干扰SET8调节血管平滑肌细胞增殖、凋亡促进血管钙化

背景与目的血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡在许多血管钙化疾病的病理过程中起关键作用。近期研究表明,赖氨酸甲基转移酶SET8参与调节细胞增殖、凋亡过程。文章旨在探寻SET8是否通过调节VSMC增殖、凋亡而影响血管钙化。方法体外培养原代大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组和SET8-shRNA组。以脂质体Lipofectamine~(TM)2000为载体,转染VSMC。采用茜素红染色法和钙含量测定法判断细胞钙化程度;采用MTT法检测三组细胞的增殖能力;实时荧光定量PCR、Western blot法检测三组细胞中增殖基因Survivin和凋亡基因Caspase-3的表达水平,分析干扰SET8对VSMC增殖、凋亡及其相关基因和蛋白表达的影响。结果 (1)干扰SET8可成功抑制VSMC中SET8蛋白的表达(P0.05)。(2)转染VSMC后,与正常对照组和空质粒组比较,SET8-shRNA组钙含量明显升高(P0.05)。(3)MTT结果显示,在第12 h、24 h、36 h、48 h,SET8-shRNA组VSMC的增殖能力较正常对照组和空质粒组明显降低(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示SET8-shRNA组Survivin的mRNA和蛋白表达较正常对照组和空质粒组明显下降,而Caspase-3的mRNA和蛋白表达则相反(P0.05)。结论干扰SET8能够增加促凋亡基因表达,抑制增殖基因表达,SET8有可能参与调节大鼠血管钙化。     

肾癌中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2的表达及其与E-钙黏蛋白、微血管密度的关系

目的 探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(Eph A2)在肾癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成、E-钙黏蛋白的关系.方法 利用免疫组织化学法检测肾癌组织68例、正常肾组织24例中EphA2、E-钙黏蛋白的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).分析EphA2、MVD、E-钙黏蛋白与肾癌临床病理特征的关系及其的相关性.结果 肾癌组织中EphA2阳性表达及MVD明显高于正常肾组织,E-钙黏蛋白阳性表达明显低于正常肾组织(均P＜0.01).EphA2在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P＜0.01或＜0.05);MVD在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组的表达亦显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(均P＜0.01);MVD值还与肿瘤直径有关(均P＜0.01);E-钙黏蛋白在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著低于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P＜0.01或＜0.05);Spearman等级相关分析表明,EphA2蛋白表达与MVD呈显著正相关(r=0.555,P＜0.01),与E-钙黏蛋白蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.483,P＜0.01).结论 EphA2蛋白的高表达预示肿瘤恶性程度的增加,其机制可能通过影响或协同E-钙黏蛋白和微血管生成来实现的.     

在线血容量监测在血液透析中的应用

在血液透析患者中,容量超负荷(volume overload,VO)与透析患者的高血压直接相关[1],而高血压又直接导致透析患者的心血管疾病的高发病率和高病死率.VO定义为任何超出正常或干体质量状态的水钠潴留.因此,在长期维持性血液透析过程中,清除患者体内多余的水分,恢复正常容量状态,即保证患者达到"干体质量"状态,成为血液透析的重要目的之一.但在透析过程中评估并达到患者干体质量仍然是困难的,因为在特定患者缺少可靠的诊断标准来决定该患者是否已达到干体质量[2].在线血容量监测是无创、使用简便的监测相对血容量(relatively blood volume,RBV)方法,可以在透析过程中非侵人性的监测RBV的变化,可以通过个体化的血容量域值的获得从而获得干体质量并预防低血压等并发症的发生[3].     

