再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗中新型冠状病毒感染临床症状评估——前瞻性NICHE队列研究

目的调查再生障碍性贫血(AA)患者接受免疫抑制治疗中新型冠状病毒(新冠)感染临床症状及转归。方法前瞻性研究2022年12月1日至2023年1月31日期间新冠感染的AA患者人口学特征和临床症状, 并分析AA免疫抑制治疗对新冠感染临床特征的影响。结果共纳入170例合并新冠感染的AA患者, 早期高发症状中发热、头痛或头晕、肌肉或全身酸痛、咽痛这四种表现在第1～2周时明显好转, 约25%的患者在2周时持续乏力, 咳嗽或咳痰症状在感染1～2周后明显增多。免疫抑制治疗组和非免疫抑制治疗组、免疫抑制治疗持续6个月及以上与短于6个月、曾接受抗淋巴细胞球蛋白(ALG)治疗组和未接受过ALG治疗组的发热天数和最高体温差异均无统计学意义(均P>0.05)。新冠感染后1、2周患者症状恢复情况, 在是否接受免疫治疗及其治疗时长亚组中差异均无统计学意义(均P>0.05);但曾接受ALG治疗者感染1周的发热比例低于未接受ALG治疗者(P=0.035), 感染2周的咽痛比例高于未接受ALG治疗者(P=0.015), 其他临床症状差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 AA患者接受免疫抑制治疗中新...     

泛T淋巴细胞结合照射诱导的再生障碍性贫血小鼠模型的优化

目的:建立适用于研究T淋巴细胞功能的获得性再生障碍性贫血(acquired aplastic anemia,AA)动物模型以及应用于再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的动物模型。方法:对X射线联合淋巴细胞注射诱导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型进行优化。AA组:富集C57BL/6J小鼠的脾脏泛T细胞,按细胞数5×10⁶/只经尾静脉注射至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;单纯照射组(total body irradiation,TBI):经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;对照组:经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至CB6F1小鼠体内;检测外周血血常规,计数骨髓有核细胞数,骨髓病理切片检测骨髓造血,流式细胞术检测骨髓T细胞分布比例、骨髓细胞凋亡和脾脏T细胞的分化程度。结果:相较于4、5 Gy照射的AA组,3 Gy照射的AA组生存期明显延长;经3、4、5 Gy X射线照射联合泛T淋巴细胞注射均可成功诱导受体鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数严重减少,骨髓有核细胞严重减少,骨髓造血衰竭,骨髓中T淋巴细胞占比明显增加,CD4⁺T和CD8⁺T细胞均增加但以CD8⁺T细胞为主,并促进T细胞从初始T细胞向效应记忆T细胞分化。结论:3、4和5 Gy X射线的照射联合5×10⁶泛T细胞注射均可通过引起T淋巴细胞功能亢进,成功构建AA动物模型;较4、5 Gy照射剂量,3 Gy照射组生存期明显延长,外周血血象与AA临床患者表现更接近。     

Kinetics of immune activated T cells in aplastic anemia mouse model

<正>Objective To explore the dynamic changes of donor derived T cells at different time points in the aplastic anemia mouse model.Methods The aplastic anemia mouse model was induced and then the proportion of infiltrated donor derived T cells in spleen and bone marrow,expression of activation molecular markers,cell cycle and functional subsets were measured by flow cytometry at different time points to evaluate the functional status of T cells in different periods.     

再生障碍性贫血小鼠模型中免疫活化T细胞动力学研究北大核心CSCD

目的探索再生障碍性贫血(AA)小鼠模型中供者来源T细胞不同时间点动力学变化。方法构建AA小鼠模型, 分别于不同时间点采用流式细胞术测定模型小鼠脾脏与骨髓内供者T细胞比例、活化分子表达、细胞周期及功能亚群, 评估不同时期T细胞功能状态。结果①半致死剂量照射联合主要组织相容性抗原(MHC)半相合的淋巴结细胞输注成功构建T细胞免疫介导的AA小鼠模型。②AA小鼠脾脏中供者T细胞从移植第3天后开始明显浸润, 并逐渐出现CD4^(+)/CD8^(+)比例倒置, 第5天开始进入骨髓, 以CD8^(+)细胞浸润为主。③CD69在供者CD4^(+)细胞中表达高峰晚于CD8^(+)细胞, CD25在CD4^(+)细胞与CD8^(+)细胞中表达水平的变化趋势相同, 但在CD8^(+)细胞中的表达高于CD4^(+)细胞。④脾脏内供者CD4^(+)细胞S/G2/M期比例在移植后第3天即达高峰, 约12%, 而CD8^(+)细胞中S/G2/M期比例在移植后第5天达高峰, 约20%, 且两者在进入骨髓后S/G2/M期比例均再次升高, 但移植第3天后其比例在脾脏与骨髓CD8^(+)细胞中持续高于CD4^(+)细胞。⑤脾脏内免疫活化的T细胞经历短暂的中枢记忆T细胞(TCM)阶段后迅速分化为效应记忆T细胞(TEM), 进入骨髓后部分TEM分化为效应细胞进一步发挥效应功能。结论 AA小鼠模型中供者T细胞进入异体后迅速活化, 5天内达增殖高峰, 并完成向TEM细胞的分化, 5天后开始进入骨髓进一步增殖损伤造血。