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目的 阐明鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化核转录因子NF κB的机制。方法 利用强力霉素Dox诱导表达LMP1的鼻咽癌细胞株Tet on LMP1 HNE2为实验模型 ,首先应用免疫印迹方法测定Dox诱导后不同时相LMP1的表达动力学以及IκBs蛋白量及功能的改变。进而用间接免疫荧光法检测NF κB的亚细胞定位。最后采用瞬间共转染及报道基因活性分析分析NF κB的活性。结果 在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,Dox处理 15分钟后LMP1的表达迅速升高并维持与较高水平直至 12 0分钟。LMP1的诱导性表达导致IκBα的磷酸化并降解 ,但IκBα蛋白总量无改变。继IκBα的磷酸化并降解 ,NF κB(P6 5 )自胞浆易位至胞核且活性升高。IκBα的显性负性突变子抑制NF κB(P6 5 )的核易位及报道活性。LMP1的诱导性表达并未引起IκBβ蛋白水平变化。结论 在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,EB病毒LMP1通过IκBα的磷酸化并降解激活核转录因子NF κB的活性 ,并且 ,LMP1诱导的NF κB活性能被IκBα的显性负性突变子完全抑制。IκBβ在此信号传导途径中无改变。LMP1表达前后IκBα蛋白总量维持恒定可能是由于NF κB的活化迅速启动了IκBα的重头合成这一自身调节环路所致。 相似文献
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LMP1通过Survivin抑制60Co诱导鼻咽癌细胞凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)介导凋亡抑制蛋白 (Survivin)表达对辐射效应的影响。方法 利用LMP1可调控表达鼻咽癌细胞系 (Tet on LMP1HNE2 )诱导LMP1表达 ,同时 60 Co照射 5Gy ,采用形态学观察、流式细胞术和半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)活性检测等方法 ,分析LMP1表达对60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响。用反义Survivin寡核苷酸阻断Survivin表达 ,观察Sur vivin表达阻断对60 Co辐射效应的影响。结果 LMP1表达抑制60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡 ,LMP1表达60 Co照射组形态学和流式细胞术检测凋亡率 (32 .7%± 2 .1% ,6 .3% )明显低于LMP1表达阴性组 (6 6 .0 %± 3.0 % ,2 9.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;转染Survivin反义寡核酸后细胞凋亡率 (5 9.3%± 3.2 % ,3.0 % )明显高于对照组 (2 6 .0 %± 2 .6 % ,8.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;同样转染Survivin反义寡核酸组Caspase 3活性 (3.78nmol/ 10 6)高于对照组 (2 .79nmol/ 10 6)。结论 提示LMP1通过介导Survivin表达而抑制60 Co照射诱导凋亡 ,Survivin反义核酸协同辐射诱导肿瘤细胞凋亡 ,Survivin作为增敏放射治疗靶 ,具有潜在的临床意义。 相似文献
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云南人群中PTPN22和PADI4基因多态性与类风湿关节炎的关联研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨云南人群PTPN22和PADI4基因的7个SNP多态与类风湿关节炎易感性的相关性.方法 选取192例类风湿关节炎患者和288名正常人进行病例对照研究.分别用PCR-RFLP法检测PTPN22基因的rs33996649和1858位点、PADI4基因的rs11203366和rs874881位点,用焦磷酸测序法检测PADI4基因的rs1635579、rs2428736和rs2240340共7个SNP位点的基因型.结果 在7个SNP位点中,PADI4基因的rs2240340位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 在云南人群中PADI4基因的rs2240340多态性与类风湿关节炎的易感性存在相关性. 相似文献