连续无创血流动力学监测在连续性血液净化中的作用

目的：探讨连续无创血流动力学监测在连续性血液净化（ CBP）护理治疗中的指导作用。方法将70例行CBP治疗患者,随机分为两组,每组35例。对照组于CBP治疗前和治疗后均进行一次无创血流动力学监测,观察组给予连续无创血流动力学监测,每4h监测1次,统计分析两组患者并发症的发生率和容量状态达标率。结果观察组并发症的发生率显著低于对照组,观察组的容量状态达标率显著高于对照组,差异均有统计学意义（ P＜0.05）。结论在CBP治疗中,通过连续无创血流动力学监测,便于观察患者血流动力学的动态改变,为早期护理治疗干预提供可靠依据,从而减少治疗过程中并发症的发生。     

甲状旁腺全切加前臂自体移植治疗慢性肾功能衰竭患者继发性甲状旁腺功能亢进的疗效观察

继发性甲状旁腺功能亢进(甲旁亢)是慢性肾功能衰竭行维持性血液透析患者的严重并发症之一.临床上可表现为皮肤瘙痒、异位钙化、骨痛等.本文对我科因继发性甲旁亢而行甲状旁腺全切加自体前臂移植术8例患者的术后疗效进行分析,探讨上述方法在治疗继发性甲旁亢中的作用.     

连续性血液净化中抗凝药物两种应用方法对滤器凝血影响的探讨

随着连续性血液净化技术不断地更新和完善,临床应用范围日益扩大,为脓毒症及多器官功能障碍综合征等重症患者救治提供了非常重要的、赖以生存的稳定内环境,成为多脏器功能障碍综合征和危重病症救治的重要手段[1].目前连续性血液净化治疗操作无统一标准,如何降低治疗操作过程中由于人为因素,技术因素导致滤器管路功能丧失,也是本研究的主要目的.我们意在探索连续性血液净化药物不同浓度应用对滤器凝血时间的影响,目前此项研究较少,本课题通过研究不同药物浓度对滤器凝血时间之间的关系并对其干预将会对血液净化的治疗有一定意义.     

临床护理路径在肾脏穿刺活检术患者健康教育中的应用

肾脏穿刺活组织检查（简称肾活检）是B超引导经皮肤穿刺取肾活体组织的检查。临床可根据肾组织的病理检查进行分型诊断并确定治疗措施,以改善患者的预后,降低药物的副作用,为提高疗效提供科学的依据。     

维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究

目的 探讨维拉帕米抑制高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化的作用及可能机制。方法 2014年12月-2015年6月选取5～8周龄清洁级健康雄性SD大鼠6只,体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫组化法鉴定。将对数期VSMCs随机分为正常对照组〔含10%胎牛血清（FBS）培养基〕、高磷组（高磷培养基,含10 mml/L β-甘油磷酸）、维拉帕米干预组（在高磷培养基的基础上加入维拉帕米至浓度为20 mmol/L）。细胞接受2、4、6 d干预后,检测VSMCs内钙离子水平,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测VSMCs内目的基因（smad1、runx2 mRNA）表达水平。细胞接受14 d干预后进行钙化检测,包括钙水平测定和茜素红染色情况。结果 高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均高于正常对照组（P＜0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均低于高磷组（P＜0.05）。高磷组、维拉帕米干预组4、6 d后VSMCs内钙离子水平分别高于2 d后（P＜0.05）;高磷组6 d后VSMCs内钙离子水平高于4 d后（P＜0.05）;维拉帕米干预组6 d后VSMCs内钙离子水平低于4 d后（P＜0.05）。高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于正常对照组（P＜0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均低于高磷组（P＜0.05）。高磷组4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于4 d后（P＜0.05）;维拉帕米干预组4 d后VSMCs内smad1 mRNA表达水平高于2 d后,runx2 mRNA表达水平低于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于2、4 d后（P<0.05）。高磷组、维拉帕米干预组VSMCs钙水平均高于正常对照组（P＜0.05）;维拉帕米干预组VSMCs钙水平低于高磷组（P＜0.05）。高磷组、维拉帕米干预组橘红色钙化结节较正常对照组多,维拉帕米干预组橘红色钙化结节较高磷组少。结论 维拉帕米在高磷诱导的VSMCs钙化中起抑制作用,其可能是通过抑制钙离子内流进而抑制smad1表达,进一步抑制runx2表达,进而抑制VSMCs发生表型转化来实现的。     

在血液透析中复用通路的快捷上机法

为了降低血液透析成本,减少初次使用综合征的发生, 提高生物相容性,常使用复用管道、空纤;但复用管道、透析器在血液透析前的准备工作比较繁琐,耗费时间,并耗用大量的生理盐水。现将我科近年来1 260例次快捷、安全的上机法总结报告如下。