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目的 建立人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231顺铂(DDP)耐药细胞株,并对其耐药机制进行初步分析。方法 采用逐步增加顺铂浓度、间歇诱导的方法,建立人三阴性乳腺癌MDA-MB-231/DDP体外耐药细胞模型;MTT法检测MDA-MB-231/DDP的耐药特性;高效液相色谱法检测耐药细胞内DDP药物浓度的改变; 实时荧光定量PCR法分析两种细胞耐药相关基因MDR1、BCRP、MMP7及 GST-π表达差异。结果 MTT显示MDA-MB-231/DDP的顺铂、5-氟尿嘧啶及环磷酰胺的耐药指数分别为9.80、4.43及2.21;高效液相检测显示2种细胞分别与6 μg/ml的DDP接触24 h后,MDA-MB-231细胞内DDP的浓度为(47.10±2.37)ng/(5×104) cells,而MDA-MB-231/DDP细胞则为(6.30±1.64)ng/(5×104)cells(P<0.01);MDA-MB-231/DDP细胞中MDR1、BCRP、MMP7及GST-π基因 mRNA的表达量分别是亲本细胞的15.39、13.73、22.52及44.90倍(P<0.01)。结论 逐步增加浓度、间歇诱导的方法建立了稳定、耐药性较高的MDA-MB-231/DDP细胞株,其耐药机制可能与ABC转运蛋白表达增加等多种机制相关。 相似文献
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[目的]比较八髎穴埋线疗法和乳果糖口服疗法治疗老年功能性便秘的临床疗效。[方法]将60例患者随机分为埋线组和乳果糖组,每组30例。埋线组予八髎穴埋线治疗,每周1次;乳果糖组予乳果糖口服液口服,每日2次,治疗8周。主要疗效指标为每周自发完全排便(spontaneous complete bowel movements,SCBM)≥3次的患者比例;比较治疗前后及随访第12周的疗效,包括周平均SCBM、患者生存质量评分(PAC-QOL)、Bristol大便性状积分和排便困难程度评分。[结果]治疗后埋线组每周SCBM≥3次的患者比例与乳果糖组比较差异有统计学意义(P<0.01);与本组治疗前比较,埋线组和乳果糖组患者治疗后周平均SCBM次数增加(均P<0.05),大便性状积分改善(均P<0.01),PAC-QOL评分和排便困难程度评分均降低(均P<0.01);治疗8周后埋线组周平均SCBM次数明显多于乳果糖组(P<0.01),PAC-QOL量表评分、Bristol大便性状和排便困难程度改善均优于乳果糖组(P<0.05);随访12周埋线组周平均SCBM次数多于乳果糖组(P<0.01)。[结论]八髎穴埋线可以明显增加老年功能性便秘患者的SCBM,改善Bristol大便性状和排便困难程度,提高其生活质量。 相似文献
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目的:建立胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株,研究Oct-4基因在胃癌顺铂耐药中的作用。方法:使用顺铂逐步增加剂量法诱导胃癌BGC-823细胞,以建立其多药耐药细胞株BGC-823/DDP;MTT细胞毒实验检测顺铂对肿瘤细胞的细胞毒作用;半定量RT-PCR检测Oct-4基因的表达;基因转染干扰Oct-4表达;Western blot实验检测Oct-4蛋白的表达改变。结果:经过30~34周的诱导我们建立了胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株;MTT细胞毒实验结果显示顺铂对BGC-823和BGC-823/DDP细胞的IC50值分别为(2.33±0.12)和(21.46±0.97)μmol/L(P<0.01),与BGC-823细胞比较,BGC-823/DDP细胞对顺铂耐药是其9.21倍;半定量RT-PCR检测显示胃癌耐药株BGC-823/DDP高表达Oct-4基因;Western blot结果显示化学合成的siRNA可以靶向下调Oct-4蛋白的表达;siRNA干扰BGC-823/DDP细胞Oct-4基因的表达后,BGC-823/DDP细胞对顺铂的的IC50值从(22.04±1.84)μmol/L减小到(6.15±0.53)μmol/L,二者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:研究结果表明,Oct-4基因的高表达在胃癌顺铂的耐药中起着重要的作用。 相似文献
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目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中T淋巴细胞亚群的表达及与预后的关系.方法 采用流式细胞技术,根据白细胞表面抗原分化群(CD)检测92例NSCLC 患者外周血中的CD3+、CD4+、CD8+、CD19+及CD25+细胞,以健康人群做对照,结合临床病理及随访资料进行分析.结果 NSCLC患者CD3+、CD8+细胞明显低于健康对照组(P<0.01),CD25+细胞显著高于对照组(P<0.01),CD19+细胞高于对照组(P<0.05).CD4+细胞两组间无差异(P >0.05).Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血CD4+、CD25+T细胞水平较Ⅲ、Ⅳ期患者高(P<0.01).鳞癌患者外周血CD8+T细胞水平较腺癌患者高(P<0.01).结论 T细胞淋巴亚群在机体肿瘤免疫中的作用和地位不能单从数量上来判断机体的免疫状态,联合多因子检测才能较完整的反映机体的免疫状态. 相似文献
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目的探讨Bmi-1、P14及P16蛋白在结肠癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选择60份结肠癌组织标本及60份癌旁正常结肠组织,采用组化免疫方法染色,观察Bmi-1、P14及P16蛋白的表达强度、阳性率及其相关关系。结果Bmi-1蛋白在结肠癌组织中表达强度、阳性率高于正常结肠组织,P14及P16蛋白在结肠癌组织中表达强度及阳性率低于正常结肠癌组织。相关性分析发现,结肠癌组织Bmi-1蛋白表达同P14及P16蛋白表达呈负相关关系(r=-0.419,P〈0.05;r=-0.372,P〈0.05),P14同P16蛋白表达呈正相关关系(r=0.537,P〈0.05)。结论Bmi-1蛋白在结肠癌组织过度表达,其可能对P14及P16蛋白的负向调控在结肠癌的发生及发展中发挥作用。 相似文献
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