相对定量检测HIV/AIDS病人PBMCs中TIGIT mRNA表达水平的方法建立

目的建立检测人外周血单个核淋巴细胞(PBMCs)中T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域(TIGIT)信使核糖核酸(mRNA)表达水平的相对定量方法,并探讨TIGIT在艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)临床监测中的意义。方法设计基因TIGIT引物3对,并利用超声波-煮沸法提取人PBMCs总RNA,选用管家基因GAPDH作为内参,然后用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行反转录及扩增TIGIT基因。利用软件测定电泳条带的灰度值(IOD),计算TIGIT mRNA的相对表达量。结果超声波-煮沸法提取的RNA纯度(A260/A280=1.71±0.056)优于超声波法(A260/A280=1.51±0.023)和煮沸法(A260/A280=1.375±0.078);筛选出扩增条带清晰且单一的TIGIT引物;相对定量结果表明,TIGIT mRNA在HIV/AIDS病人中的相对表达量均数(0.520 4±0.067)显著低于健康人群(1.383±0.093),差异有统计学意义(t=7.206,P=0.0167)。结论所建立的相对定量RT-PCR检测方法具有成本低、简单易行的优点,可应用于检测HIV/AIDS病人外周血中TIGIT mRNA的表达差异。     

国产高敏HCV-RNA定量试剂与国产普敏及进口高敏试剂一致性分析

目的 分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法 选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与国产普敏HCV-RNA核酸检测试剂B进行HCV-RNA定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果均为阳性的样本（≥500 IU/mL,87例）进行Bland-Altman一致性分析;选择稀释样本（15～500 IU/mL,60例）,采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂C进行HCV-RNA平行定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果进行Bland-Altman一致性分析。结果 Bland-Altman分析显示试剂A与试剂B定量值差值均值为（-0.032 6）log10IU/mL,95%置信区间为（-0.462 6～0.397 4）log10IU/mL,95.4%(83/87)的样本检测值在95%置信区间内。试剂A与试剂C定量值差值均值为0.180 0 log10IU/mL,95%可信...     

NGS检出脑脊液样本中布尼亚病毒1例报道及文献复习

发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)是由布尼亚病毒[又称发热伴血小板减少综合症病毒(Severe fever with thrombocytopenia virus,SFTSV)]导致的以发热伴血小板减少为主要临床特征的感染性疾病.在...     

无偿献血者HIV初筛检测策略探讨

目的探讨无偿献血人群HIV初筛检测策略,为采供血单位制定合理的HIV筛查方案提供试验数据支持,以供参考。方法收集2011年2月~2013年5月合肥市无偿献血者的血液标本214 807份。每份血液标本分别用1种进口试剂(伯乐)和1种国产试剂新创/万泰)同时进行EIA检测,对至少1种试剂呈反应性的标本用WB(蛋白免疫印迹)法进行确认检测。并对所搜集到的214 807份标本检测结果进行ROC分析。结果 1)EIA检测结果:用EIA法检测标本214 807份,其中119 127份标本用伯乐和新创试剂联合检测,95 680份标本用伯乐和万泰联合检测;2种试剂检测的S/CO值都在0~0.5组段的标本有214 436例,直接判为真阴性;呈反应性标本共371例,其中伯乐试剂和新创试剂检测均呈反应性的有24例,伯乐试剂和万泰试剂检测均呈反应性的有18例;伯乐、新创和万泰试剂检测单独呈反应性的分别是232、66、31例,反应率分别为0.11%、0.06%、0.03%。2)WB检测结果:371例初筛呈反应性标本,经WB确证检测,阳性28例,不确定32例,阴性311例;初筛检测S/CO值在0.5~1.0组段的所有标本,经WB检测,没有阳性结果。伯乐、新创、万泰试剂检测呈反应性的标本中,经WB检测后真阳性率分别为10.22%、17.78%、24.49%。3)全部标本检测资料的ROC分析:对3种试剂检测结果分别进行ROC分析,3种试剂的ROC之AUC均大至极限状态,近似为1.000;3种检测结果经z检验,两两比较的P>0.05,无统计学显著性差异;当S/CO值为1.0时,3种试剂的灵敏度近似为1.000;特异度在0.999~1.000。4)伯乐试剂初筛呈反应性标本资料的仿ROC分析:ROC-AUC为0.907,S/CO值在3.8以上并靠近6.0时的灵敏度较高,特异度为0.75以上。结论伯乐、新创和万泰试剂检测标本的反应率差异无统计学意义;进行初筛检测时,使用3种试剂任意之一进行检测即可,反应性判断阈值以1.0起为好;伯乐试剂检测的S/CO值高于6.0的标本,可以考虑判为阳性标本,无需做重复检测。     

