内皮素 -1含量和微血管密度与星形细胞瘤临床病理关系的研究

背景与目的:探讨脑星形细胞肿瘤组织中内皮素_1(Endothelin-1,ET_1)的含量和微血管密度(Microvesseldensity,MVD)及其组织学分级和预后的关系。材料与方法:收集我院近8年有随访资料的星形细胞瘤74例。应用细胞图像光度术(Imagecytometry,ICM)测定74例不同级别的星形细胞瘤的ET_1表达的阳性率和ET_1含量、免疫组织化学应用S_P法(ImmunohistochemistryStreptavidin_Peroxidasemethod)检测MVD、并将ET_1含量、MVD与肿瘤分级和生存时间进行相关性分析。结果:①正常星形细胞ET_1阳性率和ET_1含量与星形细胞瘤比较差异均有显著性;高级别星形细胞瘤(Ⅲ级、Ⅳ级)与低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)比较差异有显著性;Ⅰ级与Ⅱ级之间比较差异无显著性。②高级别星形细胞瘤(Ⅲ级、Ⅳ级)MVD与低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)MVD比较差异有显著性意义,各级别间的生存时间比较差异有显著性。③相关分析:ET_1含量与星形细胞瘤的分级、MVD均呈正相关,与生存时间呈负相关。结论:①ET_1参与并促进肿瘤微血管的形成。②ET_1含量和MVD可为肿瘤诊断、分级和预后判断提供客观有用的参数。     

抗焦虑药物对束缚应激大鼠作用的分子机制探索

目的：为了探讨抗焦虑药物治疗焦虑症状的分子作用机制。方法：建立大鼠束缚应激模型，观察抗焦虑药物帕罗西汀用药组大鼠的旷场行为和下丘脑c-fos的表达。结果：与正常对照组比较，应激大鼠在旷场中的穿行格数和直立次数明显增加，下丘脑室旁核c-fos表达显著增加，而帕罗西汀用药组能减少大鼠在旷场中的活动和下丘脑室旁核c-fos表达。结论：帕罗西汀对束缚应激大鼠脑保护作用可能与下调c-fos基因表达有关。     

超声微泡靶向递送aFGF对糖尿病心肌病的治疗作用及其机制研究

 目的：观察SonoVue超声微泡靶向递送酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）对糖尿病心肌病（DCM）大鼠左室舒缩功能的保护作用并初步探讨其机制。方法：24只健康雄性SD大鼠通过腹腔注射链脲佐菌素建立DCM模型,再随机平均分成DCM组与aFGF治疗组。另选择正常对照组12只。aFGF治疗组经尾静脉注射SonoVue-aFGF溶液并同时给予心肌定点超声辐照。干预后4周对所有大鼠行心导管检查,测定左室收缩末压力(LVESP)、左室舒张末压力(LVEDP)和左室内压最大上升/下降速率(LV±dp/dtmax)。处死大鼠取心肌组织,免疫组织化学染色检测心肌微血管密度（MVD),改良Masson胶原染色法测定心肌胶原容积分数（CVF）,TUNEL法检测心肌组织凋亡指数（AI）。结果：干预后4周,aFGF治疗组大鼠LVESP和LV±dp/dtmax与DCM组比较明显增加（P<0.01）,LVEDP较DCM组明显减低（P<0.01）。aFGF治疗组MVD测值与DCM组比较明显增加（P<0.01）,而CVF及AI较DCM组明显减低（P<0.01）。结论: 超声微泡靶向递送aFGF可有效改善DCM大鼠的左心室功能,有望成为治疗DCM的新方法。     

骨膜去细胞生物支架的制备和鉴定

目的 制备兔骨膜去细胞生物支架,为骨缺损、骨不愈的组织工程研究提供天然的生物支架材料。 方法 取健康新西兰大白兔,游离双侧胫骨近端内侧骨膜,通过物理冻融（-80℃,24h）、去污剂洗脱（triton-X 100、SDS）和酶消化（DNA酶、RNA酶）获取骨膜去细胞生物支架。通过HE染色、DAPI染色、琼脂糖电泳和基因组DNA定量分析(n=5)测定细胞结构及DNA成分残留;Masson染色和羟脯氨酸测定法(n=6)定性定量检测骨膜细胞外基质的主要成分（胶原）的保留情况;扫描电子显微镜下观察骨膜去细胞生物支架的表面微结构;CCK8法检测支架浸提液毒性;皮下包埋实验(n=4)观察该支架的免疫排斥反应。 结果 HE染色和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色表明去细胞支架无残留细胞;琼脂糖电泳未见明显DNA条带;DNA定量检测显示组织去细胞率达95%以上;Masson染色及羟脯氨酸测定表明去细胞支架胶原成分被保留;扫描电子显微镜下细胞外基质呈现三维网状疏松结构;不同体积分数的浸提液对骨膜细胞的增殖与对照组（普通培养基）比较无明显抑制作用（P＞0.05）;异体皮下包埋实验显示,该去细胞支架免疫排斥反应不明显。 结论 运用物理冻融、去污剂洗脱和酶消化等方法所获取的骨膜去细胞生物支架细胞去除彻底,细胞外基质的结构及主要成分保留完好,生物相容性良好。     

