CpG DNA诱导抗生殖器疱疹保护性免疫的应用前景

天然免疫是人体抵抗生殖器疱疹的第一道防线，在急性感染早期限制病毒复制并促进获得性免疫。最近发现，哺乳动物的天然免疫系统，通过TLR特异识别保守分子细菌DNA；阴道局部使用人工合成的细菌DNA（即CpG ODN），在疾病动物模型中证实能诱导强大的抗生殖器疱疹的免疫保护作用。这为临床上制定抗生殖器疱疹的新策略提供了科学依据。本文旨在概述CpG DNA诱导抗生殖器疱疹免疫的新进展和发展趋势.     

新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血行感染类型及耐药性

目的:了解新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血行感染类型及耐药性情况,为临床合理用药提供依据。方法:回顾分析2006年1月-2009年12月,本院新生儿室送检的3390例血培养及体外抗生素药敏试验结果。血培养使用Bact/A-LERT 3D(120)全自动血培养系统及其配套的培养瓶,病原菌鉴定及药敏试验采用法国B iom erieux公司的API细菌鉴定系统及配套试剂。结果:在3390例新生儿血培养中,共检出416株病原菌(12.3%),主要以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为主,占74.0%(308/416),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率为85.4%,CNS中以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、路邓葡萄球菌、头状葡萄球菌为主,其MRS的检出率分别为:84.6%、100.0%、81.8%、90.9%。在溶血葡萄球菌中,MRS的检出率4年间没有发生变化均为100.0%。耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)和其它CNS对万古霉素、喹奴普汀/达福普汀、呋喃妥因、米诺霉素、利福平、替考拉宁、呋西地酸的耐药率均较低,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:CNS为本地区新生儿败血...     

Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统在葡萄球菌药敏判断中的局限性

目的 观察对Phoen ix-100系统鉴定在葡萄球菌药敏结果判断中的局限性。方法 对Phoen ix-100系统鉴定的183株金黄色葡萄球菌、82株凝固酶阴性葡萄球菌进行药敏分析,对青霉素表现为敏感菌株进行β内酰胺酶测定,对红霉素耐药克林霉素敏感菌株进行D-试验。结果 1 Phoen ix-100系统显示青霉素敏感的15株,行β内酰胺酶测定,结果阳性1株,修饰为耐药。2 Phoen ix-100系统显示红霉素耐药克林霉素敏感122株,行D-试验,结果阳性51株(41.8%),修饰为克林霉素耐药。结论 Phoen ix-100系统鉴定葡萄球菌药敏时存在局限性,在青霉素敏感、红霉素耐药克林霉素敏感时不能给出准确报告,应结合β内酰胺酶检测结果、D-试验结果将结果进行修饰,指导临床合理用药。     

单核细胞增生李斯特菌引起宫内感染1例报道

单核细胞增生李斯特菌是李斯特菌属中被临床确立对人致病的病原体,是人李斯特病的重要致病菌.2011年3月6日从本院早产新生儿血液中检出单核细胞增生李斯特菌,由于该菌引起的宫内感染可导致新生儿败血症,应引起重视.     

单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析

目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性。方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21。PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后,IPTG诱导表达融合蛋白GST-gD,并进行免疫学鉴定。结果:获得了gDDNA。测序鉴定表明,该序列与Gen Bank中的序列一致,gD基因已正确插入到pGEX-4T-1中。重组融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD经IPTG诱导后能在大肠杆菌中高效表达,Western Blotting证实,该蛋白具有天然gD抗原性。结论:成功构建了融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD,在大肠杆菌中获得了有效表达,并证实融合蛋白具有gD免疫原性。为进一步研究gD蛋白的免疫学特性,制备gD亚单位疫苗和单克隆抗体奠定了基础。     

3种新型长效胰岛素类似物

胰岛素的基础分泌是指其少量持续的分泌。常规人胰岛素由于不能很好地在糖尿病患者中重建正常生理性胰岛素分泌,低血糖发生率较高,影响了其临床应用。随着基因工程技术的发展,一批新出现的长效胰岛素类似物可以模拟正常人胰岛素的基础分泌,在注射后持续少量的释放。而目前3种新型的长效胰岛素类似物：甘精胰岛素、地特胰岛素和德谷胰岛素,虽然都通过改变胰岛素的等电点或增加类似物分子量的方法,使其分解、吸收及作用时间延长,更好地模拟正常人胰岛素的基础分泌,但其在分子结构、长效机制、生产工艺和临床使用上又有诸多不同。     

2种长效胰岛素类似物的研究进展

胰岛素（insulin, INS）首次用于治疗糖尿病以来,随着对糖尿病病理和生理以及发病机制的深入研究,胰岛素得到了许多糖尿病患者的认可。随着重组DNA技术的发展,出现了一批新的长效胰岛素类似物：地特胰岛素（detemir）和德谷胰岛素（degludec）。它们在注射后均可以模拟人胰岛素的分泌方式,持续少量的释放,使餐前和餐后以及夜间的血糖保持稳定;但是随着各方面的深入研究,它们在分子结构、作用机制、生产工艺以及临床应用方面存在着许多不同之处。     

全长单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建

目的:构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D(gD)的毕赤酵母表达载体,为进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗奠定基础。方法:PCR从HSV-2基因组中扩增gD2基因,再用PCR的方法在基因两端加入两个限制性内切酶切位点XhoⅠ和XbaⅠ;PCR产物经过双酶切后按照正确的读码框顺序克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中;转化到大肠杆菌感受态细胞TOP10F'中,抗生素得到筛选转化子。结果:核酸序列测定PCR扩增的gD2片段与GeneBank中HSV-2G株gDDNA碱基同源性达98.4%,氨基酸同源性达95.7%。在实验过程中构建了四个表达载体,经过双酶切后琼脂糖电泳鉴定正确。结论:构建了gD2毕赤酵母表达载体四个,其中两个含有HSV-2gB的CTL表位序列。     

新生儿血培养出产单核李斯特菌1例

目的探讨李斯特菌病的临床表现及治疗方法。方法回顾性分析1例出生后主要表现为窒息的新生儿,后经血培养诊断为产单核李斯特菌感染,并结合文献进行复习。结果经API Listeria系统鉴定为产单核李斯特菌,鉴定编码6510,Id值98.6%,T值1.00。药敏结果为：青霉素、氨苄西林、红霉素、万古霉素、氯霉素敏感,克林霉素表现为敏感;四环素表现为中介;头孢噻肟、头孢他啶表现为耐药。结论临床应加强对李斯特菌病的认识,对有高度怀疑的孕妇,应及时作相关细菌学检测,以便早期诊断,合理用药。