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作者分别用差速离心法及蔗糖梯度离心法制备胎盘微绒毛膜(PMM),用受体放射分析法研究了PMM的转铁蛋白受体(TfB),结果表明:两种方法制备的PMM均可用于受体分析,但差速离心法更为简便。测定60例产妇PMM的TfR,其数目为3.53±1.98×10~(12)个位点/mg膜蛋白,最大结合容量为6.33±4.21×10~(-12)mol/mg膜蛋白,Kd值为4.95±3.39×10~(-9)mol/L。受体结合反应体系最适实验条件为,膜蛋白浓度每管50μg,标记物浓度每管50 000cpm,孵育30分钟,B/F分离的聚乙二醇浓度为12%(W/V)。对TfR的特性研究表明:TfR与转铁蛋白的结合具有高度亲和力、高度特异性及可饱和性。 相似文献
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转铁蛋白受体(TfR)在恶性肿瘤性细胞上表达比正常细胞或良性肿瘤细胞上表达明显增加。我们分析了10例急性淋巴细胞性白血病(ALL)和5例急性髓系白血病(AML)外周血单个核细胞TfR位点数与反映细胞增殖状态的指标“氚一胸腺嘧啶核苷(3HTdR)”掺入值的关系,并用植物血凝素(PHA)刺激10例正常健康)儿童外周血单个核细胞转化,测定刺激后细胞的TfR位点数及其3HTdR掺入值,发现三组间细胞TfR表达有显著性差异(P相似文献
3.
本文采用差速离心法制备胎盘微绒毛膜,用125I-Hunter试剂联接标记铁蛋白,在国内首次建立了胎盘微绒毛膜铁蛋白受体放射配体分析法,并进行了最适反应条件及铁蛋白受体的特性研究。所标记的125I一铁蛋白放化纯达95%以上,且免疫活性和生物活性均较好。用放射配体受体分析测定了11例正常足月孕妇胎盘微绒毛膜铁蛋白受体数为(3.534土1.105)×1012位点/毫克膜蛋白,亲和力常数Ka为(2.203土0.622)×107mol-1.L。实验条件为:膜蛋白160ug,125I互铁蛋白与游离铁蛋白分离的PEG浓度为12%。对铁蛋白受体特性研究表明:铁蛋白受体与铁蛋白结合具有高度特异性、可饱和性和中度亲和力。 相似文献
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检测19例ALL和7例AML外周血白血病细胞TfR位点数(TfR)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、血清铁蛋白(SF)、血清转铁蛋白(Tf)和细胞内铁蛋白(CF),发现急性白血病病例SI变化不,SF、CF增加,Tf下降,TfR与SF、CF呈正相关,与Tf呈负相关。 相似文献
5.
为了研究细胞可变铁池(1abile iron pool,LIP)的检测方法,用不同浓度的去铁胺(DFO)与K562及HL-60细胞共同培养0、6、12、24、48小时,用钙荧光素(caicein)负荷K562及HL-60细胞,荧光分辨仪检测细胞荧光量;用快速铁螯合剂螯合铁,使恢复荧光,然后计算2次荧光差值.结果表明:浓度为50和100μmol/L的DFO作用于K562及HL-60细胞12小时后,荧光值明显高于对照组(P<0.05),且LIP的荧光差值(△LIP)随DFO作用时间的延长及浓度增加而降低,即呈一定的时间及剂量依赖性.结论:DFO通过螯合细胞内铁降低了白血病细胞LIP;calcein AM荧光可作为检测细胞LIP变化的比较可靠的方法. 相似文献
6.
