2012年上海地区细菌耐药性监测

目的了解2012年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法（K—B法）对上海地区29所医院的临床分离菌进行药敏试验,其中包括17所三级医院和12所二级医院。采用CLSI2012年版标准判断结果。结果总计76407株临床分离菌,革兰阳性菌占26．6％,革兰阴性菌占73．4％。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的平均检出率分别为52．1％和77．0％。MRSA和MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为67．3％、82．9％和48．3％、76．1％。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。685株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药肺炎链球菌（PSSP、PISP和PRSP）的检出率分别为72．7％、13．7％和13．6％,75株成人分离株的检出率分别为92．0％、5．3％和2．7％。发现万古霉素耐药屎肠球菌26株、粪肠球菌3株。首次在二级医院中发现万古霉素耐药粪肠球菌2株、屎肠球菌4株。根据表型推测,多数万古霉素耐药肠球菌（VRE）为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为60．1％、35．8％和38．9％。上述3种细菌中的ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为65．6％、32．5％、51．5％和58．7％、36．6％、32．8％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为6．1％和4．1％。铜绿假单胞菌、不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为28．4％、23．2％和50．6％、55．1％。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株对所有测试药物耐药的泛耐药株（替加环素和多黏菌素未测）。分离自尿液标本中的肠球菌属细菌和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起严重关注。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的原核表达及多克隆抗体的制备

目的 研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a (PBP2a)的原核表达,及PBP2a多克隆抗体的制备.方法 根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了1对寡核苷酸引物,应用PCR法从MRSA基因组中获得编码PBP2a全长的DNA,将此目的 基因片段克隆至pET32a(+)载体,转化E.coli BL21(DE3);经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术纯化目的 蛋白;用目的 蛋白免疫小鼠3～8次后,收获血清并鉴定.结果 成功构建了PBP2a原核表达载体,并获得了高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体.结论 利用分子克隆技术,获得了高纯度的PBP2a蛋白并制备了多克隆抗体,为其进一步研究奠定了基础.     

2013年上海市细菌耐药性监测

目的：了解2013年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市40所医院的临床分离菌进行药敏试验。其中包括28所三级医院和12所二级医院,采用CLSI 2013年版标准判断结果。结果总计98185株临床分离菌,革兰阳性菌26655株,占27．1％,革兰阴性菌71530株,占72．9％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（金葡菌）（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为50．8％和77．6％。在二级医院和三级医院MRSA、MRCNS的平均检出率分别为55．1％、80．6％和49．8％、77．0％。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。726株儿童肺炎链球菌非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药（PSSP、PISP和PRSP）的检出率分别为56．7％、15．6％和27．7％,107株成人分离株为91．6％、2．8％和5．6％。发现35株屎肠球菌和17株粪肠球菌对万古霉素耐药（VRE）。根据表型推测,多数VRE为V anA 基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株的检出率分别为61．3％、37．1％和39．5％。上述3种细菌中产ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为63．0％、31．6％、56．3％和60．7％、38．7％、33．5％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为5．8％和6．6％。铜绿假单胞菌和不动杆菌属对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为25．3％、24．3％和52．6％、56．0％。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株为对所有测试药物耐药的广泛耐药株。分离自尿液标本中的肠球菌属和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床抗感染治疗构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起高?