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目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)过表达对人骨肉瘤细胞系143B的生物学行为的影响.方法 用RTPCR和Western blot检测骨肉瘤细胞系中BMP9的内源性表达,用表达BMP9的腺病毒重组体(adBMP9)感染内源性表达BMP9相对较低的骨肉瘤细胞系,Transwell法检测细胞侵袭,划痕愈合实验检测细胞迁移,MTT法和结晶紫染色法检测细胞的增殖,Hoechst 33258染色法检测凋亡,平板集落形成实验检测集落形成能力.结果 adBMP9可以明显减弱骨肉瘤细胞系143B的增殖、迁移、侵袭及集落形成能力(P<0.05),并促进细胞凋亡.结论 adBMP9能抑制人骨肉瘤细胞系143B的增殖和迁移,促进细胞凋亡. 相似文献
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目的:研究 BUB1基因表达调控对染色体分离的影响。方法:用定量 RT-PCR 比较 RNA 干扰前后的胚胎细胞内源性基因 BUB1的 mRNA 水平,同时对染色体数目异常率进行比较分析。结果:干扰后 BUB1基因 mRNA 拷贝数/GAPDH 基因 mRNA 拷贝数的均值为干扰前的21.80%,染色体数目异常率均值由干扰前 5.02%上升到29.61%。经统计分析,RNA 干扰前后 BUB1基因 mRNA 水平和染色体数目异常率有显著差异。结论:BUB1基因表达的降低会导致染色体分离的异常,本研究为染色体分离相关蛋白功能研究建立了新的研究手段和实验评价体系。 相似文献
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目的评估马拉松赛对业余选手心血管、呼吸功能的影响。方法业余选手50名,参加马拉松全程26人,半程24人。赛前1周进行体检,比赛当天选择与心血管呼吸功能相关项目22项进行现场采血监测,并与赛后进行比较。结果体检未发现心肺疾病;赛后血压略低于赛前,心率明显快于赛前(P<0.01),PaO2明显低于赛前,PvO2、CvO2显著低于正常,Ca-vO2明显高于正常值(P<0.01),PaCO2、PvCO2低于赛前;BU赛后显著增高(P<0.01);CK、CK-MB和LDH赛后显著高于赛前,高出正常值数倍(P<0.01)。结论马拉松赛对于业余选手的机体尤其对心肺功能是一种极限挑战。多项监测结果出现异常,个别选手的少数项目为严重异常,确实具有潜在危险。这提醒马拉松运动爱好者赛前应有训练,赛中应量力而行,不能盲目挑战自我,要预防意外事件的发生。 相似文献
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目的:观察犬眼室内爆炸冲击波损伤后早期眼组织结构的病理学改变。方法:爆轰塔内B炸药爆炸致眼冲击伤,根据对眼球的不同爆炸强度随机分组:A组549mmHg;B组1089mmHg;C组2128mmHg;D组无致伤对照组。均分别于伤后0.5h和6h处死动物,取眼组织标本于40g/L中性甲醛溶液固定,行常规石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察,拍照。结果:眼部冲击伤后即刻出现球结膜充血、水肿,脉络膜出血,有明显的视网膜血管改变,组织水肿、渗出、出血等改变。结论:爆轰塔内B炸药爆炸致眼冲击波可造成视网膜、脉络膜、视神经的直接损伤。 相似文献
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目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region, UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。 相似文献
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目的 :采用体外共培养技术模拟骨肉瘤微环境,研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对人骨肉瘤143B细胞增殖和迁移的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法 :将重组腺病毒Ad CTGF导入骨肉瘤143B细胞,然后与骨髓基质细胞HS-5建立间接共培养体系。共培养3 d后,采用MTT法检测143B细胞的增殖能力变化,划痕愈合实验和Transwell小室法检测143B细胞的迁移能力变化,RT-PCR法及蛋白质印迹法检测CTGF和β-连环素(β-catenin)的表达水平变化,蛋白质印迹法检测磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(phosphorylated glycogen synthase kinase 3β,p-GSK3β)的表达水平变化。结果 :重组腺病毒Ad CTGF感染后,共培养体系中骨肉瘤143B细胞的CTGF过表达。在体外模拟的骨肉瘤微环境中,过表达CTGF能有效促进骨肉瘤143B细胞的增殖(P<0.01),且明显提高细胞划痕愈合率和穿膜细胞数(P<0.01)。过表达CTGF后,143B细胞中β-catenin、p-Akt和p-GSK3β表达水平均显著上调(P均<0.05)。结论 :在模拟骨肉瘤微环境中过表达CTGF可促进骨肉瘤143B细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt和Wnt/β-catenin信号通路有关。 相似文献
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目的:观察右美托咪定联合纳布啡对椎管内麻醉剖宫产术中寒战的临床效果。方法:选择腰硬联合麻醉剖宫产的初产妇90例,采用随机数字法分为右美托咪定组(D组)、纳布啡组(N组)、右美托咪定+纳布啡组(DN组),各30例。D组泵注右美托咪定,N组静推纳布啡,DN组静脉推注纳布啡且泵注右美托咪定。结果:DN组患者寒战的发生率明显低于D组、N组患者(P0.05);DN组患者恶心呕吐的发生率明显低于D组、N组患者(P0.05)。结论:右美托咪定联合纳布啡应用于剖宫产术中可有效预防寒战的发生,且不良反应少。 相似文献
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目的 探索绒毛组织滋养层细胞原代培养、纯化的有效方法及最佳转染方法.方法 分离妊娠7周内的人工流产胚胎的绒毛组织进行滋养层细胞的培养和纯化.用细胞免疫化学方法对培养细胞进行鉴定;用MTT实验方法绘制滋养层细胞的生长曲线;用细胞贴壁率找到最适pH;用细胞存活分数评价转染的最佳脂质体用量.结果 成功寻找到滋养层细胞原代培养和纯化的有效方法;细胞消化传代后的12~48 h滋养层细胞处于对数生长期,pH 6.8~7.0为培养液最适pH范围;并找到质粒转染滋养层细胞的最佳脂质体用量.结论 成功培养和纯化滋养层细胞,并找到滋养层细胞的最佳转染方法. 相似文献