合肥地区耐多药结核分枝杆菌异烟肼、链霉素及 乙胺丁醇耐药相关基因位点表达研究

目的研究耐多药结核分枝杆菌异烟肼(INH)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)耐药相关基因位点的表达情况。方法选取该院2013年1月至2017年12月临床分离的101株耐多药结核分枝杆菌,利用测序法和基因芯片法分别检测INH、SM和EMB耐药相关基因及突变位点。结果 101株耐多药结核分枝杆菌中对SM耐药率69.3%;对EMB耐药率51.4%;对SM和EMB二者均耐药的耐药率44.5%。基因芯片法检出95例INH耐药相关基因突变,其中katG基因315M位点突变率为77.8%;inhA基因-15M位点突变率为89.4%。检出64例rpsL SM耐药相关基因,其中43M位点突变率为89.0%;88M位点突变率为11.0%。检出47例embB EMB耐药相关基因,以306M2位点突变为主,突变率为68.0%。测序法检出98例INH耐药相关基因突变,katG基因突变以315位点为主突变率为73.4%;inhA基因突变以-15位点为主突变率为87.7%;oxyR-ahpC基因-12和-10位点突变率分别为10.2%和8.2%。检出68例SM耐药相关基因突变,rpsL基因以43位点为主突变率为86.8%;rrs基因512、513、516位点突变率分别为5.9%、8.8%、8.8%。检出50例EMB耐药相关基因embB以306位点为主突变率为88.0%。结论耐多药结核分枝杆菌INH、SM及EMB耐药基因位点表达可作为结核分枝杆菌临床检测耐药性的有效依据,为提高耐多药结核分枝杆菌耐药性检测的敏感度,应将INH耐药相关oxyR-ahpC基因和SM耐药相关rrs基因纳入我国快速分子诊断产品中。     

丙型肝炎患者病毒载量与ALT、AST的相关性研究

目的 研究实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测丙型肝炎病毒(HCV)载量与生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)]的相关性.方法 采用实时荧光定量PCR检测56例丙型肝炎患者血清HCV RNA,同时用全自动生化分析仪检测ALT、AST水平.结果 56份样本中HCV RNA阳性率为57.1%(32/56),HCV RNA阳性样本中ALT、AST异常率明显高于HCV RNA阴性样本.HCV RNA含量高、低与ALT、AST异常率呈正相关,但与ALT、AST水平无关.结论 HCV RNA定量检测及结合ALT、AST检测结果分析有助于了解HCV在体内的复制水平和肝脏炎性反应状态,指导临床用药及观察疗效.     

甲亢患者心肌酶变化的临床分析

目的通过对患者临床症状及心肌酶变化的分析，客观评价甲亢及心肌损害的临床意义。方法对37例甲亢伴心律失常患者及35例健康者的乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶（HBDH）、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶项目进行检测，并作对照分析。结果甲亢患者心肌酶除HBDH与健康对照组无明显差异外，其余各项指标与健康对照组相比较差异有统计学意义（P〈0．01），甲状腺激素的异常与心肌酶指标升高呈正比。结论甲亢患者的心肌酶检测有助于客观评价甲亢病情及心肌损害的受累程度。     

自身免疫性肝炎的实验室诊断及其研究进展

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一组原因不明的肝脏慢性炎性反应,伴血清自身抗体、高丙种球蛋白血症、肝脏慢性纤维化等组织学改变的反应性肝病,发病机制尚不完全明确,细胞因子、免疫细胞、遗传背景、免疫调节网络等因素的综合作用可能导致肝细胞损伤[1].     

结核病实验室诊断方法的现状与进展

结核病作为世界上最致命的传染病之一,是全球性危害公众健康的公共卫生问题。我国是结核病高负担国家,发病人数仅次于印度,结核病防控形势依然严峻,所以早期迅速、准确诊断是防治结核病的关键。近年来,为更好控制、诊断结核病,国内外已开展多项研究并取得了一定的创新结果。因此,本研究将从细菌学、免疫学、分子生物学的相关检测及结核病组学研究等方面总结结核病实验室诊断的现状与进展,并作如下综述。