目的:探讨铁稳态调节信号分子hepcidin在慢性肾功衰(CRF)肾性贫血发病机制中的作用,为临床诊治铁紊乱相关的肾性贫血寻找理论依据。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫法、比色法等分别测定30例初治CRF贫血患者(其中11例患者同时检测尿液pro-hepcidin水平)、30例健康对照者血清hepcidin的前体肽pro-hepcidin、促红细胞生成素(EPO)以及相关铁和血液学参数水平。结果:初治CRF贫血组血清pro-hepcidin水平(242.13±96.65ng/ml)显著低于正常对照组(1019.68±388.31 ng/mL)水平(P<0.001)。初治CRF贫血组内尿毒症者血清pro-hepcidin水平显著高于氮质血症者(P<0.05)。初治CRF贫血患者血清Pro-hepcidin与铁蛋白、Urea、Crea、MCHC呈显著正相关(P<0.01),与EPO的自然对数、Hct呈负相关(P<0.05);尿pro-hepcidin和血Urea呈负相关(P<0.05),血尿pro-hepcidin水平无统计学相关性(P>0.05)。结论:慢性肾功衰肾性贫血时,贫血和缺氧等对hepcidin的下调作用较强,这可能是机体代偿保护性机制的一种反映,但此时相对缺乏的EPO、肾功能损害和炎症等因素削弱了对hepcidin的下调作用,推测hepcidin水平仍是相对升高的,并参与了慢性肾功衰肾性贫血的发病。 相似文献
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目的:探讨未发生梗阻性肺动脉高压的左向右分流先天性心脏病儿童骨骼肌血管是否有AT2受体表达,及肺循环AngⅡ受体的表达。 方法: 20例左向右分流先心病患儿术中取肺、骨骼肌活检。用RT-PCR和免疫组化的方法检测这些骨骼肌中的AT2受体;并对肺组织中AT1和AT2受体的mRNA作半定量分析。 结果: RT-PCR在这些骨骼肌中均检出AT2受体的mRNA;这些骨骼肌血管的AT2受体免疫组化染色均为阳性。这些患儿肺组织中AT2受体的mRNA水平比AT1受体高(P<0.05)。 结论: 左向右分流先心病儿童骨骼肌血管有AT2受体表达;肺循环AT2受体表达水平比AT1受体高。 相似文献
8.
白血病细胞线粒体超微结构及其蛋白质双向电泳分析 总被引:4,自引:0,他引:4
探讨白血病细胞线粒体(mt)形态、结构和功能的异常与mt蛋白组分变化间的可能的关系。方法采用离心法分离纯化了可移植性小鼠腹水型白血病细胞(L7811)及正常615纯系小鼠胸腺细胞线粒体,对其超微结构进行了电镜观察。结果对它们各自蛋白质双向电泳图谱分析后发现在PH4.5~6.5,MW15~35KD范围内正常对照有8个蛋白质斑点在L7811l白血病细胞线粒体电泳图谱相应位置未观察到,而在PH6左右、MW10~17KD区域内白血病样品有3个蛋白质斑点,在正常对照的电泳图谱相应区域也未观察到。结论白血病细胞与正常对照细胞相比线粒体在超微结构和蛋白质组成上均有明显差异。 相似文献
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造血系统恶性肿瘤糖皮质激素受体的临床研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究糖皮质激素受体(GCR)与造血系统恶性肿瘤化疗效果及预后的关系。方法 采用放射配基结合分析法,检测41例正常对照及77例造血系统恶性肿瘤患儿白细胞GCR水平,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)50例,急性髓性白血病(AML)15例,恶性淋巴瘤12例。结果 ALL及非霍奇金淋巴瘤外周血GCR水平与化疗疗效及预后呈正相关(P〈0、05),霍奇金淋巴瘤及AML外周血GCR水平与预后未见相关性(P〉0、05)。结论 ALL及非霍奇金淋巴瘤外周血白细胞GCR水平可预测化疗效果及预后。 相似文献
10.
目的探讨HL-60细胞铁池改变对凋亡相关基因表达的影响及可能的分子机制。方法实验分组为去铁胺(DFO)组、DFO+三氯化铁组及空白对照组,分别采用钙黄绿素检测HL-60细胞LIP、流式细胞术观察HL-60细胞凋亡和RT-PCR测定HL-60细胞bax、c-myc、rbmRNA表达。结果(1)不同浓度的DFO作用于HL-60细胞后,随培养时间延长及DFO浓度的增加,动态铁池降低,细胞生存率逐渐下降,显示一定的时间剂量依赖性。(2)不同浓度的DFO作用于HL-60不同时间后,细胞凋亡增加,高于对照组(P<0.05)。(3)RT-PCR结果显示,DFO能明显上调c-myc、rb和baxmRNA表达(P<0.05)。结论DFO通过螯合细胞内铁,降低HL-60细胞LIP,诱导细胞凋亡;诱导HL-60细胞凋亡的作用可能与其降低细胞动态铁池,上调细胞凋亡相关基因c-myc、rb、baxmRNA表达密切相关。 相似文献