神经营养因子-3 cDNA的克隆以及在酿酒酵母中的分泌性表达

从原代培养人许旺细胞申提取总RNA，用RT－PCR方法获取了编码带向导肽和成熟的NT-3两个cDNA片段，经DNA序列测定表明其顺序与文献报道一致。将这两个cDNA片段克隆到大肠-酵母穿梭质粒pVT102U／α上。用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞，经筛选后，获得分泌性表达。这两种cDNA片段的表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定，大小都在15ku左右，说明带前导肽的NT-3在酵母细胞中获得了正确的加工。将这两种部分纯化的NT－3样品经鼠胚背根神经节生物活性分析，表明具有明显的促进细胞存活和突起生长的作用。人神经营子-3％在酿酒酵母系统获得有生物活性的表达。     

猪胰激肽释放酶的酶学性质

<正> 激肽释放酶为内切性蛋白水解酶,具有重要的生理、药理作用,因此该酶在性质和应用研究的进展极受关注。本文仅对猪胰激肽释放酶的酶学性质作一简要概述,供参考。哺乳动物的组织激肽释放酶主要分布在动物的胰脏、颌下腺、唾液、尿之中。而以胰脏     

一例凝血因子Ⅷ1680A→G点突变

为了研究在无内含子２２倒位的甲型血友病中的ＦⅧ基因的其他遗传性点突变。应用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）、单链构象多态性（ＳＳＣＰ）对５１例无内含子２２倒位的甲型血友病患者的ＦⅧ基因外显子１４３′侧进行研究。结果发现一例遗传性点突变，密码子１６８０ＴＡＴ（酪）→ＴＧＴ（半胱）的突变。阐明甲型血友病的点突变有助于了解ＦⅧ蛋白各功能域的精细功能，为甲型血友病家系携带者检测和产前诊断提供一种有价值的方法     

蛋白质一级结构测定的新进展

1.序言蛋白质一级结构的研究虽没有象最近核酸特别是DNA结构测定那样飞跃发展,但也取得了一定进步。十几年前几乎是不可思议的.分子量在十万左右的一条多肽链,如构成胶原蛋白的一个亚基,β-半乳糖苷酶,磷酸化酶等的一级结构都相继完成。此外在各种微量分析的技术方面仅毫微克分子甚至微微克分子水平即可进行结构分析。可以予期不久将来数毫克的原料就可能很快地测定其一级结构。关于蛋白质一级结构的研究,从氨基酸的分离     

牛碱性成纤维细胞生长因子cDNA的克隆及其酵母重组表达质粒的构建

根据已有资料设计并合成引物，利用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到牛ｂＦＧＦｃＤＮＡ全序列，经过序列分析后，建立其酵母分泌型表达质粒ｐＶＴ１０２Ｕ／ａ－ｂｂＦＧＦ。     

猪胰激肽释放酶和胰酶联产的研究

前言胰脏是生物体内唯一具有内、外分泌腺功能的腺体。既分泌胰岛素、胰高血糖素等激素,也分泌各种蛋白酶,如胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶、羧肽酶等,以及淀粉酶、脂肪酶等消化酶,是动物生化制药     

激肽释放酶激活纤溶酶原机理的研究

作者研究了血浆和组织激肽释放酶激活纤溶酶原的机制。经SDS-PAGE和HPLC分析,提示血浆激肽释放酶裂解纤溶酶原的位点与t-PA、UK的相同,只是前者的酶反应速度明显低于后二者。组织激肽释放酶裂解纤溶酶原的位点除了与血浆激肽释放酶相同的部份外,尚有其它作用位点。因此认为这两种激肽释放酶激活纤溶酶原的机制不完全相同。     

壳聚糖酶的纯化、基因克隆、及其酶学特性的鉴定

从被污染的酵母培养液中分离到-菌株,经鉴定为一种革兰氏阳性杆菌,其所分泌的主要蛋白产物经纯化后,测定了它的N-端氨基酸序列,与已知的几种内切壳聚糖酶十分类同.根据其同源DNA序列,通过PCR方法克隆了其全长基因.该菌株生长极快,其组成型分泌产物主要为内切壳聚糖酶.该酶通过疏水层析和分子筛两步即得到纯化.进一步研究了该酶的酶学性质及其催化壳聚糖降解为壳寡糖的条件.提高该壳聚糖酶的产率后,有望用于壳寡糖的生产,有实际应用价值.     

胰酶中多种蛋白水解酶的分离和纯化

报道了一条综合利用胰酶的有效途径。对其中的羧肽酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶等六种蛋白酶同时进行了分离和纯化。还对羧肽酶 A 和 B 的固定化条件及稳定性进行了探讨。