玻片法单人份免疫分型试剂盒在白血病诊断中的应用

0引言白血病免疫分型是指用已知的单克隆抗体(单抗)鉴定细胞表面或胞质内的分化抗原的方法.该方法的临床应用有利于白血病的鉴别及诊断.我们采用单人份免疫分型试剂盒对128例白血病患者进行了免疫分型.     

132例BCR-ABL融合基因阴性骨髓增殖性肿瘤患者JAK2、CALR及MPL基因突变的临床分析

目的:探讨BCR-ABL融合基因阴性的骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN)患者JAK2、CALR及MPL基因突变情况及临床特征。方法:选取132例BCR-ABL融合基因阴性的MPN患者,其中真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)27例,原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)97例,原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis,PMF)8例。骨髓抽提DNA,荧光定量PCR检测JAK2、CALR及MPL基因突变情况并分析临床特征,JAK2基因包含JAK2V617F、JAK2 N542_E543del、E543_D544del和JAK2 K539L1/L2;CALR基因包含CALR L367fs*46和CALR K385fs*47,MPL基因包含MPL W515K/A/L/R1/R2/S和MPL S505N。结果:在132例BCR-ABL融合基因阴性的MPN患者中,仅有JAK2V617F、MPL W515K/A/L/R1/R2/S、CALR L367fs*46和CALR K385fs*47突变,突变率分别为48.48%(64/132)、0.76%(1/132)、10.61%(14/132)和6.06％(8/132),并且这几种突变不同时出现。PV中仅有JAK2V617F突变,突变率为74.07%（20/27）,ET中JAK2V617F、CALR L367fs*46和CALR K385fs*47突变率分别为42.27%（41/97）、13.40%（13/97）、8.25%（8/97）,PMF中 JAK2V617F、CALR L367fs*46和MPL W515K/A/L/R1/R2/S突变率分别为37.50%（3/8）、12.50%（1/8）和12.50%（1/8）。在PV患者中,JAK2V617F突变阳性患者的白细胞（white blood cell,WBC）显著高于阴性患者（P<0.05）。在ET患者中,JAK2V617F突变阳性患者的血红蛋白（hemoglobin,Hb）显著高于阴性患者（P<0.05）,CALR突变阳性患者的血小板（platelet,PLT）显著高于阴性患者（P<0.05）。结论:基因检测为MPN的诊断及预后能提供更加方便、准确地依据,为相关的治疗提供更多的帮助。     

弓形虫三磷酸核苷水解酶-II的克隆、表达及初步应用

目的探讨弓形虫RH株速殖子NTPase-II重组蛋白的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法通过PCR获得NTPase-II基因,克隆入pGEM-T Easy载体,经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB,构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达。SDS-PAGE和Western-blot分析蛋白表达产物。用纯化的表达产物作为诊断抗原,通过对反应条件的优化,初步建立检测抗NTPase-II抗体的间接ELISA方法。结果PCR扩增得到特异的弓形虫NT-Pase-II基因序列,经测序鉴定无基因突变。重组质粒诱导表达产物相对分子量约70kD,与理论值相符。经Western-blot证实,重组蛋白可刺激机体产生相应的抗体。具有良好的抗原性和免疫原性。用表达的重组NTPase-II蛋白初步建立了用于NTPase-II抗体检测的间接ELISA方法。结论重组NTPase-II蛋白具有较强免疫原性,可作为诊断抗原用于急性弓形虫感染诊断试剂的研发。     

肌注杜冷丁、异丙嗪引起呼吸骤停一例报告

<正> 病例女,21岁。因小儿麻痹后遗症入院。于1985年9月4日行髋部及股骨粗隆部截骨术。术后6小时因伤口剧烈疼痛,遵医嘱肌注杜冷丁50mg,异丙嗪25mg,注后5分钟,患者有强烈嗜睡感。10分钟后突然出现面色苍白,口唇发绀,呼吸停止,呼之不应,双瞳孔等大同圆,对光反应存在,胸廓     

