的表达细胞百分率,选择最佳MOI;用最佳MOI的含MOMP基因的重组腺病毒(Ad-MOMP)转染DC,流式细胞术检测转染前后DC表型变化,并用活细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力;ELISA检测转染前后DC分泌细胞因子及DC、T细胞共同培养上清中细胞因子的水平.Ad-MOMP转染DC经尾静脉免疫小鼠,ELISA检测其脾脏淋巴细胞分泌的细胞因子.结果 诱导的DC形态典型,表面高表达CD11c、MHCⅡ类分子,中度表达CD80分子.MOI=1000为重组Ad转染DC最佳滴度,此时90%以上的DC表达荧光,Ad-MOMP转染DC后能检测到MOMP的表达.Ad-MOMP转染对DC表面的特征性表型CD11c无影响,而CD80及MHCⅡ表达上调;转染后的DC分泌大量IL-12,具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,并刺激T细胞分泌大量IFN-γ.Ad-MOMP转染DC后尾静脉免疫小鼠,其脾细胞产生高水平的IFN-γ.结论 Ad载体能介导外源MOMP基因在DC中的表达,Ad-MOMP转染DC后MOMP基因的表达能增强DC抗原提呈功能,促进DC活化,转染后的DC与T细胞共孵育能诱导T细胞向TH1细胞分化,体内实验表明Ad-MOMP转染DC能诱导衣原体特异性TH1反应.这为Ad-MOMP转染的DC疫苗用于免疫治疗提供了理论依据和技术基础.     

急性白血病患者血清中VEGF水平与临床关系的研究

目的:探讨急性白血病患者血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的水平与临床的关系及血管新生在急性白血病发病中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA方法测定急性白血病患者血清中的VEGF。结果:急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)患者血清中VEGF的水平与正常对照相比,明显增高(P=0.0003)。处于完全缓解期的ANLL患者仍有较高的VEGF分泌。急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清VEGF水平虽比正常对照增高,但无统计学意义(P=0.067),其分泌量与ANLL患者相比,明显减低(P=0.001)。结论:ANLL患者存在着血管新生,VEGF在其发病机制中可能起着重要的作用。