肾阳虚大鼠肾组织中microRNA差异性表达与信号通路分析

目的:采用基因芯片检测腺嘌呤造模诱导肾阳虚证大鼠肾组织中显著差异表达的小分子核糖核酸(miRNA),并用生物信息学方法分析其意义。方法:模型组大鼠灌胃150 mg·kg-1腺嘌呤诱导肾阳虚肾损伤模型,正常组灌服等量生理盐水。麻醉处死后取部分肾组织病理切片做苏木素-伊红(HE)染色并检测血液中血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)的含量,尿液中24 h尿蛋白(24U-TP)含量; trizol法提取肾脏组织中RNA,RNA经检测质量合格后用于后续芯片分析。μParaflo微流体芯片分析肾组织中差异表达的miRNA;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进一步验证芯片结果;利用生物信息学网站分析差异表达miRNA的靶基因及其功能。结果:基因芯片结果显示造模后共有50个miRNA差异表达,与正常组比较,模型组只有9个miRNA在肾组织中高表达且具有显著性差异,其中,与正常组比较,模型组中rno-miR-21-5p,rno-let-7i-5p,rno-miR-146b-5p和rno-miR-15b-5p表达明显升高(P0.05,P0.01); rno-miR-6215,rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p和rno-miR-194-5p表达明显降低(P0.05)。经PCR验证表明,与正常组比较,rno-miR-21-5p,rno-miR-146b-5p表达显著上升(P0.01); rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p,rno-miR-194-5p表达显著下降(P0.01)。其中,miR-192,miR-21,miR-378与上皮细胞-间充质转化/间充质-上皮细胞转化(EMT/MET)平衡相关,miR-192和miR-378可作为抗纤维化因子保护肾脏,而miR-21可作为促纤维化因子诱导肾脏损伤。miR-194可通过靶向调控脑Ras同源蛋白(Rheb)拮抗缺氧再灌注诱导的人肾近端肾小管上皮细胞HK-2损伤。这些差异miRNA的靶基因主要富集在Wnt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上。这两条信号通路与EMT/MET平衡密切相关。结论:通过基因芯片表达谱,发现4个参与肾间质纤维化(RIF)作用调节和2个未知功能miRNA表达。为进一步深入分析肾阳虚的调控网络提供了一个新的线索。     

甘麦大枣汤的制备方法研究简释

甘麦大枣汤 ,为《金匮要略》方。主治妇人脏躁 ,屡试屡爽 ,现代医学证明其具有一定的抗抑郁作用。为了保证临床疗效 ,本文对其进行提取方法与提取工艺的研究。1　材料与试剂试　药　甘草 (GlycyrrhizauralensisFisch )、小麦 (FructusTriticiAestivi)、大枣 (ZiziphusjujubaMill) 均购自金华市医药站药材公司 ,利血平 (reserpine) 注射液 (上海医科大学红旗制药厂产品 ,批号 2 0 0 0 0 5 0 3) ;氯丙咪嗪 (clomipramine) 。动　物Wistar大鼠 ,昆明种小鼠均由浙江中医学院实验动物中心提供。2　方法与结果提取方法的研究　供试液的制备　…     

肾气丸对肾阳虚大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的调节作用初探

目的:探讨肾气丸对肾阳虚证模型大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的调节作用.方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、肾阳虚模型组、肾气丸组、附桂组.采用肌内注射氢化可的松制备肾阳虚模型,造模同时给予治疗药物,并观察大鼠一般状况与体征.连续给药20天后,检测下丘脑TRH、血清TSH、T3、T4的含量.结果:模型组大鼠出现体重增长缓慢、尿量增加、自主活动减少、抓取反应迟钝等表现,下丘脑TRH、血清T3、T4含量下降,血清TSH含量上升;经肾气丸干预后,体征和生化指标均得到改善.结论:肾气丸能改善肾阳虚证引起的下丘脑—垂体—甲状腺轴的功能紊乱.     

神经病理性疼痛的受体机制研究进展

神经病理性疼痛是一类治疗难度非常大的慢性疼痛,由于其发病机制尚未完全阐明,目前尚缺乏理想的治疗药物。以往研究显示,神经病理性疼痛与阿片受体、NMDA受体等有关,现阶段又发现多种受体参与了神经病理性疼痛的病理生理过程。该文综述了嘌呤与嘧啶受体、GABA受体、PAF受体等在神经病理性疼痛发病机制中的作用。     