伴有t(6;9)(p23;q34)/DEK-NUP214融合基因阳性的急性髓系白血病患者的特征分析

目的探讨伴有t(6;9)(p23;q34)/DEK-NUP214融合基因阳性的急性髓系白血病(AML)患者的特征。方法应用流式细胞术对8例初诊AML患者进行免疫分型;8例初诊AML患者的骨髓细胞培养24 h后按常规制备染色体,利用G显带技术进行染色体核型分析;采用实时荧光定量PCR的方法扩增DEK-NUP214融合基因。结果8例患者均异常表达AML抗原谱(主要包括HLA-DR、cMPO、CD33、CD13、CD34、CD11b、CD117);8例AML患者均形成DEK-NUP214融合基因,6例伴t(6;9)(p23;q34)易位,4例进行基因突变检测患者中,2例检出FLT3-ITD突变阳性;在中国人民解放军空军军医大学第一附属医院/西京医院住院治疗的5例患者中,1例未化疗即死亡,2例患者第1疗程用IDA标准剂量化疗,1例无效死亡,1例死于感染;2例行地西他滨联合CAG方案化疗,1例缓解后行异基因造血干细胞移植术,术后1.5年死于肺部感染,1例缓解后很快复发死亡。结论伴有t(6;9)(p23;q34)/DEK-NUP214融合基因阳性的AML是一类独特的、预后极差的急性白血病,检测DEK-NUP214融合基因有助于这类疾病的诊断、危险度分层、疗效观察和预后判断。     

伴dek/can融合基因阳性急性髓系白血病1例

伴dek/can融合基因阳性急性髓系白血病是临床上较为少见的类型。由于染色体易位,6号染色体上的DEK基因与9号染色体上的CAN基因结合形成DEK2CAN融合蛋白,该蛋白与白血病的发生有密切关系。本病例报道旨在提供一个临床可靠的数据及相关信息,供相关研究人员参考和探讨。1病例资料患者,男,49岁,因乏力头晕,纳差而就诊。呼吸、心率、血     

弓形虫三磷酸核苷水解酶基因真核表达载体的构建

目的：构建编码弓形虫RH株三磷酸核苷水解酶（NTPase-Ⅱ）重组真核表达载体PVAX1-NTPase-Ⅱ。方法：采用PCR从弓形虫基因组DNA中扩增NTPase-Ⅱ基因,克隆入pGEM-T Easy载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR、酶切和测序鉴定;采用亚克隆将NTPase-Ⅱ基因克隆至真核表达载体PVAX1,筛选阳性重组质粒PVAX1-NTPase-Ⅱ,进行PCR、酶切和测序鉴定。结果：NTPase-Ⅱ的重组真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定,大小为1 887 bp,与预期大小一致;重组真核表达载体的核苷酸序列,与GenBank中的相应序列100%同源。结论：成功构建重组真核表达载体PVAX1-NTPase-Ⅱ,为弓形虫核酸疫苗的研制奠定了基础。     

间接ELISA检测弓形虫感染鼠NTPase-Ⅱ抗体的研究

目的建立检测小鼠血清中刚地弓形虫NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体的间接ELISA法,探讨用于弓形虫感染早期检测的应用价值。方法以刚地弓形虫NTPase-Ⅱ融合蛋白为包被抗原建立间接ELISA法,动态检测刚地弓形虫实验感染鼠血清NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体变化。试验设脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清对照。结果小鼠血清中的抗NTPase-Ⅱ抗体IgM于弓形虫感染后第3 d开始出现阳性反应,IgG抗体于感染后第7 d开始出现阳性反应,脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清特异性IgG阳性率分别为0、1.92%和0。结论间接ELISA检测弓形虫感染鼠血清NTPase-Ⅱ抗体的敏感性和特异性较高,有望应用于人感染弓形虫的早期检测。     

急性混合细胞白血病14例的实验室诊断

1 临床资料 2004-01/2006-06我院收治急性混合细胞白血病(MAL)患者14(男9,女5)例,年龄17～66岁,中位年龄为32岁. 其中诊断为双表型的3例,双克隆型11例. 骨髓及外周血涂片经瑞氏良好染色、过氧化物酶(POX),特异性酯酶(AS-DCE),糖原染色(PAS),中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP),非特异性酯酶染色,并经经验丰富的血液实验室医生作出初步判断.     

围术期流程化护理干预对脑出血患者生活质量的临床影响

目的:研究对脑出血患者实施围术期流程化护理干预的效果。方法:选择2015年1月-2018年1月本院脑出血患者94例,依据护理方式分为观察组、对照组各47例,分别接受围术期常规护理干预、围术期流程化护理干预,比较两组效果。结果:观察组护理后在出院时以及出院后一个月生活质量评分均高于对照组,P0.05。结论:对脑出血患者实施围术期流程化护理干预能够明显提升患者生活质量,可广泛推广。