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1.
目的通过分析TCR Vβ基因片段选择性扩增,了解白血病患者异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞的免疫重建及其在移植物抗宿主病(GVHD)患者中的表达特点.方法采用RT-PCR扩增10例移植后患者外周血的单个核细胞的TCR Vβ 24个基因片段,分析其TCR Vβ基因的表达情况,GVHD患者的PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性.结果经24个Vβ引物所分别进行的RT-PCR检测TCR Vβ各亚家族基因的表达情况,发现 10例病人外周血与正常人表达24个Vβ亚家族有明显的不同,病人的部分Vβ亚家族T细胞仍未能重建,仅表达5~22个亚家族基因;9例GVHD患者外周血仅表达2~8个TCR Vβ亚家族,其中7例均表达Vβ3.对6例GVHD患者的基因扫描显示,均存在克隆性T细胞生长.结论移植后病人外周血淋巴细胞TCR Vβ基因片段部分受抑制,部分基因片段呈选择性扩增.GVHD患者有Vβ3和Vβ8基因的优势表达,并有克隆性T细胞生成. 相似文献
2.
CML患者CD4+和CD8+T细胞的TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4^+和CD8^+T细胞中TCR Vβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性.方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4^+和CD8^+细胞TCR Vβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性.结果:CML患者外周血CD4^+和CD8^+细胞分别表达部分(1~21个)Vβ亚家族,均以Vβ13的表达率最高,其次为Vβ9,多数患者的一些Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖,主要出现于CD8^+细胞中,分别以Vβ21(CD4^+)和Vβ11(CD8^+)亚家族的克隆性增殖多见.结论:CML患者外周血CD4^+和CD8^+细胞的TCR Vβ谱系均存在限制性分布,患者存在的克隆性增殖CD4^+和CD8^+T细胞可能与宿主抗CML抗原反应有关,它们可能在抗CML效应中起主要作用. 相似文献
3.
CD3ζ链基因在脐带血T细胞及其CD4+和CD8+T细胞亚群中的表达特点 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 了解脐带血T细胞及其CD4 和CD8 T细胞亚群的信号传导分子CD3ζ基因的表达特点.方法 采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测60例脐带血单个核细胞和12例纯化脐带血CD4 及CD8 T细胞的CD3ζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3ζ基因相对mRNA表达量,60例健康成人作为对照.并根据荧光定量PCR熔解曲线特点和序列分析了解CD3ζ基因突变情况.结果 全部脐带血和健康成人外周血单个核细胞均表达CD3ζ基因,不同个体CD3ζ基因表达量有所差异,脐带血T细胞CD3ζ基因相对mRNA表达量为6.7%±5.56%,CD4 和CD8 T细胞的CD3ζ基因相对mRNA表达量分别为6.74%±2.0%和6.88%±1.76%,三者CD3ζ基因表达量均明显高于健康成人(P=0.000,P=0.034,P=0.000).序列分析结果显示尚未发现国外文献所报道的ζ链剪接异构体.结论 本研究率先报道了脐带血T细胞及其CD4 和CD8 T细胞亚群的CD3ζ基因mRNA的表达水平,为进一步了解脐带血T细胞免疫学特点提供新的基础资料. 相似文献
4.
目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR邯亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCR Vβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ 14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。 相似文献
5.
肺癌组织培养液和病人血清对自身T细胞集落形成能力的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
本文观察了10例肺癌病人围术期的肺癌组织、正常肺组织培养液和血清对自身外周血T细胞集落形成能力的影响,并以14例正常人的血清作为对照。结果显示:肺癌人病在去肿瘤负荷前T细胞集落产率为160.73±124.02/10~5,故低于正常人的397.81±133.89/10~5(P<0.001),也低于去肿瘤负荷后的(P<0.001)306.53±79.86/10~5(P<0.001)。术前病人的血清对T细胞集落的抑制率为46.97±21.42%,术后则下降至27.63±23.25%(P<0.01)。加进肺癌组织培养液时,病人的T细胞集落产率为224.83±104.05/10~5,正常肺组织培养液则为323.12±125.27/10~5(P<0.001),肺癌组织培养液和病人血清两者对T细胞集落产率的抑制性呈正相关关系(r=0.817,P<0.005)。本研究结果认为,肺癌组织能产生细胞免疫抑制物质进入血循环,导致病人T细胞集落形成能力明显下降。手术根治性切除肺癌组织,能有效地解除T细胞集落形成能力受抑制的情况。 相似文献
6.
