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目的探究骨形态发生蛋白4(BMP4)与脱细胞人牙髓细胞外基质是否共同调节人牙髓干细胞(hDPSCs)介导的成骨/成血管分化。方法从健康的人第三磨牙中分离出牙髓,改良组织块法培养hDPSCs并进行鉴定,用十二烷基硫酸钠(SDS)和Triton X-100制作脱细胞化细胞外基质(dECM),电子显微镜观察其结构,Cell Counting Kit-8分析细胞增殖生长曲线。使用重组腺病毒BMP4感染hDPSCs。HE和DAPI染色后,当看不到完整的细胞核时,分别在dECM和三维(3D)VitroGel系统中培养细胞,并通过碱性磷酸酶染色(ALP)与实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)评估骨/牙本质/血管生成标记的表达。结果提取hDPSCs并完成鉴定,制作脱细胞牙髓细胞外基质并于镜下观察无细胞核存在。Cell Counting Kit-8分析结果表明,dECM可以支持hDPSCs的生长和增殖且没有明显的细胞毒性。ALP染色结果显示,BMP4和dECM协同促进hDPSCs成骨分化。qRT-PCR结果显示,成骨和成血管细胞基因的表达增加。结论dECM可促进hDPSCs增殖,而BMP4+dECM促进hDPSCs在体外成骨和成血管分化。 相似文献
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