间充质干细胞生物学特性的可塑性研究进展

间充质干细胞(MSC)同时具有造血支持、免疫调节、组织修复再生和归巢等特性,但由于各种因素常常不能充分发挥其效能。近期研究显示,MSC的生物学特性具有可塑性。研究人员通过对MSC进行低氧预处理、生物活性分子预处理、基因修饰预处理和力学刺激预处理以及调整MSC的移植策略,使其生物效能增强,该方向对于推动MSC的转化应用具有重要意义。基于此,本文就MSC生物学特性的可塑性研究最新进展作一综述。     

罗丹明123联合MDR1抑制剂维拉帕米鉴别肝细胞和胆管细胞

目的 罗丹明123(Rhodamine123,Rdm123)染料通常作为染色胆管细胞一种标记染料,本实验旨在探究:a)Rdm123可否染色肝细胞,并判断多药耐药性的蛋白质(MDR1)抑制剂维拉帕米(Verapamil,Vrp)对其染色的影响;b)如何通过Rdm123染色法判断胆管细胞和肝细胞.方法 100μM的Rdm123分别染色加入或不加入Vrp孵育的人肝癌细胞系HepG2、原代大鼠正常肝细胞和原代人肝细胞原代肝细胞,对比细胞在特定时间的荧光强度变化.大鼠来源的胆管细胞的诱导采用Katsuda报道CLiP技术制作.诱导的胆管细胞分别染色加入或不加入Vrp孵育,对比细胞在特定时间的荧光强度变化.结果 Rdm123可以染色肝细胞,包括肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(PHH和PRH),Vrp对其摄入和排泄无明显影响.肝细胞之间形成胆小管(BC)结构,肝细胞摄取Rdm123染料不会排泄后存留胆小管结构中.Rdm123可以染色诱导的胆管细胞结构,Vrp可以抑制其摄入排泄.结论 罗丹明123可以染色肝细胞和胆管细胞,其结合MDR1抑制剂维拉帕米可以用于鉴别肝细胞和胆管细胞.     

无创迷走神经刺激的临床应用进展

迷走神经活性的调节影响大脑和身体之间的信息传递过程及生理状态。无创迷走神经刺激（nVNS）通过刺激耳迷走神经或颈部迷走神经对多个器官和系统产生保护作用,远程调节机体功能。近年来nVNS在预防及治疗神经系统疾病、自身免疫相关性疾病及心血管系统疾病中取得重大进展。本文对nVNS及相关技术的应用研究进展进行综述,为进一步探索nVNS在围术期的应用提供参考。     

柚皮素通过自噬抑制乳腺癌细胞增殖的作用机制

目的 探讨柚皮素对人乳腺癌细胞株MCF-7和小鼠乳腺癌细胞系4T1的作用机制。方法 选择人乳腺癌细胞株MCF-7和小鼠乳腺癌细胞系4T1为实验对象,设置对照组和柚皮素组,其中柚皮素组分为20、40、80和120μmol/L 4个浓度,利用CCK-8、平板克隆形成实验检测柚皮素对乳腺癌细胞的增殖作用,应用流式细胞术检测柚皮素对乳腺癌细胞的凋亡作用。建立乳腺癌移植瘤模型,应用柚皮素作用于模型小鼠,探讨柚皮素在体内抗肿瘤作用。通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测自噬相关基因,分析其作用机制。结果 经柚皮素处理后,乳腺癌细胞的增殖明显受到抑制,正常乳腺癌细胞增殖情况变化不大,MCF-7乳腺癌细胞和小鼠乳腺癌4T1均出现明显的凋亡（P<0.001）。结论 柚皮素可以抑制乳腺癌细胞的增殖,且对正常乳腺细胞无明显毒副作用。柚皮素通过凋亡和自噬方式促进乳腺癌细胞的死亡,体内实验结果显示柚皮素具有抗肿瘤作用,并可促进其坏死。     

基于间充质干细胞的小鼠急性移植物抗宿主病骨髓微环境损伤体外细胞模型的建立与评价策略研究

目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体,6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy, 72.76 cGy/min)γ射线全身照射后6-8 h内,尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10⁷/只),建立骨髓移植(BMT)组小鼠模型(n=20);尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×10⁷/只)及脾脏淋巴细胞(2×10⁶/只),建立小鼠aGVHD模型(n=20)。造模后d 7麻醉小鼠,摘取眼球取血,静置离心后吸取血清。分离小鼠间充质干细胞(MSC),分别用添加了2%、5%和10%的BMT组血清和相同浓度的aGVHD组血清的培养基进行培养。通过成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)评价两组血清对MSC集落形成能力的影响;通过CD29和CD105免疫荧光染色评价两组MSC表面分子表达的差异;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MSC自我更新相关基因Oct-4、Sox-2和Nano...     

高浓度氧对成年大鼠肺组织NF-кB和IL-8表达的影响

目的通过观察不同持续时间高浓度吸氧对大鼠肺组织NF-кB和IL-8的影响,探讨高浓度氧所致肺组织损伤(HILI)的发生时间和机制。方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,即对照组(吸入空气)、吸氧48 h组、72 h组、96 h组和120 h组,吸入氧浓度均在95%以上。测定肺组织湿干重比值(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数;采用免疫组织化学法检测肺组织NF-кB和IL-8的表达水平。结果随着高浓度氧暴露时间延长,肺组织W/D、肺组织NF-кB和IL-8蛋白表达水平及BALF中性粒细胞计数均逐渐增加,其中96 h组和120 h组增加最明显,与对照组、48 h组及72 h组比较均有统计学意义(均P<0.01),而对照组、48 h和72 h组之间,以及96 h组和120 h组之间各项指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析表明,肺组织NF-кB与IL-8蛋白表达水平之间呈正相关(r=0.856,P<0.001)。结论高浓度吸氧持续96 h以上即可引起肺组织损伤,其发生可能与高浓度氧激活肺组织细胞NF-кB,上调IL-8表达,导致中性粒细胞聚集、活化引起的炎症反应有关。     

内镜下白塞病的消化道改变

白塞病(BD)常累及多脏器,其中消化系统损害亦不少见。现将我院1996年1月～2003年4月收治的13例BD患者的内镜检查结果报道如下。