目的探讨脐带血和健康成人外周血TCR Vγ和Vδ基因谱系的分布情况及克隆性特点。方法利用RT-PCR法检测16例脐带血和10例健康成人外周血单个核细胞TCRVγ(Ⅰ~Ⅲ)和Vδ(1~8)各亚家族的表达,了解各亚家族的分布和利用情况;阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析其CDR3长度,了解T细胞的克隆性。2例成人胸腺组织作为对照。结果脐带血T细胞的Vγ基因表达主要集中在VγⅠ和VγⅡ,而Vδ基因则平均表达(4.63±1.03)个亚家族,主要集中在Vδ1、2、3、8中表达。健康成人外周血T细胞除了1例不表达VγⅢ之外,其余均表达全部Vγ基因,而在Vδ基因中则平均表达(3.6±0.52)个亚家族,并以Vδ1、2和3为多见,Vδ4和Vδ5未能在外周血中检测到,而Vδ5和Vδ8的表达则明显低于脐带血(P=0.009,P=0.001);2例成人胸腺组织表达除Vδ4和Vδ6之外的其他Vγ和Vδ亚家族。基因扫描显示16例脐带血中有1例在VγⅠ和5例分别在Vδ2、Vδ4和Vδ6中出现寡克隆性,10例成人外周血中有9例在不同亚家族中出现克隆性T细胞,其余均呈多克隆性。结论脐带血TCRVγ和Vδ亚家族T细胞和健康成人外... 相似文献
7.
目的 了解粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对髓系白血病细胞增殖的影响。方法 采用甲基纤维素半固体培养法培养白血病细胞集落(CFU-L),观察G-CSF和GM-CSF对11例AML和CML患者外周血CFU-L形成的影响。结果 CM-CSF对CFU-L的促进作用明显高于G-CSF(P=0.012),而G-CSF对CFU-L形成影响与对照组没有显著性差别(P=0.495)。结论 G-CSF对髓系白血病细胞体外增殖无明显影响,作为髓系白血病大剂量化疗的支持治疗可能更为安全。 相似文献
8.
9.
目的 研究反义寡核苷酸对Burkitt’s淋巴瘤Daudi细胞α2 ,6 唾液酸转移酶 (ST6GalI)的活性和细胞表面α2 ,6 唾液酸水平的下调作用。方法 以修饰后的ST6GalI的反义寡核苷酸处理Daudi细胞 ,以RT PCR检测Daudi细胞ST6GalImRNA的表达 ,荧光定量法测定ST6GalI的活性及以流式细胞仪检测细胞表面α2 ,6 唾液酸的含量。结果 和对照组比较 ,以反义寡核苷酸处理的Daudi细胞ST6GalImRNA的表达下调 ,ST6GalI酶活性下降 ,并导致细胞表面α2 ,6 唾液酸水平降低。结论 反义寡核苷酸可有效降低Daudi细胞表面α2 ,6 唾液酸化水平 ,内源性减少α2 ,6 唾液酸对Daudi细胞CD2 2受体的屏蔽作用 相似文献
10.
目的推介检测分析T细胞克隆性增殖的新方法,探讨判别恶性肿瘤免疫状态的新途经。方法应用RT-PCR检测T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族的互补决定区3(CDR3)长度,并经基因扫描(genescan)分析检测3例多毛细胞白血病(HCL)和1例普通型急性淋巴细胞白血病(c-ALL)病人外周血的T细胞克隆性。结果4例病人的部分Vβ家族的扩增产物出现单峰(单克隆)或—主峰(寡克隆)图像,而正常对照的全部PCR产物呈多峰(多克隆)图像。结论HCL和c-ALL病人外周血中存在克隆性生殖T细胞,可能是宿主对白血病抗原的一种直接反应。该特点可作为微小残留病变(MDR)的检测指标 相似文献