安吉白茶茶多酚对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用研究

目的:探讨安吉白茶茶多酚对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用。方法:72只雄性ICR小鼠随机分为正常组、D-半乳糖模型组、安吉白茶茶多酚低、中、高剂量组,Vc组。除正常组外,余组采用腹腔注射D-半乳糖建立衰老小鼠模型。在造模的同时,给药组分别灌胃相应浓度药物;正常组和模型组每天灌胃等量的生理盐水。连续给药35天后称体重,摘眼球取血,分离血清并测定脏器指数;测定血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:模型组较正常组小鼠体重增量及部分脏器指数显著降低(P0.01),脑组织和血清中MDA含量显著升高,SOD活性显著降低(P0.01);与模型组比较,安吉白茶茶多酚各剂量组小鼠肾脏和脾脏的脏器指数显著性增加(P0.01);各剂量组血清和高剂量组脑组织SOD活性显著增高(P0.01);各剂量组脑组织和中、高剂量组血清中MDA含量显著降低(P0.01),提示安吉白茶茶多酚有良好的抗氧化作用。结论:安吉白茶茶多酚中、高剂量组能够提高D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力,其机理可能与抑制体内脂质过氧化物的生成,增强抗氧化酶的活性有关。     

基于Box-Behnken设计-响应面法优化蜜麦麸的制备工艺

目的采用Box-Behnken响应面法优化蜜麦麸的制备工艺。方法根据《浙江省中药炮制规范》(2015版)中蜜麦麸制备方法,通过单因素试验筛选影响蜜麦麸制备工艺的关键因素,以麸皮与炼蜜比例、加热温度、加热时间为考察因素,蜜麦麸含水量、堆积密度和色度及阿魏酸含量的总评归一值作为综合指标,利用Box-Behnken设计-响应面法优选蜜麦麸制备工艺,并进行预测分析及工艺验证。结果蜜麦麸最刘制备工艺为麸皮与炼蜜比例为10∶3,加热温度为90℃,加热时间为90 s;含水量、堆积密度、色度、阿魏酸含量均符合蜜麦麸要求,综合指标平均值为0.676 0,与预测值(0.692 7)相对误差为2.41%,相对误差较小。结论优选的制备工艺稳定可靠,且简单可行,适用于蜜麦麸的制备应用。     

浙麦冬与川麦冬的比较研究进展

麦冬是百合科植物麦冬的干燥块根,具有滋阴生津、润肺止咳的作用。目前市场上销售的麦冬以浙麦冬和川麦冬为主。浙麦冬因种植周期长、产量小、价格高导致市场占有率低于川麦冬。为了区别浙麦冬和川麦冬,文章综合阐述了两种麦冬的历史沿革、生物学、种植、产地加工与炮制、化学成分、药理作用和色谱方面的差异。建议《中华人民共和国药典》中将浙麦冬和川麦冬分列,保护优质浙麦冬种质资源,加大对浙麦冬的推广种植和应用,振兴浙麦冬产业。     

肾气丸对肾阳虚证大鼠水液代谢紊乱的调控作用

目的：明确肾气丸对肾阳虚证大鼠水液代谢紊乱的调控作用,初步探索其作用机制。方法：将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾气丸低剂量组和肾气丸高剂量组,每组10只。模型组及给药组给予200 mg·kg^-1·d^-1腺嘌呤悬浊液连续灌胃20 d,其中两给药组从实验第15天开始,连续灌胃1.5、3.0 g/kg肾气丸14 d。观察大鼠一般状况、症状体征(体质量、肛温、饮水量、尿量、脱毛、拱背、蜷缩及抓取激惹反应);收集大鼠24 h尿液,Elisa法测定17羟皮质类固醇(17-OHCS)含量;心脏取血,取小鼠下丘脑、肾髓质组织并匀浆,全自动生化仪测定大鼠肾功能指标,Elisa法测定血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)含量,下丘脑血管加压素(AVP)、促肾上腺皮质激素释放因子(CRH)含量,血管加压素V2受体(V2R)、糖皮质激素受体-α(GCR-α)、水通道蛋白2(AQP2)、环磷酸腺苷酸(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含量。HE和Masson染色观察肾组织变化。结果：与模型组比较,肾气丸高剂量组能显著提高大鼠体质量(第21、28天...     

银杏叶提取物药理作用研究新进展

主要综述近5年银杏叶提取物药理作用研究的新进展。     

黄氏愈伤贴抗炎镇痛作用的研究

目的 研究黄氏愈伤贴的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿脓实验、蛋清致大鼠足肿胀实验,观察该药的抗炎作用;采用小鼠醋酸扭体实验、小鼠热板实验,观察该药的镇痛作用．结果 黄氏愈伤贴低、高剂量对二甲苯所敛小鼠耳廓肿胀、10％蛋清注射引起大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用,均能显著延长小鼠的痛觉反应时间,高剂量黄氏愈伤贴对醋酸致小鼠扭体反应有明显的抑制作用。结论 黄氏愈伤贴具有显著的抗炎、镇痛作用。