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目的研究傣族、水族和仡佬族人群中常见α地中海贫血基因突变的频率和分布,探讨我国南方少数民族中α地中海贫血的分子流行病学特点。方法AK483例云南省傣族、180例贵州省水族和177例贵州省仡佬族的外周静脉血样本中分离基因组DNA,采用单管多重缺口PCR(Gap-PCR),进行-α^3.7、-α^4.2和-^SEA三种缺失型α地中海贫血基因突变的检测。结果被检测的傣族、水族和仡佬族样本中α地中海贫血基因突变的携带率分别为34.16%、12.22%和5.08%,以云南傣族的携带率最高。-α^3.7、-α^4.2和--^SHA突变的等位基因频率在傣族中分别是14.18%、0.31%和4.14%,在水族中分别是2.50%、0.28%和3.33%,在仡佬族中分别是1.41%、0.56%和0.56%。-α^3.7是傣族中最常见的突变类型,--^SEA则是水族中的常见突变类型。结论云南傣族、贵州水族和仡佬族中有较高的α地中海贫血基因突变携带率,我国南方不同地区和民族之间在基因突变的频率和分布上均有明显差异。 相似文献
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EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过NF-κB、AP-1促进IL-8分泌 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨EB病毒LMP1分子致瘤机制,在已证实鼻咽癌细胞系中LMP1有效激活NF-κB 或AP-1的基础上,对LMP1是否通过NF-κB 或AP-1促进IL-8分泌进行探讨。方法:以稳定表达LMP1及其3种突变体,空白载体的鼻咽癌细胞系[HNE2-LMP1,NHE2-MLP1(1-185),HNE2-LMP1(1-231),HNE2-LMP1Δ187-351和HNF3-pSG5]及antisense-LMP1处理的HNF2-LMP1鼻咽癌的细胞系为材料,将IL-8报道质粒瞬时导入这些细胞系中,通过测定luciferase值以反映LMP1是否促进IL-8转录;将mut AP-1/IL-8-luc或IκB α(S32A/S36A)表达质粒导入HNE2-LMP1细胞系中,比较其IL-8报道活性,以确定LMP1是否通过AP-1或NF-κB 诱导IL-8转录;利用ELISA方法测定HNE2-LMP1,HNE2-pSG5,anti-sese-LMP1处理的HNE2-LMP1鼻咽癌细胞系中的IL-8浓度,进一步从蛋白水平上确定LMP1是否促进IL-8分泌。结果:与HNE2-pSG5相比,在HNE2-LMP1,HNE2-LMP1Δ187-351和HNE2-LMP1(1-231)细胞系中IL-8报道活性分别升高了原来水平的11.5,8.6和3.4倍,而HNE2-LMP1(1-185)对IL-8报道活性不影响。在HNE2-LMP1细胞系中IL-8蛋白水平提高了17.4倍,而antisense-LMP1则使HNE2-LMP1细胞的IL-8报道活性及蛋白水平分别下降到原来水平的18.3%和9.2%,导入mutAP-1/IL-8-luc或IκBα(S32A/S36A)的HNE2-LMP1细胞中IL-8报道活性分别下降到原有水平39%和26%,结论:鼻咽癌细胞系中LMP1可能通过NF-κAP-1促进IL-8表达。 相似文献
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目的探讨米非司酮、米索前列醇、丙酸睾酮联合应用在终止10~14周妊娠中的临床疗效。方法将120例拟终止妊娠的婚育年龄期妇女随机分为两组各60例。对照组给予米非司酮片及米索前列醇片,观察组在此基础上加用丙酸睾酮。比较两组的排胎成功率、排胎时间与阴道出血量。结果观察组完全排胎58例,不全排胎与排胎失败各1例,排胎成功率为96.7%;对照组完全排胎44例,不全排胎13例,排胎失败3例,排胎成功率为73.3%;两组排胎成功率相比差异显著(P<0.05)。观察组服药至排胎时间为(5.41±2.01)h,腹痛至排胎时间为(3.15±1.21)h,均显著短于对照组的(7.63±2.91)h、(5.24±2.06)h,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组阴道出血量为(48.63±12.84)m L,明显少于对照组的(65.73±15.62)m L,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论采用米非司酮、米索前列醇、丙酸睾酮联合终止10~14周妊娠,可以提高排胎成功率,加快引产时间,缩短出血时间而减少出血量。 相似文献
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目的和方法 :肿瘤是一种细胞周期病。D型周期素是调节细胞周期G1 /S期进展的重要正性调节因子 ,包括D1、D2及D3三个亚型 ,尤其是D1已被证实是一种候选瘤基因。我们先前的研究已首次在鼻咽癌活检组织中建立了D型周期素的表达谱 ,发现D型周期素在鼻咽癌活检组织中呈差异性表达。新近的研究表明 ,在B淋巴细胞中EB病毒潜伏膜蛋白LMP1能诱导D2的表达 ,协同D1调节G1 期行进。因此 ,在此基础上 ,本文利用Westernblotting方法进一步检测了EBV -LMP1 ( )及 ( - )的鼻咽癌细胞系CNE -LMP1、HNE1中… 相似文献