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠模型的复制

目的：观察不同的遗传背景（远交系和近交系）和饲养环境对Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）发病率的影响，摸索EAE模型制作的实验方法与技术。方法： 采用动物行为学、常规HE和LFB染色方法，观察不同的遗传背景和饲养环境下豚鼠全脊髓匀浆诱导大鼠EAE的发病情况与中枢神经系统（CNS）的病理变化。结果： （1）动物行为学的改变：各组大鼠EAE发病率、潜伏期和症状评分无显著差异，但近交系组发病大鼠可出现四肢瘫痪。（2）病理学改变：每组发病大鼠CNS内可见不同程度的炎性细胞浸润；髓鞘染色可见广泛的神经髓鞘变性、脱失；而其中近交系组的5只EAE大鼠髓鞘脱失部位大多局限在炎症改变明显的血管套周围的白质区。结论： 远交系与近交系，或清洁级与普通级的Wistar大鼠的EAE的发病率无明显差异，而远交系与近交系的不同遗传背景可能会影响大鼠EAE的体征和病理表现。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠小胶质细胞的变化

目的　观察活化的小胶质细胞 (表达主要组织相容性抗原 )在实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)大鼠脊髓中的变化 ,探讨 EAE大鼠发病相关生物学机制。方法　采用免疫组化法观察豚鼠全脊髓匀浆诱导的 Wistar大鼠 EAE过程中脊髓内表达 MHC 、MHC 类抗原的小胶质细胞的变化情况。结果　对照组脊髓内未发现表达 MHC抗原细胞 ,实验组脊髓内表达 MHC 抗原细胞与表达 MHC 抗原细胞的分布和形态一致 ,小胶质细胞变化与 EAE大鼠的病程一致。动物临床症状评分 2分和 3分 EAE大鼠脊髓表达 MHC抗原的小胶质细胞比评分 1分大鼠明显增高 ( P <0 .0 1 ) ,恢复期 EAE大鼠表达 MHC抗原的小胶质细胞明显减少 ( P <0 .0 1 )。结论　活化小胶质细胞与 EAE大鼠的病情相关 ,提示其可能通过表达 MHC抗原在 EAE大鼠的发病机制中具有作用     

高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激、炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制

目的：探讨高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激和炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制。方法：选用5周龄C57BL/6雄性小鼠16只,随机平均分为正常饮食组、高脂饮食组,分别用正常饮食和高脂饮食喂养。于实验16周末,测各组动物体质量,处死后取内脏脂肪并测量内脏脂肪/体质量比值;用ELISA法测量血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）、血清骨钙素（OC）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）;分别用硫代巴比妥酸（TBA）法和羟胺法检测胫骨骨组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;用骨密度仪检测右侧股骨骨密度（BMD）;分别用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测骨组织骨保护素（OPG）和核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）蛋白及mRNA的表达;HE染色光镜观察左侧股骨组织形态学改变。结果：与正常饮食组相比,高脂饮食组体质量、内脏脂肪/体质量比值、骨组织RANKL mRNA/OPG mRNA比值、血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织RANKL表达及骨组织MDA均明显升高,差异均具统计学意义（P＜0.05）;而血清OC水平、骨组织OPG表达、骨组织SOD及BMD均明显下降,差异均具统计学意义（P＜0.05）。在组织形态学上,发现高脂饮食组股骨干骺端骨小梁分布稀疏,骨小梁变细及断裂,伴骨髓腔中有大量脂肪浸润。各指标的相关分析结果显示：BMD与骨组织SOD呈正相关（r=0.627, P＜0.01）,与内脏脂肪/体质量比值（r=-0.858,P＜0.01）、骨组织MDA均呈负相关（r=-0.538,P＜0.01）;SOD与OPG mRNA呈显著正相关（r=0.637,P＜0.01）,与TNF-α（r=-0.673,P＜0.01）、IL-6（r=-0.874,P＜0.01）、RANKL mRNA（r=-0.760,P＜0.01）及RANKL/OPG比值（r=-0.768,P＜0.01）呈显著负相关;而MDA与TNF-α、IL-6、OPG mRNA、RANKL mRNA以及RANKL/OPG无显著相关性（P＞0.05）。结     

糖尿病大鼠血糖波动对肝脏功能及超微结构的影响

目的 建立糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠血糖渡动模型,观察血糖波动对DM大鼠肝脏损伤的作用.方法 SD 大鼠24只均分为3组,A组为正常对照组,B组为稳定高血糖组,C组为波动血糖组,B组、C组大鼠均一次性腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg,建立DM模型.C组每天错时给予胰岛素和50%...     

咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠MCP-1、MIP-1α表达的影响

目的：探讨不同剂量咪唑克生（Ida）对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）中枢神经系统（CNS）内单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）表达的影响。方法：以豚鼠脊髓匀浆加完全福氏佐剂免疫Wistar大鼠,建立EAE模型。观察Ida 0.5、1.5和4.5mg&#183;kg^-1剂量组对大鼠的EAE发病率、神经功能缺损评分的影响,应用苏木精-伊红和Kluver ＆ Barrera髓鞘染色方法观察大鼠CNS病理变化,采用免疫组织化学技术检测大鼠CNS内MCP-1、MIP-1α表达的变化。结果：Ida 1.5和4.5mg&#183;kg^-1组的EAE发病率和神经功能缺损评分均明显降低,Ida3个不同剂量Ida干预组的CNS内MCP-1、MIP-1α的表达呈现不同程度地减少。结论：不同剂量的Ida能改善EAE,以1.5和4.5mg&#183;kg^-1组的效果更显著。推测可能与咪唑啉2受体有关。     

MEBO在脑卒中并发褥疮护理中的应用

目的 探讨湿润烧伤膏（MEBO）治疗脑卒中病人并发褥疮的治疗与护理效果。方法 30例脑卒中病人并发褥疮行MEBO全程湿润暴露疗法治疗。结果 28例治愈，治愈率93．3％。结论 MEBO在脑卒中病人并发褥疮换药，效果好，时间短，减少疤痕的形成，为目前首选药物。